Avaliação da expressão genica do estresse oxidativo e da defesa antioxidante em rim de camundongos, submetidos a isquemia e repercussão intestinal, sob oxigenação hiperbólica

Abstract

Objetivo: determinar o perfil da expressao genica relacionado ao estresse oxidativo e a resposta antioxidante em rim de camundongos submetidos a isquemia e reperfusao de intestino delgado e submetidos a oxigenacao hiperbarica. Metodos: Trinta camundongos (C57-BL/6) foram submetidos a anestesia, laparotomia, sendo vinte e quatro animais submetidos a isquemia intestinal de 60 minutos seguido de 60 minutos de reperfusao. Tres desses grupos com seis animais foram submetidos a oxigenacao hiperbarica em periodos distintos: durante a isquemia (GOHB-I), durante o periodo de reperfusao (GOHB-R), nos periodos de isquemia e reperfusao (GOHB-IR) e um grupo nao recebeu a OHB (GIR). Um grupo foi somente anestesiado, operado, sem realizar clampeamento vascular do intestino (GC). Foram coletados especimes de intestino e rim para estudo histologico (coloracao HE) e avaliacao do grau de lesao morfologica. A expressao de 84 genes foi determinada pelo sistema, da Reacao de Polimerase em Cadeia em Tempo Real (RT-qPCR - SA BiosciencesTM - Quiagen Co). Para dados da expressao genica foi considerada a variacao do ciclo limiar (Ct) do grupo estudo comparado com o ciclo limiar (Ct) grupo controle expressos na base logaritmica (2) pela formula [2-ΔΔCt], admitido um p≤0,05 para rejeicao da hipotese de nulidade. Resultados: nos animais do grupo GIR, houve expressao genica acima do limiar de normalidade, mostrando relacao da isquemia intestinal com o estresse oxidativo no tecido renal. Nos grupos GOHB-R (36.9%) e no GOHB-IR (47.6%), tambem ocorreu expressao acima do limiar de normalidade. No GOHB-I (8,3%), houve reducao do numero de genes com expressao acima da normalidade, evidenciando uma acao favoravel da OHB nessa situacao sobre o estresse oxidativo e da defesa antioxidante. Conclusoes. A IR intestinal promoveu um perfil de hiperexpressao dos genes relacionados ao estresse oxidativo e defesa antioxidante a distancia sobre o tecido renal. A aplicacao da OHB durante a isquemia promoveu uma significante reducao no numero de genes expressos acima do limiar da normalidade. A OHB aplicada durante a reperfusao ou na isquemia/reperfusao manteve um perfil similar ao do grupo controle