Efeito do bloqueio nao seletivo das cicloxigenases na lesao da celula endotelial submetida a hipoxia gasosa

Abstract

As prostaglandinas sao importantes mediadores da fisiologia renal. A principal enzima que comanda a sintese das prostaglandinas, e a cicloxigenase (COX). A COX converte o acido aracdonico em prostaglandinas. Duas isoformas da COX foram identificadas e sao conhecidas como COM e COX-2. A COX-1, e produzida constitutivamente enquanto que a COX-2 e uma isoforma induzivel. A deprivacao de oxigenio seguida de isquemia induz uma cascata de eventos culminando em ativacao celular, peroxidacao lipidica e fragmentacao de DNA que, por fim, levam a morte celular. Especies Reativas de oxigenio sao os principais mediadores destes eventos, gerados em parte pela acao da COX., Investigamos a expressao de RNA mensageiro da COX-1 e -2 durante a ativacao endotelial secundaria a hipoxia. Celulas endoteliais imortalizadas de camundongo foram submetidas por 30 minutos de deprivacao de oxigenio, atraves da infusao de uma mistura de gas nitrogenio e C02. Os corantes acridine orange e brometo de etideo e a enzima dehidrogenase lactica foram usadas para monitorizar a viabilidade celular. O RNAm da COM e -2 foi amplificado e semi-quantificado antes e apos a hipoxia, em celulas tratadas ou nao com indometacina, um inibidor nao seletivo da COX. A expressao de RANTES tambem foi investigada como um marcador de ativacao da celula endotelial. A infusao de gases no frasco com as celulas endoteliais induziu uma hipoxia substancial com diminuicao de 45,12 ± 5,85 por cento em p02. O DHL aumentou nestas celulas submetidas a hipoxia comparadas com o grupo controle (20,27 para 37,44 por cento, p<0,001). Trinta minutos de hipoxia tambem induziram uma diminuicao na viabilidade celular (96,3&#61617;2,3 para 78,9&#61617;4,8). A COX-2 aumentou apos a hipoxia. O tratamento com indometacina diminuiu ambas expressoes de RNAm da COX-1 e COX-2. As celulas tratadas com indometacina tiveram melhor viabilidade apos a hipoxia e diminuiram a expressao de RNAm de RANTES. O bloqueio da expressao de RNAm de COX, que esta presente no inicio do evento da hipoxia, pode melhorar a injuria endotelial. Este bloqueio induz melhor viabilidade celular e tem efeito na producao de RANTES, uma quimiocina implicada na atracao e ativacao dos leucocitos, possivelmente inibindo a transmigracao destas celulas no tecido inflamado