Caracterizacao bioquimica e funcional de ecto-fosfatases em Fonsecaea pedrosoi

Abstract

As diferentes formas de F. pedrosoi, agente etiologico da cromoblastomicose, apresentam atividades fosfatasicas de superficie, como demonstrado pela capacidade das celulas fungicas de hidrolisar diferentes substratos fosforilados. Para caracterizacao enzimatica foram utilizadas as formas de conidio e micelio de F. pedrosoi. As atividades ecto-fosfatasicas foram inibidas com o aumento do pH, o que indicou o caracter acidico dessas enzimas. Essas atividades foram tambem sensiveis a imbidores classicos de fosfatases acidas como ortovanadato de sodio, molibdato de sodio e fluoreto de sodio, sendo insensiveis ao levamizol e tartarato de sodio. O efeito de diferentes cations nas atividades fosfatasicas foi testado. A atividade das formas micelianas foi estimulada por Zn2+, enquanto que os conidios apresentaram maiores niveis de atividade fosfatasica quando incubados na presenca de Fe 2+. A localizacao citoquimica de atividade enzimatica indicou a presenca da fosfatase acida na parede celular de formas micelianas de F. pedrosoi. A atividade fosfatasica de superficie de F. pedrosoi parece estar associada com o parasitismo, uma vez que as celulas escleroticas, encontradas na lesao tecidual, apresentaram maior atividade enzimatica, quando comparada ao micelio e conidios. Alem disso, indutores de diferenciacao celular de F. pedrosoi foram capazes de estimular a atividade ecto-fosfatasica de celulas micelianas, sugerindo uma associacao entre atividade ecto-fosfatasica e morfogenese fungica. Constatamos ainda que recente isolado humano de F. pedrosoi apresentou atividade fosfatasica superior a detectada em amostra submetida a varias passagens em meio sintetico, sugerindo que a expressao de fosfatases de superficie no F. pedrosoi pode ser modulada por interacoes com o hospedeiroa(au)