Caracterização de inibidores da coagulação sanguínea e da agregação plaquetária presentes na saliva do carrapato Amblyomma cajennense (Acari: Ixodidae) (Fabricius, 1787)

Caracterização de inibidores da coagulação sanguínea e da agregação plaquetária presentes na saliva do carrapato Amblyomma cajennense (Acari: Ixodidae) (Fabricius, 1787)

Alternative title Characterization of blood coagulation and platelet aggregation inhibitors present in the saliva of tick Amblyomma cajennense (Acari: Ixodidae) (Fabricius, 1787)
Author Simons, Simone Michaela Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Chudzinski-Tavassi, Ana Marisa Autor UNIFESP Google Scholar
Abstract Os carrapatos constituem um dos mais importantes grupos de artropode parasitas hematofagos de animais domesticos, silvestres e do homem. 0 Amblyomma cajennese constitui uma das principais especies de vetores de varios patogenos causadores de doencas como a babesiose, febre maculosa e Lyme simile. Objetivo: Avaliar a atividade da saliva do carrapato Amalyomma cajennese sobre os mecanismos de coagulacao, agregacao de plaquetas e fibrinolise, alem de isolar e caracterizar um inibidor de Fator Xa, um inibidor de trombina e um inibidor de agregacao plaquetaria. Metodos: A obtencao da saliva bruta foi realizada seguindo o metodo de Tatchell modificado. A atividade inibitoria sobre FXa e trombina, tanto da saliva bruta quanto das fracoes obtidas apos cromatografia foram avaliadas utilizando-se os substratos cromogenicos S-2765 e S-2238 respectivamente; a atividade fibrinolitica foi verificada em placas de fibrina humana, contendo plasminogenio e a inibicao da agregacao plaquetaria foi verificada tanto em PRP (induzida por ADP, colageno, ristocetina e acido araquidonico) quanto em plaquetas lavadas (induzida por colageno. Tanto o p1 quanto as massas moleculares das proteinas da saliva foram determinados por eletroforese bi-dimensional. 0 fracionamento das proteinas da saliva foi realizado atraves de cromatografia de troca ionica (Resource Q) eluida com um gradiente linear de NaCI (0-500mM), as fracoes com atividade inibitoria sobre FXa, trombina e agregacao plaquetaria foram separadas em pools, sendo que o Plli que apresentava atividade inibitoria sobre o FXa foi submetido a uma gel filtracao (TSK gel 2000 sw) e o material obtido denominado Amblyomim-X. A capacidade inibitoria do Amblyomin-X foi analisada frente diferentes condicoes (efeito de ions calcio, presenca de deferentes concentracoes do inibidor, diferentes tempos de incubacao e na presenca de componentes do complexo protrombinase). Resultados: A saliva bruta inibiu o FXa, a trombina e a agregacao plaquetaria, e um inibidor de FXa de cerca de 67kDa, denominado Amblyomin-X foi isolado. 0 Ambiyomin-X inibiu de forma eficiente e rapida o FXa isolado (IC50 de 4,7gg) e tambem inibiu a geracao de trombina no complexo protrombinase de forma dose...(au)
Keywords Inibidores dos Fatores de Coagulação Sanguínea
Carrapatos
Coagulação Sanguínea
Agregação Plaquetária
Ticks
Blood Coagulation Factor Inhibitors
Blood Coagulation
Platelet Aggregation
Language Portuguese
Date 2003
Published in São Paulo: [s.n.], 2003. 99 p.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 99 p.
Access rights Closed access
Type Dissertation
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/18423

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