Padroes de expressao e localizacao das familia das proteinas do gene do retinoblastoma e do fator de transcricao E2F durante o desenvolvimento e diferenciacao celular da cornea: estudo in situ
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Data
2002
Autores
Francesconi, Claudia Maria [UNIFESP]
Orientadores
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
O objetivo deste trabalho e determinar in situ os padroes de expressao e localizacao das familias do gene do retinoblastoma e do fator de transcricao E2F nos epitelios corneano e limbar, bem como nos ceratocitos da cornea, durante seu desenvolvimento e diferenciacao. E tambem correlacionar a localizacao das proteinas reguladoras do ciclo celular com o estado de proliferacao das celulas epiteliais e dos ceratocitos. Para este experimento foram preparadas seccoes por meio de criopreservacao de corneas de ratos neonatos, jovens e adultos. As celulas epiteliais do limbo e da cornea, e os ceratocitos do estroma foram examinados e localizados por microscopia imunofluorescente indireta, usando anticorpos comerciais contra a proteina do retinoblastoma e seus membros familiares proximos, a proteina p107 e a p130; os membros da familia dos fatores de transcricao E2F; E2F-1, E2F-2, e E2F-4; e o antigeno de proliferacao Ki67 um marcador de celulas que estao ativamente ciciando. A transcricao reversa da reacao em cadeia da polimerase foi usada para determinar se o acido ribonucleico mensageiro para a proteina do retinoblastoma, a p107, a p130, o E2F-1, o E2F-2, o E2F-3, o E2F-4, e o E2F-5 estavam presentes no epitelio comeano adulto. 0 Ki67 foi localizado na camada basal corneana e no epitelio limbar com o maior numero de celulas marcadas entre o decimo terceiro e o decimo nono dias. Alguns ceratocitos estromais foram marcados ate o decimo nono dia, porem em maior numero no segundo dia. Em corneas de adultos, nenhum Ki67 foi descoberto nos ceratocitos ou nas celulas suprabasais do epitelio. A analise da transcricao reversa da reacao em cadeia da polimerase indicou que o acido ribonucleico mensageiro para todos os membros das familias da pRb e do E2F estava presente no epitelio corneano adulto. A pRb e o E2F-2 foram localizados em todas as celulas das corneas neonatas, jovens e adultas, inclusive nas suprabasais do epitelio que sao terminalmente diferenciadas. A p130 exibiu uma localizacao citoplasmica difusa ate o periodo entre nove e 11...(au)
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 2002. 114 p. ilus.