Expressão da proteína Mint1 no hipocampo de ratos submetidos ao modelo de epilepsia do lobo temporal induzido pela pilocarpina

Abstract

Objetivo: A Mint1 (Munc-18 interacting protein) atua na pre-sinapse como uma proteina marcadora de sinapses, de exocitose, alem de estar relacionada com os mecanismos que envolvem a fosforilacao de proteinas no residuo de tirosina, podendo assim, ser considerada uma proteina envolvida na plasticidade do sistema nervoso central. A Mint1 tambem desempenha um papel importante na pos-sinapse, participando no direcionamento das subunidades NR2B dos receptores NMDA para a membrana plasmatica dos dendritos. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi estudar a expressao da proteina Mint1 no hipocampo de ratos, nas diversas fases do modelo de epilepsia do lobo temporal, induzido por pilocarpina. Metodos: A determinacao da alteracao na concentracao da Mint1 no hipocampo dos ratos experimentais e controles, foi feita por meio da separacao das proteinas em gel de poliacrilamida e SDS e analise por Western Blotting. A expressao da proteina Mint1 no hipocampo dos ratos foi visualizada por imunohistoquimica. Resultados: Os resultados da analise por Western Biotting coincidem com os achados da imunohistoquimica assim, os animais submetidos a 1 hora de SE (1 HSE) apresentaram concentracao e imunomarcacao de Mint1 semelhante aos animais controles. Os animais submetidos a 5 horas de SE (5HSE) mostraram uma diminuicao hipocampal desta proteina e os animais pertencentes aos grupos silencioso e cronico mostraram um grande aumento da Mint1, quando comparados aos respectivos grupos controles. Conclusoes: Houve um aumento marcante na expressao da proteina Mint1 no hipocampo dos ratos dos grupos silencioso e cronico. Assim podemos sugerir uma participacao da Mint1 nos eventos relacionados aos episodios de hiperexcitabilidade neuronal transitoria (SE) e duradoura, uma vez que a Mint1 esta relacionada as sinapses excitatorias, que envolvem o receptor NMDA. Entao, a Mint1 poderia ser utilizada como proteina marcadora de plasticidade neuronal, sinalizando um...(au)

Purpose: Mint1 (munc18 interacting protein) is a presynaptic protein of exocytosis and is also related to mechanisms of protein phosphorilation, therefore, Mint1 can be considered as a protein involved in the plasticity of the central nervous system. Mint1 plays an important role in postsynapse, transporting the NR2B subunit of the NMDA receptor to the dendrite membrane. The aim of this work was to study the expression of the Mint1 in the hippocampus of rats submitted to the pilocarpine model of epilepsy. Methods: The changes in the concentration of Mint1 in the hippocampus of rats was measured by SDS polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and Western Blotting. The expression and distribution of Mint1 was visualized by immunohistochemistry. Results: The results of the Western Blotting and analysis of hippocampal samples were similar to the results found in the immunohistochemistry experiments. Animals of the group 1HSE showed no changes in the content of the Mint1 protein when compared to the saline-treated group, but a decrease in Mint1 was found in the 5HSE group. On the other hand, the silent and chronic groups showed an important increasing in the amount of Mint1, when compared to the saline-treated group. Conclusions: Animals of the silent and chronic groups showed an intense immunostaining of Mint1 in the hippocampus. Mint1 is associated to excitatory synapses envolving the NMDA receptor. The present work shows that Mint1 could be related to brain plasticity in the epileptic phenomenon, indicating that this protein could be used as a marker of excitotoxicity and could be associated to the plastic events occurring in several pathological conditions.