Caracterização genotípica e fenotípica do clone de HIV-1 recombinante intersubtipo D/B com reversão com reversão fenotípica espontânea em cultura de células primárias
Nenhuma Miniatura disponível
Data
2001
Autores
Munerato, Patricia [UNIFESP]
Orientadores
Diaz, Ricardo Sobhie [UNIFESP]
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
O comportamento replicativo de um genoma mosaico de HIV-1 foi analisado. A gp120 de um clone infeccioso subtipo D (Z6) foi substituida pela gp120 de um isolado subtipo B (BR48). O novo virus, Z6Bgp, nao consegue sustentar infeccao produtiva, embora a entrada e integracao viral tenha sido preservada. O seguimento da cultura de PBMC infectada com Z6Bgp revelou, apos 9 semanas, a emergencia de um virus revertente detectado atraves do pico de producao do antigeno viral p24. Na tentativa de associar diretamente o fenotipo revertente com a ocorrencia de substituicoes de aminoacidos, a caracterizacao genotipica foi realizada. As regioes genicas de gag, pol e env, os genes nef e tat e a LTR foram sequenciadas. A analise do sequenciamento revelou duas substituicoes nao sinonimas em duas regioes conservadas da gp120 (C1 e C4) e duas substituicoes sinonimas no gene nef e LTR. O virus revertente de 68 dias em cultura tambem foi caracterizado fenotipicamente quanto a sua capacidade replicativa em linhagem de celulas estabelecidas (PM1) e revelou um indice replicativo superior nestas celulas em relacao aos PBMCs. Sugere-se que as substituicoes de aminoacidos nas regioes C1 e C4 do envelope do virus revertente podem ter restaurado as interacoes entre gp120/gp41 na estrutura recombinante D/B, compensando a defiCiência funcional do virus Z6Bgp. A mutacao na regiao C4, que se manteve ao longo do tempo, parece facitar a interacao entre a gp120 e o co-receptor CCR5, o qual e expresso em maior quantidade na linhagem de celulas PM1 em relacao aos PBMCs. Alem disso, as mutacoes na LTR e no gene nef, por estarem localizados em regioes de importancia regulatoria e funcional dentro do genoma viral, estariam auxiliando essa vantagem replicativa do virus revertente
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 2001. 97 +12 artigo p. ilustab.