Enzima conversora de angiotensina I em urina de criancas prematuras e nascidas a termo

Abstract

A enzima conversora de angiotensina I (ECA) foi descrita em urina de individuos normotensos e pacientes com hipertensao essencial. Os normotensos apresentaram duas isoformas da ECA, uma de alta massa e outra de baixa massa molecular (170 kDa e 65 kDa), enquanto que os pacientes hipertensos apresentaram apenas ECAs de baixa massa molecular (90 kDa e 65 kDa, ambos demonstraram ser N-dominio). E conhecido que a ECA e regulada durante o desenvolvimento renal e que os tubulos renais de criancas nascidas prematuramente nao estao completamente desenvolvidos (a nefrogenese se completa na 362 semana da gestacao humana). 0 objetivo deste estudo foi purificar e caracterizar as isoformas da ECA a partir de urina de criancas prematuras e nascidas a termo e detectar a presenca da forma N-dominio durante a fase prenatal. A urina de prematuros e nascidos a termo foi coletada e concentrada, em separado, em um concentrador Amicon, dialisada no mesmo equipamento contra tampao Tris/HCI 0,05 M, pH 8,0, contendo NaCI 0,15 M e submetida a uma gel filtracao em coluna AcA-34 equilibrada com o mesmo tampao descrito acima. Dois picos de atividade (P1 e P2 para as ECAs de prematuros, TP1 e TP2 para as de termos) sobre o substrato sintetico Hipuril-HisLeu (HHL) foram detectados (Km= 3 mM). Todas as enzimas sao cloreto dependentes e foram inibidas por captopril e EDTA. Os peptideos Angiotensina'-' e N-Acetyl-Ser-Asp-Lis-Pro, descritos como especificos para a ECA N-dominio, foram hidrolisados por P2 e TP2, sugerindo que ambas sejam a forma N-dominio da enzima. Nos prematuros, a atividade de P1 sobre o HHL foi cerca de 12 vezes menor que a de P2, enquanto que nos termos a diferenca entre TP1 e TP2 foi de 1,6. Os perfis cromatograficos da urina de criancas prematuras tambem foi_(au)