Identificacao de proteinas que se ligam especificamente a simples-fita de DNA-telomerico do Trypanosoma cruzi
Data
2000
Autores
Godoy, Patricia Diogo de Melo 
Tipo
Dissertação de mestrado
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Resumo
Proteinas que ligam telomero estao envolvidas em varios processos, tais como: interacao com telomerase, estabilizacao dos cromossomos mediada pelos telomeros, e controle da expressao genica. Nesta tese, investigamos a presenca destas proteinas nos extratos nucleares de Trypanosoma cruzi. Um oligonucleotideo da sequencia telomerica do T. cruzi foi usado para detectar proteinas que ligam telomero neste parasita. Verificamos a formacao de complexos especificos com os extratos de epimastigotas, tripomastigotas, tripomastigotas intracelulares e amastigotas. Os complexos encontrados sao resistentes ate 800 mM de NaCl, e podem ser detectados em varias cepas deste parasita. A atividade de ligacao a sequencia telomerica pode ser retida em uma coluna de afinidade contendo a simples-fita telomerica, sendo eluida a 500 mM de NaCl. Ela nao fica retida em uma coluna contendo a sequencia do telomero (dupla-fita). O complexo de ligacao que apresenta maior mobilidade nos ensaios de EMSA foi purificado em uma cromatografia de gel filtracao, apresentando 5OKDa. Experimentos de UV-crosslinking do complexo formado e identificado no gel de retardo, tambem revelou uma proteina de 5OKDa. Apesar de detectar uma atividade similar em celulas L6 (mioblasto de rato), a atividade observada e proveniente do parasita, ja que epimastigotas, as formas que crescem na ausencia de celulas, tambem possuem esta atividade. Os complexos encontrados tambem podem ligar uma sequencia de RNA, correspondente a sequencia telomerica. A caracterizacao destas proteinas podem contribuir para o melhor entendimento da fisiologia do telomero no T. cruzi
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 2000. 57 p. ilus.