Apoptose na involucao do reticulo estrelado de germes dentarios de molares de rato

Abstract

A sintese de esmalte inicia-se na regiao correspondente ao apice da futura cuspide do dente em formacao, e prossegue pelas vertentes do mesmo, em direcao a alca cervical. Assim que ocorrer a deposicao da primeira camada de esmalte, o reticulo estrelado (RE) adjacente inicia um processo de involucao, o qual, envolve uma serie de eventos, tais como: diminuicao dos espacos intercelulares, invasao vascular, reducao do numero de celulas e aparecimento de celulas do tipo macrofago. Sabe-se que, o desaparecimento de varias celulas embrionarias durante o desenvolvimento de tecidos e orgaos, ocorre via apoptose, e que, macrofagos sao fagocitos relacionados com a remocao de corpos apoptoticos. Assim sendo, decidimos examinar regioes do RE em involucao, com a finalidade de verificar se apoptose esta envolvida com este processo. Para isso, utilizamos germes dentarios de primeiros molares de ratos Wistar com I, 3, e 5 dias de idade, os quais, foram fixados em formaldeido para o metodo TUNEL; forrnol-calcio-sacarose, para deteccao de fosfatase acida (metodo da pararosanilina hexazotizada); e em glutaraldeido-formaldeido para microscopia de luz e microscopia eletronica. Atraves da microscopia de luz, observamos a presenca de corpos basofilicos, tanto disperses pela matriz intercelular,, como, aparentemente, no interior de celulas macrofagos-like do RE. A presenca de estruturas TUNEL positivas, coradas em marrom,, confirma os dados observados atraves da microscopia de luz indicando fragmentacao nuclear (corpos apoptoticos). Atraves da tecnica da pararosanilina hexazotizada,, celulas arredondadas apresentaram granulacoes intensamente positivas para fosfatase acida, indicando atividade lisosomica. Nos cortes ultrafinos, foram observadas imagens de celulas do RE com nucleo contendo uma massa de cromatina periferica, eletron-opaca e com forma de meia-lua (tipica de apoptose). Tambem observamos a presenca de corpos apoptoticos, de tamanho e forma variados, no citoplasma de celulas do reticulo, o que indica que estariam sendo englobados por estas celulas residentes. Celulas do tipo macrofago do reticulo estrelado apresentam no citoplasma vacuolos contendo material de eletron-opacidade variavel o que sugere tanto remocao da matriz intercelular do reticulo, como tambem a internalizacao e diGestão de corpos apoptoticos. Estas imagens nos levam a crer que, o fenomeno de morte celular programada (apoptose) ocorre nas celulas do RE e esta relacionada com a involucao ...(au)