Análise da expressão do gene LAMC-2 no adenocarcinoma colorretal com e sem metástase linfonodal pela técnica de microarray tridimensional de oligonucleotídios

Abstract

Bases da pesquisa: O prognóstico dos pacientes portadores de adenocarcinoma colorretal é feito com base em fatores histopatológicos clássicos e poucos estudos sobre o papel das alterações genômicas têm sido realizados nesse sentido. O emprego desses parâmetros associados, pela caracterização do conjunto de genes envolvidos com a agressividade dessa neoplasia pode representar uma contribuição importante. A possibilidade de avaliar concomitantemente milhares de genes através da técnica de microarray de oligonucleotídios serviu de estímulo para o desenvolvimento do presente estudo. Nosso objetivo foi verificar a correlação entre a expressão tumoral do gene LAMC-2 e a presença de metástases linfonodais em pacientes portadores de adenocarcinoma colorretal, utilizando-se técnica de avaliação tridimensional de oligonucleotídios. Métodos: O RNA isolado a partir do tumor de 36 pacientes incluídos no Projeto Genoma Clínico do Câncer da FAPESP e do Instituto Ludwig, atendidos no Hospital São Paulo, da UNIFESP-EPM, portadores de adenocarcinoma colorretal, foi obtido dos espécimes cirúrgicos e hibridizado em plataforma de microarray, contendo 20.000 probes de sequências humanas (CodeLink™ – GE). A seguir, empregou-se técnica de análise imuno-histoquímica do tecido tumoral fixado em formalina e conservado em blocos de parafina, sob forma de tissue microarray (TMA), utilizando anticorpo monoclonal contra a cadeia gama-2 da laminina-5. Resultados: Em média, 2389 probes foram detectados acima do background, com correlação média de 0,19 entre os dados das diferentes amostras analisadas (invasão linfonodal ou não, cólon ou reto, invasão ângio-linfática ou não, recidiva ou não e mortalidade). Dentre os genes hiperexpressos, selecionamos o LAMC-2, envolvido com a matriz extracelular, 7,7 vezes mais expresso nos doentes com metástase linfonodal (p=0,001). O exame de imuno-histoquímica não demonstrou diferença significante entre doentes com e sem metástase linfonodal (p=0,177). CONCLUSÃO: Este estudo demonstra que a hiperexpressão do gene LAMC-2 está associada à invasão linfonodal em doentes com adenocarcinoma colorretal..