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    Análise histomorfológica e caracterização dos glicosaminoglicanos do útero de ratas tratadas com estrogênio, progestagênio e raloxifeno
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2001) Simões, Manuel de Jesus [UNIFESP]
    Procurou-se avaliar, neste estudo, sob o ponto de vista histomorfomologico e bioquimico, os efeitos do tratamento com estrogenios conjugados equinos (CEE), isolados ou associados ao acetato de medroxiprogesterona (AMP), e do raloxifeno (RAL) sobre o endometrio de ratas adultas ooforectomizadas. Estudaram-se ratas adultas que, 60 dias apos serem castradas, foram distribuidas aleatoriamente, em cinco grupos: Grupo I - castrado; Grupo II tratadas com CEE (50 gg/kg, por dia); Grupo III - tratadas com AMP (0,2 mg/kg, por dia); Grupo IV - tratadas com CEE (50 gg/kg, por dia) + AMP (0,2 mg/kg, por dia); Grupo V - tratadas com RAL (3 mg/kg, por dia). A administracao dos farmacos foi feita por gavagem, sempre no periodo da manha, durante 28 dias consecutivos. Apos esse periodo os animais foram sacrificados e retiraram-se os uteros, os quais foram mergulhados em formol a 10 por cento. Em seguida, seccionaram-se os corpos uterinos, sendo a porcao media processada para estudo histologico e determinacao do indice de proliferacao nuclear (PCNA) dos epitelios superficial e glandular, em microscopia de luz; o restante do material foi processado para deteccao e determinacao bioquimica dos glicosaminoglicanos. Os resultados mostraram que os EEC isolados apresentaram efeito trofico sobre o endometrio e aumento significante do PCNA; a associacao de AMP inibiu, em parte, estes efeitos proliferativos. Ja nos grupos tratados com AMP ou RAL notamos atrofia endometrial e baixos indices de PCNA. Entretanto, no grupo que recebeu RAL identificamos a presenca de eosinofilos no estroma endometrial, o que sugere haver ligeira acao estrogenica. Os glicosaminoglicanos sulfatados (em especial o dermatam sulfato) apresentaram-se em niveis mais elevados nos animais tratados com EEC isolados ou associados ao AMP. Os indices de heparam sulfato mostraram-se baixos nos uteros dos animais tratados com AMP isoladamente ou associado aos EEC. A dosagem de acido hialuronico nao apresentou alteracoes entre os varios grupos de estudo. O raloxifeno nao alterou os niveis de glicosaminoglicanos no utero de ratas
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    Efeito Do Diabetes E De Ácidos Graxos Poliinsaturados Ômega 3 Sobre A Qualidade Do Útero Em Camundongos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2018-04-26) Pontes, Lidia Passinho Paz [UNIFESP]; Silveira, Vera Lucia Flor [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Introduction: It Is Estimated That About 425 Million People Worldwide Have Diabetes Mellitus (Dm). Metabolic Changes Can Affect Reproductive Functions And Fertility, In Which Obesity-Related Disorders Such As Insulin Resistance, Dyslipidemia, And Inflammation Have Been Implicated In Some Conditions Related To Infertility. Polyunsaturated Fatty Acids ("-3 Agp) Appear To Have Beneficial Effects On The Development Or Control Of Diabetes, However It Is Not Known Whether These Pufas Could Alter The Quality Of The Uterus In Diabetic Females. Further Studies Are Needed To Establish The Effect Of Dm On Uterus Quality And Additionally, To Study The Relationship Between "-3 Agp, Reproduction And Dm. Objective: To Evaluate The Effect Of Diabetes And Dietary Supplementation With Fish Oil, Rich In "-3 Agp, On The Quality Of The Uterus In Female C57bl / 6j Mice. Material And Methods: Fourty Eight-Week Old Female C57bl / 6j Mice Were Divided Into Four Experimental Groups: Control (C), Control Fish (Cp), Diabetic (D) And Dia
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    Efeito inibitório do clorobutanol no útero e ducto deferente de rato
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1992) Wanderley, Almir Gonçalves [UNIFESP]; Jurkiewicz, Aron [UNIFESP]
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    Efeitos do 17 beta-estradiol e das isoflavonas da soja no útero de ratas diabéticas e ovariectomizadas
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2020-12-16) Fonseca, Caio Cesar Navarrete Da [UNIFESP]; Simoes, Manuel De Jesus [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo
    Introduction: Hormonal therapy (HT) with estrogen has benefits to climacteric symptoms in women, but it also brings a risk increase to breast and endometrium cancer. Soy isoflavones are phytoestrogens with weaker influence, whereas its administration could be solo or combined by those substances. A diabetic (Di) and ovariectomized (Ovx) animal model is proposed to a better understanding of its impacts in the uterus morphology. Objectives: Evaluate the isolated or combined effects of 17 beta-estradiol (E2) or soy isoflavones (Iso) in the uterus of ovariectomized and diabetic rats. Methods: 50 Wistar rats were separated into 10 groups: (I) sham-operated; (II) ovariectomized; (III) Ovx+E2 (10 µg/Kg/day); (IV) Ovx+Iso (200 mg/kg/day); (V) Ovx+E2+Iso; (VI) Sham+Di; (VII) Ovx+Di; (VIII) Ovx+E2+Di; (IX) Ovx+Iso+Di; and (X) Ovx+E2+Iso+Di. Uterine horns were collected after 50 days of treatment to histomorphometry analysis, and blood proceeded through biochemistry. Results: Uterine horns of Ovx rats had no trophic effect to the isoflavones replacement. The uterus and its lumen were increased in animals with E2 replacement, solo or combined with soy isoflavones. Triglycerides and HDL levels improved in animals treated with soy isoflavones. Diabetes had an impact in uterine morphology by discretely reducing it. Replacement with E2 stimulated the collagen fibers organization into uterine endometrium. Conclusions: Animals without diabetes were evaluated and soy isoflavones improved the lipid profile with no uterotrophic impact, and prevented the increased weight loss from diabetic animals. The combination of HT with 17 betaestradiol and soy isoflavones had similar results with the HT replacement with estradiol, and through those points it is not an alternative to the traditional therapy.
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    Efeitos do 17 beta-estradiol no útero de ratas diabéticas e ovariectomizadas
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2015-09-30) Fonseca, Caio Cesar Navarrete da [UNIFESP]; Simoes, Manuel de Jesus [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/5987164343458678; http://lattes.cnpq.br/0700854260218056; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Introdução: A terapia estrogênica exerce efeitos benéficos contra os sintomas do climatério em mulheres na menopausa e em ratas ovariectomizadas (OVX). Por outro lado, estudos indicam que esses efeitos são diminuídos em modelos animais diabéticos submetidos ao tratamento com estrógeno, e assim, sugere-se uma possível influência do diabetes sobre os efeitos protetores da terapia estrogênica. Sabe-se que o estrógeno possui efeitos uterotróficos tanto em ratas OVX quanto em mulheres submetidas à reposição hormonal, no entanto, não se sabe se esses efeitos no útero são influenciados pelo diabetes. Objetivo: Avaliar os efeitos do estrógeno no útero de ratas diabéticas e ovariectomizadas. Métodos: 50 ratas adultas, com 3 meses de idade, normais ou diabéticas (Di) induzidas por estreptozotocina serão OVX (10 delas não serão OVX, apenas terão seus ovários expostos). Após 21 dias, o ciclo estral das ratas será avaliado por colpocitologia vaginal durante 4 dias consecutivos para confirmação do quadro de anestro-permanente. Posteriormente as ratas serão divididas em 5 grupos: GI (OVX-controle); GII (OVX-tratado com 10µg/Kg/dia de estrógeno); GIII (OVX-Di); GIV (OVX-Di e tratado com 10µg/Kg/dia de estrógeno); GV (SHAM-Di). As ratas serão pesadas semanalmente. Após 60 dias consecutivos de tratamento, os animais serão eutanasiados, os cornos uterinos serão coletados, pesados, fixados em formaldeído a 10% e incluídos em parafina. Cortes com 4 µm de espessura serão corados pela hematoxilina e eosina para análise histomorfométrica ou submetidos aos métodos histoquímicos de Picrosirius Red para avaliação das fibras colágenas, ao Alcian Blue (pH 0,5 e 2,5) para evidenciação e quantificação dos glicosaminoglicanos, e das análises por tricômico de Masson evidenciando colágenos. Os dados quantitativos serão submetidos à análise estatística (p<0,05).
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    Effects of soy isoflavones on the uterus and urethra of ovariectomized rats
    (Springer, 2010-01-01) Santos, Elaine Travaglia [UNIFESP]; Dutra Sampaio, Maria Dione [UNIFESP]; Cecon, Paulo Roberto; Simoes, Manuel de Jesus [UNIFESP]; Ferreira Sartori, Marair Gracio [UNIFESP]; Batista Castello Girao, Manoel Joao [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); Universidade Federal de Viçosa (UFV)
    To evaluate the effect of soy isoflavone extract (SIE) on the uterus and urethra of castrated female rats.Ovariectomized adult virgin Wistar rats (n = 45) received, for 30 days: placebo (GI); SIE from day 5 of castration (GII); or day 28 of castration (GIII). A standardized SIE was administered by gavage at 125 mu g genistein/g body weight/day, with a soy-free diet. Average numbers of nuclei (NU), blood vessels (BV) and collagen fibers (CF) in uterus and mid-urethra sections were compared using Dunnett and Tukey tests (95% CI).Uterus: GII and GIII differed from GI in all respects; GII vs. GIII, no differences. Urethra: GIII vs. GI: no differences; GII vs. GI, differences in NU and CF; GII vs. GIII, differences in NU and CF.Early oral administration of SIE to ovariectomized rats reversed uterine/urethral effects of castration.
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    Exposição intrauterina e lactacional a doses suprafisiológicas de manganês: estudo de toxicidade reprodutiva na prole feminina de ratas
    (Universidade Federal de São Paulo, 2023-10-26) Correia, Maria Helena [UNIFESP]; Le Sueur-Maluf, Luciana [UNIFESP]; Perobelli, Juliana Elaine [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/2047233951021632; http://lattes.cnpq.br/5847809852115461; http://lattes.cnpq.br/9614532014271133; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    O manganês (Mn) é um elemento presente naturalmente no ambiente, podendo ser encontrado no ar, água, solo e alimentos. Exposição a concentrações elevadas de Mn pode ocorrer por meio de fungicidas agrícolas, emissões atmosféricas industriais, sistemas de drenagem e vazamentos, resultando em problemas pulmonares, renais e neurológicos. Estudos sobre os efeitos de altas doses de Mn na saúde reprodutiva de animais, especialmente durante a gestação e lactação maternas, são escassos. Assim, este estudo avaliou o efeito da exposição intrauterina e lactacional a altas doses de Mn sobre os parâmetros reprodutivos da prole feminina de ratas. Ratas Wistar prenhes foram distribuídas aleatoriamente em 3 grupos (n=10/grupo): grupo Mn 9mg (exposto a 9 mg de MnCl2/Kg/dia por gavage) do dia gestacional 13 (DG 13) ao dia lactacional 15 (DL 15); grupo Mn 90 mg (exposto a 90 mg de MnCl2/Kg/dia no mesmo período e mesma via); e grupo controle (CTRL, que recebeu apenas água destilada no mesmo período e mesma via). A prole feminina foi avaliada, quanto à morfologia ovariana, uterina, instalação da puberdade, ciclo estral e presença de mal formações em três estágios da vida pós-natal (n=10/grupo/idade): período prépúbere (dia pós-natal 21 - DPN 21); período puberal (DPN 25 a 35) e na fase adulta (DPN 60). A análise comparativa entre os grupos foi realizada usando o Modelo Linear Generalizado (GzLM). No DPN 21, não houve diferença significativa entre os grupos quanto ao número de folículos primordiais, primários e pré-antrais. No útero, foi observado aumento da altura do epitélio luminal e da espessura do endométrio no grupo Mn 9 mg e diminuição da espessura do miométrio no grupo Mn 90 mg. No DPN 25-35 não houve diferença significativa entre os grupos na idade de instalação da puberdade, mas aumento no número de folículos primordiais no grupo Mn 9 mg, folículos préantrais no grupo Mn 90 mg, e aumento de folículos atrésicos e corpos lúteos em ambos os grupos. No útero houve diminuição da espessura do miométrio no grupo Mn 9 mg, com aumento na altura do epitélio e redução da quantidade de glândulas no grupo Mn 90 mg. No DPN 60, no útero, redução da espessura do endométrio e quantidade de glandulas, além de diminuição na altura do epitélio luminal. No grupo Mn 90 mg, houve aumento na espessura do endométrio, na quantidade de glândulas e na espessura do miométrio. O ciclo estral nesse grupo apresentou aumento na frequência de estros e redução de diestros, resultando em mais ciclos e de menor duração. Em conclusão, nossos achados sugerem que a exposição materna a altos níveis de Mn durante a gestação e lactação prejudica o processo de seleção e resposta folicular da prole, que pode ser observado desde a puberdade até a idade adulta, com impacto sobre a fisiologia uterina e a regularidade do ciclo estral, sem afetar o momento do início da puberdade.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Expressão gênica da prolactina, do receptor de prolactina e das hialuronam síntases e a imunoistoquímica do ácido hialurônico e do receptor CD44 em úteros de camundongos fêmeas com hiperprolactinemia induzida pela metoclopramida, durante as fases do ciclo estral
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011-04-27) Gomes, Regina Célia Teixeira [UNIFESP]; Simões, Manuel de Jesus [UNIFESP]; Soares Júnior, José Maria [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    OBJECTIVE: To evaluate the gene expression of prolactin, prolactin receptor and hialuronan sintase and immunohistochemistry of hyaluronic acid and CD44 in the uterus of female mice with metoclopramide-induced hyperprolactinemia throughout the estrous cycle. METHODS: 80 adult (100 days old) female virgin mice were randomly divided into two groups of 40 animals each: control (Ctr), which received intraperitoeneal (IP) 0.2 ml of saline solution, and so labeled hyperprolactinemic (HPrl), which received IP 6,7 ìg/day metoclopramide. After 50 days the animals were properly randomly divided into 8 groups of 10 animals, according to the phase of the cycle: proestrus (Ctr and HPrl), estrus (Ctr and HPrl), metaestrus (Ctr and HPrl) and diestrus (Ctr and HPrl). Under deep anesthesia, a part of the middle portions of the uterine horns were removed for detection of genes by PCR Real Time methods. Another part was fixed in 10% formol for immunohistochemical evaluation of HA, HAS1, 2 e 3 distribution and CD44. The results were submitted statistical analysis. RESULTS: Comparing the experimental group with the control group results were compared immunohistochemistry: hyaluronic acid (HA), the hyaluronic acid receptor (CD44) and hyaluronic synthases (HAS): hyaluronic acid’s immunopositivity in the extracellular matrix was higher in the estrus phase and decreased in metaestrus phase and increased the number of cells immunopositive for CD44 receptor during proestrus phase, metaestrus phase and diestrus phase. Also, increased the number of cells immunopositive for hyaluronic synthases HAS1 and HAS2 in proestrus phase, estrus phase and metaestrus phase. And decreased Has3 in proestrus phase and increased during estrus and metaestrus phase. The decreased gene expression of prolactin in proestrus phase and increased in diestrus phase. And the gene expression of prolactin receptor decreased during the proestrus and metaestrus phase and increased during estrus phase. Gene expression of the hyaluronic synthesis Has1 showed increased in proestrus phase and estrus phase. The gene expression of the Has2 has3 was low. Conclusion: Our data suggest that metoclopramide-induced hyperprolactinemia promotes structural and molecular changes in the uterus of female mice.
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    Glycosaminoglycan profiles in the uterus of adult ovariectomized rats treated with estrogen and progestagen
    (Elsevier B.V., 2012-12-01) Simoes, Ricardo Santos; Oliveira-Filho, Ricardo Martins; Nader, Helena Bonciani [UNIFESP]; Baracat, Edmund Chada; Universidade de São Paulo (USP); Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Objectives: To evaluate the effects of conjugated equine estrogens (CE) alone or in combination with medroxyprogesterone acetate (MPA) on glycosaminoglycans (GAGs) in the cervix and horns of the rat uterus.Study design: Thirty days after ovariectomy, adult rats were randomly divided into four groups: Cl, control (treated with drug vehicle); GII CE (50 mu g/kg per day); GIII, MPA (0.2 mg/kg per day), and GIV, CE + MPA (doses as in GII and Gill). Drugs and vehicle were given by gavage during 28 days. Afterwards the animals were anesthetized, the cervix and uterine horns were dissected out and the middle portion fixed in 10% formaldehyde solution; other portions were fixed in acetone for histological examination and glycosaminoglycan quantification, respectively. Agarose gel electrophoresis was used for sulfated GAG analyses, and hyaluronic acid was assayed with an ELISA-like method. Statistical analysis was done by the Student's t test and the Tukey-Kramer test (P < 0.05).Results: the cervix and uterine horn structures presented signs of atrophy in the control group (GI). the other groups, mainly groups III and IV, had histological aspects of proliferation. in all groups the concentration of sulfated GAGs (especially dermatan sulfate) was higher than that of non-sulfated GAGs, both in cervix and in uterine horns. Estrogens increased sulfated GAG concentration at the cervix and the horn, whereas in uterine horns the amounts of sulfated GAGs were decreased after estrogens plus MPA treatment. the concentration of hyaluronic acid in uterine horns was higher than in cervices.Conclusions: the profiling and amounts of glycosaminoglycans in the two portions of the rat uterus are uneven. Dermatan sulfate occurs in higher concentrations in both cervix and uterine horns. Sulfated GAGs in rat cervix were increased by estrogens plus MPA, but were decreased by MPA alone in uterine horns. (C) 2012 Elsevier Ireland Ltd. All rights reserved.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Indirect evaluation of estrogenic activity post heterotopic ovarian autograft in rats
    (Sociedade Brasileira para o Desenvolvimento da Pesquisa em Cirurgia, 2008-08-01) Damous, Luciana Lamarão [UNIFESP]; Silva, Sônia Maria da [UNIFESP]; Simões, Ricardo dos Santos [UNIFESP]; Sakano, Célia Regina de Souza Bezerra [UNIFESP]; Simões, Manuel de Jesus [UNIFESP]; Montero, Edna Frasson de Souza [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); São Paulo University Gynecological Division
    PURPOSE: To morphologically evaluate the estrogenic effect on the uterus and vagina of rats submitted to ovarian autografts. METHODS: Twenty Wistar EPM-1 adult rats were bilaterally ovariectomized, followed by ovarian transplants in retroperitoneal regions. The animals were divided in four groups of five animals, according to the day of euthanasia: G4, G7, G14 and G21, corresponding to the 4th, 7th, 14th and 21st day after surgery, respectively. Vaginal smears were collected from the first day of surgery until euthanasia day. After that, the vagina and uterus were removed, fixed in 10% formaldehyde and submitted to histological analysis and stained with hematoxiline and eosine. RESULTS: All animals showed estrous cycle changes during the experiment. In 4th day, the uterus showed low action of estrogen with small number of mitosis and eosinophils as well as poor development. On the 7th day, the endometrium was atrophic without mitotic signals and presented a small number of eosinophils. On the 14th and 21th days the histological findings were similar, with the presence of mitosis in the endometrial glands and intense leucocyte infiltration with a large number of eosinophils. Morphometric results showed that the endometrial and myometrial thickness as well as the number of eosinophils presented the highest values during the 14th and 21th days of the evaluation. The 7th day group also presented the lowest eosinophil numbers. Vaginal epithelium features were: 4th and 7th day groups presented non-keratinized stratified epithelium with 5 and 2 cell layers, respectively. The 14th and 21st day groups presented non-keratinized stratified epithelium with 14 and 15 cell layers. CONCLUSION: Experimental ovarian autografts in the evaluated organs presented maximum estrogen activity after the 21st day of surgery, according to morphological and morphometric data.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Perfil de glicosaminoglicanos sulfatados no útero de camundongas durante o ciclo estral
    (Associação Médica Brasileira, 2007-06-01) Gomes, Regina Célia Teixeira [UNIFESP]; Simões, Ricardo Santos [UNIFESP]; Soares Júnior, José Maria [UNIFESP]; Nader, Helena Bonciani [UNIFESP]; Simões, Manuel de Jesus [UNIFESP]; Baracat, Edmund Chada [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    OBJECTIVE: Identification and quantitation of sulphated glycosaminoglycans (GAGs) in the uterus of female mice during the estrous cycle. METHODS: Four groups (n = 10 each) of virgin, 100-day old female mice were assembled according to the estrous cycle phase: proestrus, estrus, metaestrus and diestrus. Samples of the median portion of uterine horns were processed for light microscopy examination (H/E and Alcian blue + PAS). The GAGs were extracted and characterized by agarose gel electrophoresis. Data were analyzed by the unpaired Student's t-test. RESULTS: At light microscopy GAGs appear in all layers of the uterus, especially in the endometrium, between collagen fibers, in the basal membrane and around fibroblasts. Biochemical analyses disclosed presence of dermatan sulphate (DS), chondroitin sulphate (CS and heparan sulphate (HS) during all estral cycle phases. There was no clear electrophoretic separation between DS and CS, thus these two GAGs were considered together (DS+CS) (proestrus = 0.854 ± 0.192; estrus = 1.073 ± 0.254; metaestrus = 1.003 ± 0.255; diestrus = 0.632 ± 0.443 µg/mg). HS was as follows: proestrus = 0.092 ± 0.097; estrus = 0.180 ± 0.141; metaestrus = 0.091 ± 0.046; diestrus = 0.233 ± 0.147 µg/mg. The uterine content of DS+CS peaked at estrus (estrogenic action) and that of HS at diestrus (progestagen action). CONCLUSION: Due to a constant turnover process, there are definite alterations in the uterine profile of GAGs content during the estrous cycle in mice, which may be modulated by female sex hormones.