Navegando por Palavras-chave "Tripsina"
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- ItemAcesso aberto (Open Access)Avaliação morfológica de diferentes técnicas de desepitelização da membrana amniótica humana(Conselho Brasileiro de Oftalmologia, 2007-06-01) Melo, Gustavo Barreto de [UNIFESP]; Gomes, José Álvaro Pereira [UNIFESP]; Glória, Maria Aparecida da [UNIFESP]; Martins, Maria Cristina [UNIFESP]; Freymüller-Haapalainen, Edna [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)PURPOSE: To evaluate the morphological features of the amniotic membrane denuded by different techniques. METHODS: Human amniotic membrane was collected at the time of delivery, fixed in increasing concentrations of glycerol (0-50% in DMEM) and preserved at -80ºC until the time of use. The study consisted of 4 groups: intact epithelium (control) and denuded by trypsin (2 mg/mL at 1:250), dispase (1.2 U/mL in Mg2+ and Ca2+ free Hank's balanced salt solution) or ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), 0.02%. Specimens were submitted to electron (scanning and transmission) microscopy analysis. RESULTS: Scanning electron microscopy disclosed intact epithelium in the control group and its absence in the amniotic membranes denuded by trypsin and dispase. In those denuded by ethylenediaminetetraacetic acid there were areas with and without epithelium. When assessed by transmission electron microscopy, the epithelium was intact and firmly adhered to the basement membrane by hemidesmossomes in controls and in parts of ethylenediaminetetraacetic acid group. There were only collagen fibers in the dispase- and trypsin-treated groups. CONCLUSIONS: Trypsin and dispase treatment of the amniotic membrane may cause complete denuding of the epithelium and basement membrane whereas ethylenediaminetetraacetic acid may leave some intact epithelium-areas and partially destroy the basement membrane in others.
- ItemSomente MetadadadosEstudo cinético da hidrólise de peptídeos sintéticos por tripsina e quimiotripsina(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1981) Hamaguchi, Amelia [UNIFESP]; Sampaio, Misako Uemura [UNIFESP]
- ItemSomente MetadadadosEstudo cinéticos de hidrólise de substratos sintéticos por tripsina e calicreína urinária equina(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1976) Sampaio, Misako Uemura [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo [UNIFESP]
- ItemSomente MetadadadosEstudo comparativo da especificidade entre tonina, calicreínas e tripsina com substratos peptídicos cromogênicos(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1992) Juliano, Maria Aparecida [UNIFESP]; Juliano Neto, Luiz [UNIFESP]
- ItemSomente MetadadadosEstudo sobre especificidade de calicreina plasmatica humana(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1979) Grisolia, Daisy [UNIFESP]
- ItemAcesso aberto (Open Access)Estudos moleculares de enzimas do tipo tripsina presentes no intestino médio de larvas de Aedes aegypti(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009-07-29) Soares, Tatiane Sanches [UNIFESP]; Tanaka, Aparecida Sadae [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Aedes aegypti is the most important vector of human arboviral diseases and it is responsible for dengue and urban yellow fever transmissions. Trypsin-like enzymes plays an important role in the Ae. aegypti adult and larval life stages digestion. In the present work, we identified the two major trypsin-like enzymes of Ae. aegypti larval midgut through the trypsin cDNA fragments library construction. They are AAEL005607 and AAEL006371, with expression frequencies of 29.3% and 20%, respectively. Semi quantitative PCR analysis showed that the AAEL005607 was transcripted in all larval instars, but AAEL006371 appeared only in 3rd and 4th larval instars. In order to confirm the transcription data, trypsin-like enzymes from 4th instar larvae of Ae. aegypti midgut were purified by affinity, ionic exchange and reversedphase chromatographies. Purified trypsin presented molecular mass of 28 kDa by SDS-PAGE. Its partial amino acid sequence allowed us to suggest that the trypsin activity is encoding by AAEL005607 sequence. The purified trypsin (AAEL005607) showed Km value of 36.4 μM for Tosyl-Gly-Pro-Arg-pNa substrate and was strongly inhibited by AaTI and HiTI, both trypsin inhibitors, with Ki of 0.94 pM and 160 pM, respectively. In conclusion, for the first time, the major digestive enzyme of 4th larval instar of Ae. aegypti was identified and characterized.
- ItemSomente MetadadadosReceptores ativados por serino proteases em musculo liso de ileo de cobaia(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2002) Tahan, Chandler [UNIFESP]Uma nova familia de receptores acoplados a proteina G chamada PARs, foi descrita recentemente. Seu mecanismo de acao difere dos mecanismos ja bastante conhecidos para a maioria dos receptores metabotropicos propostos e sua ativacao se da por clivagem proteolitica de uma sequencia N-terminal, expondo uma nova sequencia de aminoacidos que agem como um novo agonista, que interage em outro sitio de ligacao na segunda alca extracelular do receptor. Quatro membros desta familia foram clonados: PAR-1, PAR-2, PAR-3 e PAR-4. Entre os agonistas mais conhecidos desta familia de receptores se encontra a tripsina e a trombina, duas serino proteases com importantes funcoes fisiologicas. D objetivo deste trabalho foi investigar a presenca e a funcionalidade dos PARs, na musculatura lisa de ileo de cobaia, com a utilizacao das serino proteases trombina, tripsina e ainda a tonina, uma outra serino protease, que participa de uma via alternativa de producao de angiotensina II (AII); utilizando tambem os peptideos sinteticos PARI AP, PAR-2AP, PAR-3AP, PAR-4AP cujas sequencias de aminoacidos: sao SFLRRN-NH2, SLIGKV-NH2, GYPGQVVH2 e TFRGAP-NH2, respectivamente. 4 tripsina na musculatura lisa integra de ileo de cobaia isolado apresentou uma resposta fasica e transiente seguida por um componente sonico semelhante ao promovido pelo KCI. Estimulacoes sucessivas com a concentracao maxima de tripsina nao promoveu taquifilaxia. A partir da curva concentracao-resposta se obteve o EC50 de 6x10-9 M, que corresponde ao pD2 de 8.2, a contracao maxima foi 100 por cento, relativa ao KCI. A contracao promovida ...(au)
- ItemSomente MetadadadosRemoção da tripsina e internalização de seu complexo com a alfa2 macroglobulina pelo fígado perfundido de rato(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1995) Nagaoka, Márcia Regina [UNIFESP]; Borges, Durval Rosa [UNIFESP]
- ItemSomente MetadadadosTripsina de Apis mellifera L. (Hymenoptera)(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2003) Takahashi, Masayoshi [UNIFESP]A distribuicao de enzimas ao longo do tubo digestivo de abelhas meliferas, Apis mellifera L. (HYMENOPTERA), indica fortemente a existencia de uma membrana peritrofica e um fluxo contracorrente de fluido no intestino medio desta abelha. Um metodo eficaz para a purificacao da tripsina desta abelha foi estabelecido. O metodo inclui uma precipitacao com sulfato de amonio, uma cromatografia de fase reversa, uma cromatografia de afinidade em benzamidina e uma filtracao em gel rapida atraves de uma coluna com Sephadex G-25. A recuperacao final foi 8,9 por cento e a atividade especifica 1,08 U /g. A sequencia N-terminal de aminoacidos da tripsina, inedita entre aquelas ja presentes nos bancos de dados, foi denominada tripsina de Apis. Esta enzima foi a primeira tripsina a ser identificada em abelhas meliferas e foi registrada (ID: TRYP_APIMS, numero de acesso: P83348). A sequencia da tripsina de Apis tem alta similaridade com sequencias de varios tipos de tripsina de Drosophila e camaroes Decapodas. A independencia cio ion de calcio, PH otimo de 9,1, pI de 9,3 e peso molecular de 28 kDa foram demonstrados. Um pico de autolise foi observado no pH 9,1. Os Km e kcat para CBZ-Phe-Arg-metilcouramina sao 1,33 M e 991 s-1, respectivamente. A relacao kcat/Km e 745x 106 s-1 correspondendo ao substrato mais sensivel entre os que foram usados. O valor de Ki para benzamidina e de 16,3 uMa(au)