Navegando por Palavras-chave "Staphylococcus epidermidis"
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- ItemAcesso aberto (Open Access)Análise laboratorial das ceratites infecciosas secundárias à cirurgia refrativa(Conselho Brasileiro de Oftalmologia, 2005-06-01) Leal, Fernando [UNIFESP]; Hofling-Lima, Ana Luisa [UNIFESP]; Freitas, Denise de [UNIFESP]; Campos, Mauro Silveira de Queiroz [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)PURPOSE: To describe the laboratory findings in patients with infectious keratitis, who underwent refractive surgery, correlating the surgical procedure and the time of infection manifestation, and the results of culture and smears. METHODS: The previous samples were obtained from patients submitted to radial keratotomy (RK), photorefractive keratectomy (PRK) and laser in situ keratomileusis (LASIK) at the Ophthalmology Department of UNIFESP. The infections were classified as early, when they occurred up to 30 days after the surgery, and late when diagnosed after 30 days. RESULTS: In 93 samples, 39 (42%) came from patients submitted to radial keratotomy, 14 (36%) being early infections and 25 (64%) late; 38 (41%) of LASIK, 21 (55%) being early and 17 (45%) late; 16 (17%) of photorefractive keratectomy, 10 (62.5%) being early and 6 (37.5%) late. Eighty-six samples were submitted to culture and smears for bacteria, 43 cultures (50%) and 43 smears (50%) were positive. Seventy-two samples were submitted to culture and smears for fungi, 2 cultures (3%) and 4 smears (6%) were positive. CONCLUSION: The agreement between culture and smear results was 80.2%; regarding the type of surgery there was no statistically significant relationship between time of onset of infection and surgery.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Caracterização fenotípica e molecular de Staphylococcus epidermidis isolados de infecções oculares(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2013) Bispo, Paulo José Martins [UNIFESP]; Pignatari, Antonio Carlos Campos [UNIFESP]; Hofling-Lima, Ana Luisa [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/7050225867972978; http://lattes.cnpq.br/9461346610553865; http://lattes.cnpq.br/5904680976177320Staphylococcus epidermidis e um importante agente causador de endoftaltmite bacteriana, especialmente pos-operatoria, e ceratite bacteriana em pacientes que apresentam fatores de risco. O aumento da resistencia aos antimicrobianos, especialmente para as fluoroquinolonas, associado a capacidade de formacao de biofilme dificulta a prevencao e tratamento de infeccoes oculares causadas por S. epidermidis. O controle da expressao de virulencia e de mecanismos adaptativos que protegem S. epidermidis da acao do sistema imunologico e exercido pelo sistema de quorum sensing chamado agr (accessory gene regulator). O agr e um locus polimorfico, com 3 tipos diferentes encontrados em S. epidermidis. Correlacao entre diferente tipos de agr e determinado tipo de infeccao, bem como a associacao com sensibilidade reducida aos glicopeptideos tem sido demonstrada. No presente trabalho, apresentaremos 5 estudos que objetivaram a caracterizacao da emergencia de resistencia antimicrobiana em S. epidermidis isolados de infeccoes oculares e a epidemiologia molecular de isolados produtores de biofilme e resistente aos antimicrobianos. Estudo 1: Esse estudo foi realizado para documentar a emergencia de resistencias as 8-metoxifluoroquinolonas entre isolados de S. epidermidis sensiveis a meticilina (MSSE) isolados de endoftalmites. Entre 2005 e 2010 foram isolados 38 MSSE de endoftalmites, incluindo 15 (39.5%) resistentes as 8-metoxifluoroquinolonas. Os resultados desse estudo sugerem que o uso topico profilatico de gatifloxacina e moxifloxacina foi provavelmente associado com a selecao de MSSE possuindo multiplas mutacoes no QRDR dos genes gyrA e parC que resultaram em resistencia de baixo e alto nivel para essas novas fluoroquinolonas. Estudo 2: Nesse estudo foi investigada a ocorrencia de genes relacionados a formacao de biofilme (atlE, icaAD, aap, bhp e IS256) e a formacao de biofilme utilizando 65 amostras de S. epidermidis isoladas de endoftalmite e determinada a influencia dos tipo de locus agr e da resistencia aos antimicrobianos na distribuicao desses marcadores de virulencia. Houve difereca significativa na ocorrencia dos genes icaAD e sequencia de insercao IS256 de acordo com os tipo de de agr. Alem disso, a frequencia de todos os genes estudados foi maior em isolados resistentes aos antimicrobianos. A formacao de biofilme nessa colecao de isolados foi frequente e resultou de mecanismos dependentes ou independentes do locus ica, de acordo com o tipo de agr. A correlacao entre resistencia aos antimicrobianos, principalmente para ciprofloxacina, e aumento da presence de genes realcionados a formacao de biofilmes pode contribuir para a maior patogenicidade de S. epidermidis isolados de endoftalmite. Esses resultados sugerem que o uso topico de fluoroquinolonas para profilaxia pode representar uma forte pressao seletiva para virulencia em complemento a resistencia antibiotica. Estudo 3: Nesse estudo a distribuicao dos tipos de locus agr e o impacto de grupos especificos na ocorrencia de genes realcionados a formacao de biofilme e resistencia aos antimicrobianos foi determinadas para 85 S. epidermidis isolados de ceratites e endoftalmites. Os resultados desse estudo demonstraram que existe especificidade de grupos agr entre S. epidermidis oculares a que o polimorfismo do locus agr de alguma forma influencia a ocorrencia diferencial de genes relacionados a formacao de biofilme e perfil de resistencia aos antimicrobianos. Estudo 4: Nesse estudo, a epidemiologia molecular de 30 S. epidermidis resistentes a meticilina (MRSE) isolados de ceratite e endoftalmite foi estudada utilizando a tecnica de MLST (multilocus sequence typing). Resistencia aos antimicrobianos, tipagem do locus agr e SCCmec (staphylococcal cassette chromosome mec) e a ocorrencia de genes relacionados a formacao de biofilme foram correlacionados aos complexos clonais obtidos por MLST. Nossos resultados demonstraram o predominio de um cluster de MRSE especifico causando infeccoes oculares (CC2-II), o qual foi associado a altos niveis de resistencia aos antimicrobianos, principalmente para as fluoroquinolonas, e a presenca de genes resposaveis pela formacao de biofilme por via proteica. Estudo 5: Foi investigada a frequencia de Staphylococcus spp. isolados de endoftalmite com fenotipo de resistencia intermediaria heterogenea a vancomicina (hVIS). No total, 22 isolados de 121 isolados (18,2%) com sensibilidade reduzida a vancomicina foram detectados pela traigem em agar com 4 μg/ml de vancomicina. Utilizando o metodo de analise populacional (PAP-AUC), a prevalencia de hVIS foi de 5% (6 de 121), incluindo 5 S. epidermidis (hVISE) e 1 S. aureus sensivel a meticilina (hVISA). Os isolados hVISE foram resistentes a ciprofloxacina e foram agr tipos II (n=4) e I (n=1)
- ItemAcesso aberto (Open Access)Descoberta de antimicrobianos de amplo espectro contra diferentes formas de colonização de Staphylococcus epidermidis(Universidade Federal de São Paulo, 2023-11-14) Morgado, Priscylla Guimarães Migueres [UNIFESP]; Moraes, Carolina Borsoi [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/2856012942943418Apesar de presente na microbiota humana, a espécie Staphylococcus epidermidis é considerada um patógeno oportunista frequentemente associado às infecções crônicas e de difícil tratamento. A crescente falha terapêutica tem sido associada tanto à resistência, com mecanismos envolvendo o genoma bacteriano, quanto a variações fenotípicas de diferentes formas de colonização – biofilmes, fase planctônica e bactérias intracelulares. As diferenças celulares e moleculares desses fenótipos ainda são pouco entendidas e podem estar relacionados à falha no tratamento quimioterápico de infecções por S. epidermidis. Diante disso, torna-se necessário descobrir novos fármacos com atividade antibiofilme e nas outras formas de colonização para erradicação dessas infecções. Objetivo: O presente estudo teve como objetivos a descoberta de compostos com atividade antibiofilme e, idealmente, com amplo espectro de atividade contra diferentes fenótipos de S. epidermidis, assim como, o estudo do modo de ação dos compostos mais promissores. Métodos: Foi desenvolvida uma cascata de triagem para priorização de compostos com atividade desejada. Inicialmente, biofilmes de S. epidermidis foram analisados como modelo inicial para descoberta de fármacos. Ensaios de inibição da formação de biofilme e da fase planctônica foram otimizados e validados em diferentes meios de cultura e métodos de análise de metabolismo celular. Foi então realizada uma triagem primária com 2437 compostos (obtidos de fonte comercial ou colaborações acadêmicas) em biofilmes de S. epidermidis. Os resultados foram analisados e confirmados por dois métodos de leitura diferentes. Para identificar atividades já descritas dos compostos comerciais que obtiveram promissora atividade (denominados hits) comerciais, foram avaliados bases de dados com coleções de moléculas criadas e documentadas com sua principal atividade. Os hits com atividade inédita foram analisados em ensaios secundários com outros fenótipos de colonização de S. epidermidis. A citotoxicidade dos hits foi analisada nas linhagens celulares humanas THP-1 e U2OS. Resultados: Após otimização dos ensaios de formação de biofilme em meio BM e validação com o antibiótico linezolida, a triagem confirmatória de atividade avaliou compostos hits em curva concentração-resposta. Do total, 25 hits demonstraram atividade antibiofilme e, destes, oito hits comerciais com atividade farmacológica conhecida apresentaram atividade nunca antes descrita. Sete hits apresentaram atividade antiplanctônica, 13 hits apresentaram atividade de disrupção em biofilmes previamente formados e destes, nove hits apresentaram atividade em todos os fenótipos analisados. A citotoxicidade dos hits indicou que 17 hits apresentam índices de seletividade (IS) satisfatórios (IS ≥ 10) em relação aos biofilmes, considerando ambas as linhagens testadas. Conclusões: Foi possível demonstrar a robustez e confiabilidade do ensaio para diferentes formas de colonização de S. epidermidis, sendo identificados 25 hits com atividade antibiofilme inédita. Nove hits apresentaram amplo espectro de atividade em todos os fenótipos analisados. Futuramente, esses compostos podem tornar-se viáveis alternativas para identificação de novos alvos contra S. epidermidis, além de auxiliar no entendimento dos sistemas de virulência deste patógeno oportunista.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Efeito terapêutico da aplicação intra-ocular de ozônio em modelo experimental de endoftalmite por Staphylococcus epidermidis em coelhos(Conselho Brasileiro de Oftalmologia, 2004-08-01) Lake, Jonathan Clive; Felberg, Sergio; Malavazzi, Gustavo Ricci [UNIFESP]; Goulart, Denise Atique [UNIFESP]; Nishiwaki-dantas, Maria Cristina; Dantas, Paulo Elias Correa; Santa Casa Departamento de Oftalmologia Seção de Córnea e Doenças Externas; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)PURPOSE: To evaluate the anti-inflammatory and antimicrobial effect of intraocular ozone diluted in BSS on experimental Staphylococcus epidermidis endophthalmitis. METHODS: We injected 0.1ml of S. epidermidis colonies (10(5) colonies/ml) to produce experimental endophthalmitis in the right eyes of 17 New Zealand rabbits. Seven rabbits were assigned to a control group and received an intravitreal injection of 0.1ml BSS. Ten rabbits were treated with intravitreal injection of 0.1ml BSS-diluted ozone (2 ppm). Data were distributed according to clinical and histological findings after 24 hours, each rabbit receiving a score. Mean scores and standard deviations were compared using the two-sample t test. RESULTS: Mean clinical score for the control group was 11.14 ± 1.04. Mean clinical score for the treated group was 4.90 ± 1.29, which was significantly lower (p<0.01). Mean histological scores were, respectively, 17.00+ 0.57 and 10.20 ±1.30 for the control group and the treated group. The histological scores were significantly lower for the treated group (p<0.01). All cultures in both control and ozone groups were positive after 24 hours of experiment. CONCLUSION: Treatment with diluted ozone significantly reduced the inflammatory reaction in our model of experimental endophthalmitis. This probably occurred due to a decrease in bacterial content after ozone injection. It is necessary to study other ozone concentrations in different experimental models in order to determine ozone efficacy with a higher precision.
- ItemEmbargoEstudo clínico-epidemiológico das infecções da corrente sanguínea hospitalares por estafilococos coagulase-negativos e dos fatores de risco associados a letalidade(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1997) Carneiro, Irna Carla do Rosario Souza [UNIFESP]; Pignatari, Antonio Carlos Campos [UNIFESP]Nos ultimos dez a quinze anos, os estafilococos coagulase-negativos (ECN), antes considerados apenas microrganismos avirulentos, comensais da pele humana, passaram a ter seu papel patogenico reconhecido como agentes de infeccoes no ambiente hospitalar. Atualmente, assumem importancia nas infeccoes da corrente sanguinea (ICS) nosocomiais e infectam uma variedade de dispositivos medicos proteticos. As ICS por este agente estao geralmente associadas ao uso de dispositivos intravasculares, ocorrendo preferencialmente em pacientes imunodeprimidos e neonatos prematuros internados em unidades de terapia intensiva, idosos e pacientes portadores de neoplasia, correlacionando-se com taxas consideraveis de letalidade. Entretanto, representam uma causa frequente de contaminacao de culturas, constituindo-se, em muitas situacoes, um dilema para o clinico a diferenciacao entre bacteremia verdadeira e um episodio contaminante. O objetivo deste trabalho foi analisar os aspectos clinico-epidemiologicos das ICS por ECN, procurando determinar os fatores de risco associados a aquisicao das ICS e sua diferenciacao dos episodios contaminantes, assim como aqueles relacionados a letalidade. O trabalho foi realizado no Hospital Universitario da UNIFESP-Escola Paulista de Medicina (Hospital São Paulo), no periodo de 01 de janeiro de 1995 a 31 de dezembro de 1996, onde foram estudados 146 episodios de bacteremia hospitalar por ECN em 143 pacientes, sendo 63,3% (93) ICS e 36,4% (53) considerados como contaminacao. Os episodios de ICS foram mais frequentes em pacientes com idade igual ou superior a 40 anos, sendo 33,3% dos pacientes encontravam-se com 60 anos ou mais. Predominaram os grupos de doencas de base nao fatais ou ausentes e de doencas potencialmente fatais (88,2%). As doencas neoplasicas, neurologicas, cardiovasculares e pulmonares foram as enfermidades mais frequentemente diagnosticadas entre os pacientes com ICS. As enfermarias clinicas foram o principal local de ocorrencia das ICS (45,2%), seguidas das unidades de terapia intensiva (adulto, pediatrica e neonatal) (35,5%). O tempo de internacao dos pacientes com ICS foi longo, em media 48,3 dias, sendo significantemente maior do que no grupo com contaminacao, 32,6 dias. As ICS ocorreram mais tardiamente no curso de internacao dos pacientes, 26,7 dias em media , sendo significante se comparado a 12,8 dias entre os episodios contaminantes. A principal fonte de bacteremia foi primaria, sendo indeterminada em 47,3% e tendo como foco o dispositivo intravascular em 17,2%. A fonte pulmonar foi a segunda mais frequente, identificada em 22,6% dos casos. A presenca de dispositivo intravascular, cateter venoso central, ventilacao mecanica, sondagem vesical e o tempo de aparecimento da bacteremia ( apos sete dias de internacao) representaram os fatores de risco relacionados a aquisicao de ICS hospitalar por ECN. A terapia antimicrobiana foi considerada adequada em 76,3% dos episodios, corrigida em 15,1% e inadequada em 8,6%. As especies mais isoladas nas ICS e no grupo de contaminantes foram S. epidermidis e S. haemolyticus. Predominaram as cepas hospitalares resistentes a oxacilina, identificadas em 76,3% dos casos de infeccao verdadeira e 86,8% nos episodios de contaminacao. As variaveis que se associaram independentemente a ocorrencia de ICS, pelo modelo de regressao logistica multipla foram: ventilacao mecanica (OR=7,3), presenca de cateter venoso central (OR=2,86) e tempo de aparecimento da bacteremia (> sete dias de internacao) (OR=2,43). Atraves deste modelo, foi possivel predizer que a probabilidade de um episodio de bacteremia por ECN, que ocorra ate o setimo dia de internacao em um paciente sem cateter venoso central implantado e sem ventilacao mecanica, ser contaminacao e de 68%. Por outro lado, um paciente em uso de cateter venoso central e submetido a ventilacao mecanica, apresentando bacteremia por ECN apos sete dias de internacao, tem 4% de probabilidade de ter feito um episodio de contaminacao. A mortalidade geral dos pacientes com ICS foi elevada, 54,8%. Considerando a evolucao para o obito ate o 14o apos a bacteremia, a letalidade foi de 36,6%. Analisando-se a presenca das variaveis ate o 14o dia, observou-se que a media de idade dos pacientes que morreram, 50,5 anos, foi significantemente maior do que os doentes que apresentaram boa evolucao, 34,6 anos. O obito ocorreu em 51,6% dos pacientes com idade igual ou superior a 60 anos, sendo significante se comparado aqueles situados em faixa etaria inferior a esta. A ventilacao mecanica foi um fator de risco para letalidade nos pacientes estudados. A evolucao para choque septico, assim como o uso previo de antimicrobianos se associaram ao obito nos pacientes estudados. O isolamento de cepas resistentes a oxacilina contribuiu significantemente com a evolucao desfavoravel das ICS. As variaveis que se associaram independentemente com maior letalidade, na regressao logitica multipla foram: choque septico (OR=4,98), antibioticoterapia previa (OR=4,35), resistencia a oxacilina (OR=3,76) idade avancada (igual ou superior a 60 anos) (OR=2,95). O modelo criado demonstrou que um paciente com idade igual ou superior a 60 anos, fazendo uso de algum antimicrobiano previo, ao apresentar um episodio de ICS por ECN resistente a oxacilina e evolui com choque septico, tem uma probabilidade de 89% de morrer em consequencia da bacteremia. Entretanto, a ocorrencia de ICS por ECN sensivel a oxacilina, em paciente internado com menos de 60 anos, que nao esta fazendo uso de antibiotico previamente a bacteremia e nao apresenta choque no curso da ICS, tem uma probabilidade de morte de apenas 3%