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    Análise molecular do plasma seminal de pacientes com lesão medular, baseada em espectrometria de massas: proteômica quantitativa e fosfoproteômica
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2015-04-08) Silva, Barbara Ferreira da [UNIFESP]; Bertolla, Ricardo Pimenta [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/8479803539567479; http://lattes.cnpq.br/8792207614264556; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Objetivo: Este trabalho visa à caracterização molecular do plasma seminal obtido de pacientes com anejaculação causada por lesão medular (LM). Método: Amostras de plasma seminal foram coletadas, de 12 pacientes LM por estimulação vibratória peniana (EVP) e 11 doadores controle não lesionados e normozoospérmicos. A concentração de proteína de cada amostra foi estimada através do método de Bradford. Todas as amostras de indivíduos controle foram agrupadas formando um pool de proteínas (1mg total) representativo do grupo. As amostras LM ou foram agrupadas em pool representativo contendo 1mg de proteínas totais (10 amostras) ou analisadas individualmente (12 amostras, 1mg/amostra). Todas as amostras foram submetidas a uma digestão sequencial de proteínas combinando endoproteinase Lys-C com tripsina e os peptídeos resultantes foram quimicamente marcados por reação de dimetilação com isótopos estáveis, de acordo com o grupo. As principais diferenças entre os grupos foram acessadas através da comparação de pool de amostras ("experimento pool?), à medida que variações específicas entre indivíduos foram investigados através da análise de amostras individuaís ("experimento individual?). Assim, os peptídios marcados foram agrupados em proporção 1:1 (pool controle:pool LM; pool controle:amostra individual) e a mistura final submetida a fracionamento off-line. Um total de 48 frações foram coletadas para a "experimento pool" e 36 frações (combinadas em 30 frações) para o "experimento individual." Todas as frações coletadas foram finalmente analisadas por espectrometria de massas (MS) em tandem (MS/MS). Para análise de fosfoproteômica, as amostras diferencialmente marcadas por reação de dimetilação foram inicialmente misturadas, digeridas a peptídeos e aplicadas em uma coluna de Fe-IMAC acoplada a um sistema de cromatografia líquida de alta pressão (HPLC) para o enriquecimento dos fosfopeptídeos. Em seguida, a amostra foi fracionada e posteriormente analisada por MS/MS. Resultados: Em relação ao experimento de proteômica quantitativa, obteve-se uma ampla caracterização do proteoma do plasma seminal humano, identificando-se mais de 2.800 proteínas únicas, além de descrever, em detalhes, o proteoma diferencial observado em pacientes LM. A análise funcional do proteoma demonstrou que uma hiper-ativação do sistema imunológico, a qual não é desencadeada por infecção microbiana, pode influenciar em alguns processos seminais importantes. Além disso, os resultados apontam em direção a uma relevante falha funcional prostática, intrinsecamente relacionada à baixa motilidade dos espermatozoides, observada em pacientes LM. À baixa funcionalidade prostática está ligagada a diminuição de enzimas metabólicas, responsáveis pela produção de ATP extracelular, secretadas via prostasomos. Em relação ao experimento de fosfoproteômica, no total 33 diferentes fosfoproteínas foram identificadas, correspondendo a 428 fosfopeptídeos. Ao todo, cerca de 116 diferentes sítios de fosforilação, com um mínimo de 2 peptídeos e 1% FDR foram identificados. Através da comparação quantitativa entre pacientes LM e contoles, foi possível observar que um total de 14 fosfoproteínas individuais apresentou-se elevado no grupo LM, ao passo que 9 fosfoproteínas apresentaram-se diminuídas no memso grupo. Um total de 53 sítios de fosforilação no grupo LM e um total de 40 sítios de fosforilação no grupo controle foram identificados. Entretanto, os resultados mais expressivos foram observados em relação à semenogelinas. Foram identificados, com confiança, 29 novos sítios de fosforilação em semenogelinas (14 sítios descritos para SEMG1 e 15 sítios descritos para SEMG2). Para SEMG1, cerca de 7 sítios de fosforilação encontraram-se elevados no grupo LM. Não obstante, 6 diferentes sítios de fosforilação encontraram-se diminuídos no grupo LM . Para SEMG2, cerca de 5 sítios de fosforilação foram encontrados elevados no grupo LM, ao passo que 10 sítios de fosforilação encontraram-se diminuídos nesse grupo. Tais resultados levantam a hipótese de que, assim como a próstata, as vesículas seminais de pacientes LM podem apresentar anormalidades funcionais e estarem envolvidas na baixa qualidade seminal apresentada por esses pacientes. Conclusões: Este estudo descreveu a infertilidade relacionada à LM, em um nível proteômico, evidenciando os principais fatores que podem comprometer a funcionalidade dos espermatozoides, principalmente, a motilidade celular. Cerca de 2.800 proteínas foram identificadas com alta confiança, evidenciando que pacientes LM apresentam forte atividade do sistema imunológico, não acionado por infecção microbiana. Há, também, uma indução de inibidores de proteases e uma perda simultânea de proteases. No entanto, a possível perda de função da próstata talvez seja o principal responsável por causar o fenótipo molecular e macroscópico, observado na infertilidade decorrente de LM. Além disso, este estudo descreveu o fosfoproteoma do plasma seminal humano, em detalhe. O estudo de diferentes padrões de fosforilação pode, também, facilitar a compreensão dos mecanismos que levam à infertilidade decorrente de LM. Os resultados evidenciaram que pacientes LM apresentam muitas fosfoproteínas relacionadas às vesículas seminais. Talvez o padrão de fosforilaç?o diferencial esteja relacionado a problemas de funcionamento glandulares decorrentes da propria LM.
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    Antioxidant enzyme profile and lipid peroxidation products in semen samples of testicular germ cell tumor patients submitted to orchiectomy
    (Brazilian Soc Urol, 2017) Sposito, Camila [UNIFESP]; Camargo, Mariana [UNIFESP]; Tibaldi, Danielle Spinola [UNIFESP]; Barradas, Valeria [UNIFESP]; Cedenho, Agnaldo Pereira [UNIFESP]; Nichi, Marcilio; Bertolla, Ricardo Pimenta [UNIFESP]; Spaine, Deborah Montagnini [UNIFESP]
    Purpose: To determine enzymatic antioxidant and lipid peroxidation levels in seminal plasma of patients orchiectomized for testicular tumors. Materials and Methods: The study included 52 patients: 26 control men and 26 orchiectomized patients for testicular tumor, of which 12 men had seminoma tumor and 14 men non-seminoma tumor. After semen analysis performed according to the WHO guidelines, an aliquot of semen was centrifuged and the seminal plasma was collected. Lipid peroxidation was performed by thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) assay and antioxidant profile was assessed by analyzing catalase, glutathione peroxidase (GPx) and superoxide anion (SOD) activities using colorimetric assays with a standard spectrophotometer. Data were tested for normality and compared using one-way ANOVA (p<0.05). Results: Seminoma and non-seminoma groups presented lower sperm concentration and morphology when compared to control group (p=0.0001). Both study groups (seminoma and non-seminoma) presented higher TBARS levels when compared to control group (p=0.0000013). No differences were observed for SOD (p=0.646) andGPx (p=0.328). It was not possible to access the enzymatic activity of catalase in any group. Conclusion: Patients with testicular tumor present increased semen oxidative stress, but no differences were observed in antioxidant levels, even after orchiectomy. This indicates that most likely an increased generation of oxidative products takes place in these patients.
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    Avaliação de proteínas seminais relacionadas ao estresse oxidativo e sua associação com o nível de peroxidação lipídica em homens normozoospérmicos com ou sem fatores clínicos de agravo à fertilidade.
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2018-01-23) Jeremias, Jessica Timoteo [UNIFESP]; Zylbersztejn, Daniel Suslik [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/2798788209202563; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Objetivo: Verificar os níveis seminais das proteínas SOD1, PRDX1, S100A9, APOA4 e GSTP1 como biomarcadores de peroxidação lipídica no plasma seminal. Métodos: Estudo transversal com 100 homens normozoospérmicos, dos quais 25 indivíduos não apresentavam fatores clínicos de agravo à fertilidade e 75 indivíduos apresentavam pelo menos um fator. Dessa forma, foram realizadas a análise seminal convencional e análises funcionais dos espermatozoides (atividade mitocondrial, integridade do acrossoma e fragmentação do DNA dos espermatozoides), além da avaliação do estresse oxidativo do plasma seminal. Por fim, as proteínas SOD1, PRDX1, S100A9, APOA4 e GSTP1 foram analisadas em todas as amostras pelo método de Western blotting. Para a análise estatística, as variáveis (qualidade seminal, qualidade funcional dos espermatozoides, níveis seminais de peroxidação lipídica e expressão seminal das proteínas) foram comparadas entre homens com e sem agravo aparente à fertilidade. Além disso, as amostras foram estratificadas de acordo com os níveis seminais de peroxidação lipídica e as trinta amostras com os menores níveis e as trinta amostras com os maiores níveis foram selecionadas para formação dos grupos baixa peroxidação lipídica (n=30) e alta peroxidação lipídica (n=30). Resultados: A comparação entre os indivíduos com e sem fator clínico de agravo à fertilidade apresentou diferenças quanto a IMC, porcentagem de gordura, motilidade não progressiva dos espermatozoides, concentração de neutrófilos, porcentagem de espermatozoides com acrossoma íntegro, porcentagem de espermatozoides sem atividade mitocondrial em sua peça intermediária, porcentagem de espermatozoides com o DNA fragmentado por estresse oxidativo e nível seminal de peroxidação lipídica. Além disso, os grupos baixa e alta peroxidação lipídica diferiram quanto ao nível seminal de peroxidação lipídica, a distribuição de homens com varicocele (p=0,039), maior no grupo de alta peroxidação lipídica e aos níveis seminais das proteínas SOD1 (p=0,003) e PRDX1 (p=0,016), hiperexpressas no grupo alta peroxidação lipídica. Conclusão: O nível seminal das proteínas S100A9, APOA4 e GSTP1 não é alterado com a alta peroxidação lipídica, assim como não se altera quando comparados entre os grupos com e sem fator de agravo à infertilidade, nem para SOD1 e PRDX1. Por outro lado, as proteínas SOD1 e PRDX1 estão hiperexpressas em homens com alta peroxidação lipídica no plasma seminal. Assim, pode-se sugerir que essas são potenciais biomarcadoras de infertilidade masculina causada especificamente pelo estresse oxidativo seminal.
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    Bovine papillomavirus DNA in milk, blood, urine, semen, and spermatozoa of bovine papillomavirus-infected animals
    (Funpec-editora, 2009-01-01) Lindsey, Charles Julian [UNIFESP]; Almeida, Marcos Eduardo de [UNIFESP]; Vicari, Camilo Alfredo Faigle [UNIFESP]; Carvalho, Claudemir de; Yaguiu, Andrea; Freitas, Antonio Carlos de; Beçak, Willy; Stocco, Rita de Cassia [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); Inst Butantan; Universidade Federal de Pernambuco (UFPE)
    Papillomavirus infection in bovines is associated with cutaneous papillomatosis on the hide, udders and other epithelial tissues, as well as in oral respiratory, alimentary and urinary tract mucosa. Bovine papillomavirus (BPV) is also considered the etiological agent of esophageal tumors and the malignant bladder tumors that characterize the clinical condition associated with chronic enzootic hematuria. After infective viral DNA was found in cattle blood and BPV1, 2 and 4 DNA in cattle reproductive and embryonic tissues, we looked for and found BPV DNA in blood, milk, urine, seminal fluid, and spermatozoa of BPV-infected animals. Peripheral blood lymphocyte cultures from BPV-infected animals had high rates of chromosome aberrations, including radial rearrangements that signal oncogenic potential and viral interaction with telomeric regions. The finding of BPV DNA in body fluids and tissues other than the epithelium demonstrates co-infection of other tissues or cell types by papillomavirus and shows the potential role of lymphocytes, seminal fluid and spermatozoa in BPV transmission. Our findings reinforce a peremptory need for prophylactic and therapeutic instruments to curtail this disease in bovine livestock.
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    Effects of semen storage and separation techniques on sperm DNA fragmentation
    (Elsevier B.V., 2010-12-01) Jackson, Robert E.; Bormann, Charles L.; Hassun, Pericles A.; Rocha, Andre M.; Motta, Eduardo L. A. [UNIFESP]; Serafini, Paulo C.; Smith, Gary D.; Univ Michigan; Univ Wisconsin; Genesis Genet; Huntington Reprod Med; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); Universidade de São Paulo (USP)
    Objective: To determine the effect of semen storage and separation techniques on sperm DNA fragmentation.Design: Controlled clinical study.Setting: An assisted reproductive technology laboratory.Patient(s): Thirty normoozospermic semen samples obtained from patients undergoing infertility evaluation.Intervention(s): One aliquot from each sample was immediately prepared (control) for the sperm chromatin dispersion assay (SCD). Aliquots used to assess storage techniques were treated in the following ways: snap frozen by liquid nitrogen immersion, slow frozen with Tris-yolk buffer and glycerol, kept on ice for 24 hours or maintained at room temperature for 4 and 24 hours. Aliquots used to assess separation techniques were processed by the following methods: washed and centrifuged in media, swim-up from washed sperm pellet, density gradient separation, density gradient followed by swim-up. DNA integrity was then measured by SCD.Main Outcome Measure(s): DNA fragmentation as measured by SCD.Result(s): There was no significant difference in fragmentation among the snap frozen, slow frozen, and wet-ice groups. Compared to other storage methods short-term storage at room temperature did not impact DNA fragmentation yet 24 hours storage significantly increased fragmentation. Swim-up, density gradient and density gradient/swim-up had significantly reduced DNA fragmentation levels compared with washed semen. Postincubation, density gradient/swim-up showed the lowest fragmentation levels.Conclusion(s): the effect of sperm processing methods on DNA fragmentation should be considered when selecting storage or separation techniques for clinical use. (Fertil Steril (R) 2010;94:2626-30. (C) 2010 by American Society for Reproductive Medicine.)
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    Estudo das vias proteômicas do plasma seminal e dos espermatozoides associadas à infertilidade masculina
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2018-05-08) Lopes, Paula Intasqui [UNIFESP]; Bertolla, Ricardo Pimenta [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/8479803539567479; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Objetivo: A composição proteica do plasma seminal e dos espermatozoides é essencial para a sua função correta e, consequentemente, para a fertilidade. Assim, estudos proteômicos vêm sendo realizados a fim de entender os mecanismos pós-genômicos subjacentes e de identificar as proteínas alteradas na infertilidade masculina. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar proteínas de plasma seminal e de espermatozoides e sua associação com alterações funcionais dos espermatozoides e com a infertilidade masculina primária ou secundária. Métodos: Este trabalho foi subdividido em dois estudos. No estudo 1, amostras seminais de 197 homens normozoospérmicos foram utilizadas. Após a coleta e liquefação do sêmen, uma alíquota foi utilizada para a análise seminal, outra para a avaliação da integridade funcional dos espermatozoides e o volume remanescente foi centrifugado para a separação do plasma seminal. Este foi então utilizado para a avaliação dos níveis seminais dos biomarcadores sugeridos: (i) de alterações na atividade mitocondrial dos espermatozoides – GSTM3, (ii) de defeitos no acrossoma dos espermatozoides – PLTP e (iii) de integridade do DNA dos espermatozoides – CRISPLD1, CRISPLD2 e RARRES1. No estudo 2, sete homens com fertilidade comprovada (n=7), nove homens com infertilidade primária (n=9) e sete homens com infertilidade secundária (n=7) foram incluídos. Após a coleta e liquefação do sêmen, uma alíquota foi utilizada para a análise seminal e o volume remanescente foi congelado a –80 °C. No momento da análise proteômica, a amostra foi descongelada e centrifugada para separação dos espermatozoides. Após a extração das proteínas dos espermatozoides, essas foram utilizadas para a análise proteômica shotgun por 1D-LC-MS/MS. As proteínas diferencialmente expressas foram utilizadas para análise de redes de interação proteína-proteína. As proteínas centrais nessas redes, envolvidas com funções biológicas alteradas em ambos os grupos de homens inférteis (BAG6, HSPA2 e SPA17), assim como as proteínas específicas de testículos (HIST1H2BA e SPA17) foram validadas nas amostras de espermatozoides. Nos dois estudos, os biomarcadores foram avaliados por Western blotting. No estudo 2, as proteínas foram também analisadas por imunocitoquímica utilizando microscopia confocal. Resultados: No estudo 1, o nível seminal da proteína GSTM3 estava aumentado em amostras com baixa atividade mitocondrial dos espermatozoides. Por outro lado, o nível das proteínas CRISPLD2 e RARRES1 estava diminuído no plasma seminal de homens com alta fragmentação de DNA dos espermatozoides. As proteínas PLTP e CRISPLD1 não variaram entre os grupos estudados. No estudo 2, um total de 1.305 proteínas de espermatozoides foram identificadas, sendo 102 diminuídas e 15 aumentadas em ambos os grupos de infertilidade. As proteínas diminuídas estavam relacionadas, principalmente, a modificações pós-traducionais e dobramento de proteínas. A proteína BAG6 demonstrou-se significativamente diminuída em homens inférteis, enquanto a proteína HIST1H2BA estava aumentada nesses pacientes. Os níveis das proteínas HSPA2 e SPA17 não diferiram entre os grupos. Na análise por imunocitoquímica, nenhuma diferença quanto à localização dessas proteínas nos espermatozoides foi observada. Conclusão: As proteínas do plasma seminal e dos espermatozoides refletem alterações funcionais dos espermatozoides e a infertilidade masculina.
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    Evaluation testicular fine needle aspiration cytology and serum testosterone levels in dogs
    (Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia / Universidade de São Paulo, 2004-04-01) Souza, Fabiana Ferreira De; Leme, Denise Pereira; Uechi, Edilson [UNIFESP]; Trinca, Luzia Aparecida; Lopes, Maria Denise; Universidade Estadual Paulista (UNESP); Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    In order to verify alternative clinical approach in the reproductive evaluation of 4 adult dogs, the fine needle aspiration cytology (FNAC) and serum testosterone levels were used together with testicular volume measurement and semen analysis. FNAC was performed in both testes and serum testosterone concentrations were assayed in regular intervals during a 24h period. Results of semen analysis and FNAC were normal in dogs 1 and 3. In dog 2, small testes, poor semen quality, a high percentage of Sertoli cells and early spermatids were found suggesting testicular degeneration. In dog 4, a small right testicle, poor semen quality with low sperm concentration and an uncounted amount of spermatozoa in the FNAC indicated testicular degeneration due to an obstructive lesion; whereas high percentage of distal droplets, thicker left epididymis and normal FNAC of the left testis suggested a slow sperm transit. Testosterone circadian rhythm was clear in 3 of 4 dogs, although concentrations were low. Testicular volume, semen analysis and testicular FNAC could provide valuable information about spermatogenesis. In contrast, serum testosterone concentration was not clearly correlated with any reproductive characteristic of those dogs.
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    MALDI-TOF Fingerprinting of Seminal Plasma Lipids in the Study of Human Male Infertility
    (Springer, 2014-09-01) Camargo, Mariana [UNIFESP]; Intasqui, Paula [UNIFESP]; Lima, Camila Bruna de [UNIFESP]; Montani, Daniela Antunes [UNIFESP]; Nichi, Marcilio; Pilau, Eduardo Jorge; Gozzo, Fabio Cesar; Lo Turco, Edson Guimaraes [UNIFESP]; Bertolla, Ricardo Pimenta [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); Universidade de São Paulo (USP); Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP); Natl Inst Sci & Technol Bioanalyt; Universidade Estadual de Maringá (UEM)
    This study proposed lipid fingerprinting of human seminal plasma by mass spectrometry as an analytical method to differentiate biological conditions. for this purpose, we chose infertile men as a model to study specific conditions, namely: high and low seminal plasma lipid peroxidation levels (sub-study 1.1), high and low sperm nuclear DNA fragmentation (sub-study 1.2), and intervention status: before and after subinguinal microsurgical varicocelectomy (study 2). Study 1 included 133 patients, of which 113 were utilized for sub-study 1.1 and 89 for sub-study 1.2. Study 2 included 17 adult men submitted to subinguinal varicocelectomy, before and 90 days after varicocelectomy. Lipids were extracted from seminal plasma and submitted to Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization Quadrupole-Time-of-Flight Mass Spectrometry in the positive ionization mode. Spectra were processed using Waters(A (R)) MassLynx, and MetaboAnalyst online software was used for statistical analyses. for sub-studies 1.1 and 1.2, and study 2, univariate analysis revealed 8, 87 and 34 significant ions, respectively. Multivariate analysis was performed through PCA and PLS-DA. PCA generated 56, 32 and 34 components respectively for each study and these were submitted to logistic regression. A ROC curve was plotted and the area under the curve was equal to 97.4, 92.5 and 96.5 %. PLS-DA generated a list of 19, 24 and 23 VIP ions for sub-studies 1.1 and 1.2, and study 2, respectively. Therefore, this study established the lipid profile and comparison of patterns altered in response to specific biological conditions.
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    Manchas de ejaculado pré e pós-vasectomia: pureza e quantidade de DNA recuperado após 10 anos de armazenamento
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-03-16) Mautoni, Carolina [UNIFESP]; Iwamura, Edna Sadayo Miazato [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/7497785333422804; http://lattes.cnpq.br/8996516662873141; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    The absence of sperm in the material collected from rape victims may be due to several factors, including the fact that the offender may have azoospermia, condition, for example, as a result of a successful vasectomy. There are also situations in which the only material available for analysis is derived from traces like semen stains on the victim's clothing. The objectives of this study were to assess the possibility of obtaining autosomal STR profile and STR-Y in seminal fluid stains, stored for 10 years and establish appropriate methodology for cases of traces from sexual aggression, pending for analysis and inclusion in databases (BNPG). Materials and Methods: Biological samples of seminal fluid pre and post-vasectomy, derived from 33 vasectomized individuals, preserved in cotton fabric since 2004, and the same was stored properly, in cardboard boxes, were used. In this study, the DNA material was extracted by QIAmp micro kit (Qiagen) and quantified by Real Time PCR technique, using the Quantifiler Duo DNA Quantification Kit following the manufacturer's instructions. Amplification was done through PowerPlex® ESI 17 Pro System, PowerPlex® FUSION and PowerPlex® 23-Y systems, and, analyzed on the ABI 3500 sequencer using the Gene MapperTM IDX version 1.2 program. We conclude that it is possible to obtain autosomal STR and STR-Y profile from extracted stains of semen preserved in cotton fabric for long periods. The colorless of cotton was an advantage for the study and facilitated the extraction in order not to offer PCR inhibitors. Still on this question, it is necessary to emphasize that even large elapsed time between the completion of the samples and the current study (10 years), these were particularly suitable degree of purity, and all profiles were obtained. The commercial DNA extraction kits present reproducibility and applicability of this type of material. Although in infima amount of biological materials (stain containing 30 uL of seminal liquid from vasectomized individuals in fabric), the methodology used in DNA extraction is reproducible and applicable to the stored cases. Considering the difficulty of obtaining genetic profile cases of sexual crime, analysis of fabric stains should be prioritized in the universe of the accumulated samples and stored for long periods.
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    Seasonal variation in the endocrine-testicular function of captive jaguars (Panthera onca)
    (Elsevier B.V., 2004-05-01) Morato, Ronaldo Gonçalves; Verreschi, Ieda Therezinha do Nascimento [UNIFESP]; Guimaraes, Marcelo Alcindo de Barros Vaz; Cassaro, Kátia; Pessutti, Cecilia; Barnabe, Renato Campanarut; Universidade de São Paulo (USP); Associacao Conservacao Carnivoros Neotrop; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); Fundacao Parque Zool São Paulo; Parque Zool Municipal Quinzinho Barros
    Captive adult male jaguars (Panthera onca) from two locations in southeast Brazil were studied to evaluate the effects of season on endocrine and testicular function. for assessment of testicular steroidogenic activity, androgen metabolite concentrations were measured in fecal samples collected one to three times per week over 14 (n = 4), 9 (n = 1) or 7 months (n = 1). To assess seasonality, data were grouped by season (summer: December-February; autumn: March-May; winter: June-August; spring: September-November). Additionally, samples collected in the dry season (March-August) were compared with those collected in the wet season (September-February). There were no differences (P > 0.05) in fecal androgen concentrations in samples collected in spring, summer, autumn, and winter (480.8 +/- 50.4 ng/g, 486.4 +/- 42.0 ng/g, 335.4 +/- 37.7 ng/g, and 418.6 +/- 40.4 ng/g dry feces). However, there were differences (P < 0.05) in fecal androgen concentrations between the dry and wet seasons (380.5 +/- 28.0 ng/g versus 483.9 +/- 32.3 ng/g dry feces). Sperm samples, collected from all males twice (approximately 6 months apart) were similar; mean (+/-S.E.M.) motility, concentration and morphology were 57.0 +/- 4.5%, 6.3 +/- 2.4 x 10(6) ml(-1), and 60.8 +/- 3.1%, respectively. in conclusion, androgen metabolite concentrations in the captive male jaguar were not affected by season, but there was a difference between the wet and dry periods. Further research is needed to verify these results. (C) 2003 Elsevier Inc. All rights reserved.