Navegando por Palavras-chave "Receptores Toll-Like"
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- ItemSomente MetadadadosAvaliacao dos efeitos do novo composto FTY720 na lesao de isquemia e reperfusao renal(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011) Pedregosa, Juliana Figueredo [UNIFESP]
- ItemSomente MetadadadosPadronização do estudo funcional em células dendríticas mielóides criopreservadas provenientes do sangue periférico(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009) Bruno, Fernanda Romano [UNIFESP]; Kallás, Esper Georges [UNIFESP]As celulas dendriticas mieloides (mDC), sao elementos da imunidade inata, as quais possuem grande capacidade de apresentacao de antigenos aos linfocitos T e outras populacoes celulares, assim, potencial estimulatorio da resposta imunologica adquirida. Muito da acao das celulas dendriticas (DC) e mediada por reconhecimento de patogenos via Receptores Toll-like (TLR). Diversos estudos tem avaliado esta populacao celular no sangue periferico, porem a partir de amostras frescas ou expansao celular proveniente de monocitos. Objetivos: Este estudo visou padronizar uma metodologia de verificacao funcional de celulas dendriticas mieloides provenientes de celulas mononucleares de sangue periferico (CMSP) criopreservadas, apos estimulacao com diferentes ligantes de TLR, como Pam3CSK4 (TLR2/1), Poly (I:C) (TLR3), LPS (TLR4) e Resiquimod (TLR7/8). Foram avaliadas as diferentes magnitudes da resposta desta populacao celular a producao de Interleucina 6 (IL-6) e Fator de Necrose Tumoral - alpha (TNF-α) em individuos saudaveis. Metodos: Aplicando a tecnica de Citometria de Fluxo, foram utilizados anticorpos monoclonais especificos conjugados a fluorocromos para determinar a populacao de celulas dendriticas (DC) totais, para posterior determinacao da subpopulacao de mDC, a qual foi avaliada funcionalmente atraves da marcacao das citocinas intracelulares de interesse. Foi padronizada a identificacao de producao de TNF-α na populacao de mDC apos estimulacao com diferentes concentracoes dos ligantes de Receptores Toll-Like (TLR). Posteriormente, foram utilizadas as concentracoes dos ligantes de TLR definidas com o pico de producao da citocina estudada, para determinar uma curva de tempo versus resposta, avaliada em 2, 3, 5 e 16 horas de estimulacao com estes ligantes de TLR e, dependendo do declinio da curva de producao de IL-6 e TNF-α, este periodo foi prolongado para 24 ou 48 horas. Resultados: Apos as padronizacoes das melhores concentracoes e tempos de estimulacao dos diferentes ligantes de TLR estudados, foram realizadas analises em oito voluntarios saudaveis para determinar a magnitude da resposta de producao dessas citocinas de interesse apos estimulacao com os ligantes de TLR. Foi realizada a comparacao entre os quatro diferentes ligantes. As culturas celulares estimuladas com Resiquimod apresentaram maior producao de ambas citocinas estudadas, em comparacao com as estimuladas com o Poly (I:C) sendo estatisticamente significantes (p=0,0112 e p=0,0137 para IL-6 e TNF-α, respectivamente). O mesmo fenomeno nao foi verificado em nenhuma outra comparacao realizada entre os ligantes de TLR. Conclusoes: Dentre todos os diferentes ligantes de TLR utilizados neste estudo o Resiquimod proporcionou maior magnitude de resposta de IL-6 e TNF-α quando avaliada a populacao de mDC. Com estas padronizacoes, foi desenvolvida uma metodologia possivel de ser utilizada em qualquer outro estudo, seja de condicoes fisiologicas ou patologicas, onde as celulas dendriticas mieloides estejam envolvidas na geracao da resposta imunologica
- ItemSomente MetadadadosStatus Da Vitamina D E Repercussão Na Modulação Da Via Do Nf-"B Na Placenta E Nos Parâmetros Clínicos E Antropométricos Neonatais(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2018-03-23) Momentti, Ana Carolina [UNIFESP]; Pisani, Luciana Pellegrini [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Background. Vitamin D has been widely recognized for its role in modulating inflammation and immune system, being associated with placental inflammatory process, and fetal and neonatal clinical complications, but it still to be more elucidated. Aim. To investigate the possible changes in the placental inflammatory parameters induced by insufficient and deficient maternal vitamin D status in relation to the adequate status, and the repercussion in the clinical and anthropometric neonatal parameters. Methods. Puerperal women with single fetus without obstetric pathologies and/or complications were recruited to study. Serum 25(OH)D was measured in the first 48 hours after delivery, and the participants were classified according to vitamin D status: AD - adequate vitamin D status (control group); INS - insufficient vitamin D status; DEF - deficient vitamin D status. The placenta was collected after delivery. Maternal and neonatal data were obtained in the participants’ medical records. TNF- α, IL-10, MCP-1 and IL-10/TNF-α ratio protein contents and phosphorylated subunit of NF-κB p50 and TNFR1 protein expression were determined in placenta by ELISA and Western Blotting, respectively. Results. Vitamin D status demonstrated no association with placental inflammatory and neonatal parameters. A positive correlation (r= 0.03; p<0.05) was observed between maternal serum 25(OH)D and calcium. Conclusion. Our results do not exclude the possibility of maternal vitamin D inadequacy having influence on the development of future adverse events especially on the offspring. Further researches are needed to improve understanding of the determinants and the impacts of immunologic transition on the maternal-fetal dyad in a normal pregnancy.