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Navegando por Palavras-chave "Citometria de Fluxo"

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Somente Metadadados
Avaliacao da concordancia cito-histologica da puncao aspirativa por agulha fina de linfonodos e da citometria de fluxo na complementacao diagnostica
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2003) Martins, Marcos Roberto [UNIFESP]
Acesso aberto (Open Access)
Avaliação da produção de citocinas inflamatórias apos estimulação por lipoproteína L32(LipL32), lipopolissacarídeo (LSP) e lipopeptídeo ativador de monócitos-2 (MALP-2) e expressão de receptores de superfície em monócitos de pacientes com leptospirose
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2008) Pavanelli, Tais Francisco [UNIFESP]; Salomão, Reinaldo [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
A leptospirose constitui uma importante zoonose, encontrada em regiões de clima tropical, ocorrendo principalmente em épocas chuvosas. O controle da infecção depende do adequado reconhecimento do microorganismo pelos receptores de reconhecimento de padrão de patógenos, os TLRs, presentes nas células do sistema imune inato do hospedeiro. A ativação dos TLRs é fundamental para o desencadeamento da resposta inflamatória, mediadora da resposta de proteção e de lesão no processo infeccioso. Objetivos: Avaliar a expressão dos receptores TLR2, TLR4 e CD14 na superfície de monócitos e a resposta in vitro aos estímulos LipL32 (extraído de Leptospira sp.), MALP-2 (antígeno sintético de Mycoplasma fermentans) e LPS (antígeno extraído de Salmonella abortus equi) ligantes dos TLRs, medida pela produção de citocinas, em pacientes com leptospirose. Métodos: Foram incluídos 07 pacientes com quadro clínico e laboratorial de leptospirose e 07 voluntários sadios, utilizados como controle. As células mononucleares do sangue periférico (CMSP) foram separadas utilizando ficoll-paque, congeladas e armazenadas em nitrogênio líquido. Após descongelamento, verificação da viabilidade e acerto da concentração de células para 1x106 células/mL foi mensurada a expressão de TLR2, TLR4 e CD14 na superfície de monócitos. O restante da suspensão de células foi incubada por 6 horas com os estímulos de 1000ng/mL de LipL32, 0,4U/mL de MALP-2 ou 100ng/mL de LPS. Após a primeira hora de incubação foi adicionado monensina para bloqueio da secreção de citocina. Em seguida, as CMSP foram marcadas com CD14, fixadas, permeabilizadas e expostas aos anticorpos anti-IL-6 e anti-TNF-α para detecção intracelular da produção destas citocinas inflamatórias nos monócitos. Foram adquiridos 10.000 eventos combinado-se morfologia e positividade para CD14 em citometria de fluxo. Resultados: Não foi observada diferença significativa na resposta inflamatória entre pacientes com leptospirose e voluntários sadios quando CMSP foram estimuladas in vitro com MALP-2 e LipL32 para indução da produção de citocinas inflamatórias (IL-6 e TNF-α) em monócitos. Todavia, a produção de TNF-α foi menor após estímulo com LPS (p=0,035), o que não ocorreu com a produção de IL-6. Em relação à expressão de receptores de superfície, foi observado aumento da expressão de TLR2 (p=0,025) na superfície de monócitos dos pacientes, porém não houve diferença na expressão de TLR4 e CD14. Conclusões: Neste estudo demonstramos que a capacidade de reconhecimento de antígenos pelos monócitos do sangue periférico de pacientes com leptospirose está preservada ou aumentada. Além disso, observamos que a produção de citocinas inflamatórias frente a antígeno da própria Leptospira (LipL32) e outro antígeno agonista de TLR2 (MALP-2) está mantida. Entretanto, a produção de citocina inflamatória frente ao LPS (agonista de TLR4) mostrou-se complexa podendo estar influenciada pela tolerância cruzada.
Somente Metadadados
Caracterizacao das subpopulacoes de linfocitos T de sangue periferico na infeccao pelo virus linfotropico de celulas T humanas do tipo 1 (HTLV-1) em individuos infectados ou nao pelo virus da imunodefiCiência humana do tipo 1 (HIV-1)
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2001) Santos, Marcos Davi dos [UNIFESP]
A infeccao pelo HTLV-I tem distribuicao mundial e estima-se que de cinco a dez milhoes de pessoas estejam infectadas em todo o mundo.) O HTLV-I causa a leucemia de celulas T do adulto e esta associado a uma mielopatia, a mielopatia associada ao HTLV-I (HAM) e paraparesia espastica tropical (TSP), tratando-se da mesma entidade clinica. O HTLV-I pode co-infectar um mesmo individuo junto com virus da imunodefiCiência humana (HIV-1). Entre as consequencias da interacao entre o HTLV-I e o sistema de defesa esta uma ativacao celular persistente. Esse estudo incluiu 62 individuos classificados em cinco grupos diferentes [individuos sem infeccao pelo HTLV-I (n=19); grupo I, individuos portadores de infeccao pelo HTLV-I (n=20), grupo II; pacientes com HAM/TSP (n=9), grupo III; individuos HIV-1 positivos (n=7), grupo IV; e individuos com co-infeccao HTLVI/HIV-1 HAM/TSP (n=7), grupoV]. Foram utilizados anticorpos monoclonais ligados a fluorocromos para identificacao das subpopulacoes de linfocitos atraves da citometria de fluxo. Nao foram encontradas diferencas significativas na contagem de linfocitos T, totais, CD4+ e CD8+, celulas B e NK, expressao de CD38 e celulas efetoras, na comparacao entre os grupos I, II e III e nem entre os grupos IV e V. A expressao de HLA-DR e CD25 em linfocitos, T CD4+ mostrou-se, aumentada em pacientes com HAM/TSP e portadores da infeccao pelo HTLV-I. Isso pode ser decorrente da ativacao celular persistente pelos antigenos virais...(au)
Somente Metadadados
Caracterizacao imunofenotipica da diferenciacao eritrocitaria, granulocitica e megacariotica em pacientes com sindromes mielodisplasicas
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009) Sandes, Alex Freira [UNIFESP]
Somente Metadadados
Compartimentalizacao e ativacao de linfocitos T na tuberculose pleural
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2005) Silva, Tania Maria da [UNIFESP]
Somente Metadadados
Desenvolvimento de anticorpos especificos para receptor B 1 de cininas humano
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009) Faria, Atila Granados Afonso de [UNIFESP]
Somente Metadadados
Detecção de Doença Residual Miníma (DRM) em pacientes com Leucemia Mieloide Aguda (LMA), através da técnica de Citometria de Fluxo Multiparamétrica (CFM)
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2001) Bahia, Daniella Marcia Maranhão [UNIFESP]; Yamamoto, Mihoko [UNIFESP]
As leucemias mieloides agudas, na sua maioria, recaem no primeiro ano do diagnostico decorrente da presenca da doenca residual minima. A citometria de fluxo multiparametrica tem sido usada na busca de doenca residual, atraves dos fenotipos aberrantes. Objetivo: Avaliar a presenca da doenca residual minima por citometria de fluxo multiparametrica em pacientes com diagnostico de leucemia mieloide aguda; determinar o momento de avaliacao que melhor prediz recaida, e seu correspondente valor de cut-off avaliar troca de fenotipo nas recaidas. Material e metodos: Trinta e seis pacientes com diagnostico de leucemia mieloide aguda foram avaliados quanto a presenca de fenotipos aberrantes por citometria de fluxo, usando os seguintes anticorpos monoclonais (CD10; CD11c; CD13; CD14; CD19; CD33; CD34; CD45; HLADR; CD2; CD4; CD15; CD65; CD117; CD7; CD38; CD41; CD56; IgG1 e IgG2). Doze pacientes com, pelo menos, um fenotipo aberrante puderam ser acompanhados apos quimioterapia de inducao, consolidacao, intensificacao e a cada 03 meses. A avaliacao da doenca residual minima baseou-se na busca dos fenotipos aberrantes identificados ao diagnostico, atraves da aquisicao de 50.000 eventos. A analise, na regiao de celulas blasticas (SSCxCD45), foi feita usando o programa Paint-a-gate. No caso de recaida, todos os marcadores eram, novamente, reavaliados. Resultados: Os fenotipos aberrantes foram encontrados em 88,6 por cento dos casos. A analise de doenca residual minima mostrou resultados crescentes durante o seguimento dos 04 pacientes que recairam, apesar da documentada remissao morfologica (p=0,043). Entre estes pacientes, os niveis de doenca residual minima apos quimioterapia de inducao e de intensificacao foram significantemente maiores que os valores correspondentes no grupo em remissao (p=0,021 e p=0,010, respectivamente). O nivel de doenca residual que pode predizer recaida foi de 2,6x10-3 celulas leucemicas apos quimioterapia de inducao. Na recaida, todos os pacientes apresentaram alguma alteracao antigenica. Tres deles mantiveram seus fenotipos aberrantes originais e um mostrou uma troca de populacao (LMA-M5b que recaiu como bifenotipica) mantendo apenas um de seus fenotipos, o qual permitiu o seguimento da doenca residual. Conclusoes: A deteccao imunologica da doenca residual minima e uma tecnica util para prever recaida. A avaliacao apos quimioterapia de inducao mostrou boa correlacao com a evolucao. Apesar da ocorrencia da troca de fenotipo...(au)
Somente Metadadados
Diagnostico diferencial entre leucemia linfocitica cronica-B, outras doencas linfoproliferativas cronicas-B e linfocitos B normais, atraves da citometria de fluxo quantitativa
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2003) Franco, Luciane Fonseca [UNIFESP]
Objetivos: estabelecer o diagnostico diferencial das DLPC pelo sistema de escore, padronizar a tecnica de imunofenotipagem quantitativa, determinar o CD23, CD19, CD20. CD5 e CD22 ABC na LLC, nas outras DLPC e nos linfocitos normais. Material e metodo: Foram estudados 74 pacientes com DLPC-B (60 LLC e 14 DLPC-B) e 10 individuos sadios como controle. Para a quantificacao do ABC utilizou-se o sistema QuantiBRITE beads (BID) atraves da CF. Resultados: Pelos sistemas de escore de Matutes et ai (1994) e Moreau et ai (1997), escore alto (4-5) foi obtido por 98,3 por cento dos casos de LLC, utilizando CD22 e 95 por cento com CD79b e escore foi inferior a 3 em todos os casos de DLPC (p< 0,0001). No estudo quantitativo, a solucao de lise comercial (BID) selecionou melhor a celula B. O CD19 ABC foi maior na celula normal (mediana: 12757,0) em relacao as neoplasicas (LLC: 8049,0; p=0,011 e DLPC: 4794,5; p=0,025) Na LLC, o CD20 ABC (21096,5) e CD22 ABC (3607,0) foram menores que nas outras DLPC (114702,0; p<0.001e 7928,5; p=0,002, respectivamente) e no grupo controle (137566,5; p<0.001e 15650,0; p<0,0001, respectivamente). Tanto o CD23 ABC quanto o CD5 ABC foram maiores na LLC (9022,5 e 11462,5 respectivamente) que nas DLPC-B(366,0; p<0.0001 e 1353,5; p=0,001, respectivamente) e no controle (3094,5; p=0,012 e 468,5; p<0,0001, respectivamente). Nos propomos um sistema de escore ABC para diferenciar a LLC das demais DLPC, dando um ponto para os valores: CD20<45000, CD23>1000, CD22<6000, CD5>2000 moleculas/celula. Quarenta e nove casos (81,6 por cento) de LLC apresentaram escore 34 e 11(18,3 por cento) escore  2 e estes casos apresentavam morfologia atipica. Todos os casos de DLPC apresentaram escore inferior a dois. Conclusao: A citometria de fluxo quantitativa e de facil aplicacao. O sistema de escore ABC proposto e util na diferenciacao entre LLC e demais DLPC, na maioria dos casos. A nivel individual, permite diferenciar as celulas neoplasicas das normais, possibilitando a aplicacao da tecnica quantitativa na deteccao da doenca residual minima
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Diferenciacao de celulas B-1: caracteristicas morfologicas, funcionais e moleculares
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2005) Popi, Ana Flavia [UNIFESP]
Acesso aberto (Open Access)
Distribuição de linfócitos T Vδ1 e V δ2 durante a doença ativa e tratamento específico da tuberculose
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2008) Costa, Priscilla Ramos [UNIFESP]; Kallas, Esper Georges [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
A tuberculose é considerada um problema de saúde pública mundial. Estima-se que um terço da população mundial está infectada pelo Mycobacterium tuberculosis. Trabalhos avaliando a interação patógeno vs. hospedeiro tem incentivado o estudo dos mecanismos envolvidos na resposta imunológica inicial nos indivíduos infectados e doentes. A participação dos linfócitos T na resposta contra a micobactéria tem destacado a importância dessas células na imunopatogênese. Uma subpopulação de linfócitos T, as células T γδ têm sido investigada quanto à sua participação na resposta imunológica, principalmente frente a processos infecciosos e inflamatórios. Essas células carregam cadeia TCR γδ, atuam tanto na resposta inata como na adaptativa e são encontradas em epitélios de alguns órgãos e no sangue periférico. Duas subpopulações são predominantes no sangue periférico, aquelas expressando TCR Vγ2Vδ2 e outras expressando TCR VγnVδ1. A subpopulação Vδ2 tem demonstrado reatividade a produtos micobacterianos, enquanto que os mecanismos específicos das células T Vδ1 permanecem desconhecidos. Este trabalho propôs investigar através da citometria de fluxo a distribuição dos linfócitos T γδ, Vδ1 e Vδ2 na infecção pelo M. tuberculosis. Este trabalho foi realizado com amostras de pacientes com tuberculose pulmonar na fase aguda e durante terapia específica, indivíduos expostos ao M. tuberculosis e controles saudáveis. Nós encontramos uma diminuição na freqüência de células T Vδ2 nos pacientes com tuberculose, permanecendo estável durante terapia. Ao contrário as células T Vδ1 revelaram tanto uma freqüência aumentada na fase aguda, como também aumento contínuo ao longo da terapia específica. Com base no impacto da doença na freqüência desses linfócitos T γδ, acreditamos que essas células estejam envolvidas na resposta imunológica inicial contra a micobactéria, e que exista uma provável função complementar dessas células com as xi células T αβ. Nós recomendamos futuros estudos para explorar e avaliar a funcionalidade das células T Vδ1 e Vδ2, esses dados serão de grande valia para melhor compreender a contribuição dessas células na resposta imune durante a tuberculose.
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Efeito da uremia e da modalidade dialitica na apoptose e funcao de leucocitos polimorfonucleares
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2000) Sardenberg, Camila [UNIFESP]
A disfuncao imunologica encontrada em pacientes portadores de insufiCiência renal cronica e, em parte, atribuida a toxicidade de solutos uremicos e ao tratamento dialitico. Pouco se sabe sobre a apoptose de leucocitos polimorfonucleares (PMNS) na uremia e sua contribuicao para a disfuncao observada nessas celulas. Com o objetivo de estudar o efeito da uremia e da modalidade dialitica sobre a apoptose e as funcoes de PMNS, in vivo, analisamos a fagocitose, a atividade do metabolismo oxidativo e a apoptose de PMNs de pacientes portadores de insufiCiência renal cronica em tratamento conservador (grupo IRC, n = 14), em hemodialise cronica (grupo HD, n = 14), em dialise peritoneal ambulatorial continua (grupo DPAC, n = 14) e em individuos sadios (grupo C, n = 14). Todos os pacientes do grupo HD foram dialisados com membranas sinteticas (polissulfona). Usando aliquotas de sangue fresco, quantificamos simultaneamente a fagocitose (ou a capacidade fagocitica) e o metabolismo oxidativo dos PMNs por citometria de fluxo. A fagocitose foi determinada por meio da captacao do S.aureus marcado com iodeto de propideo (IP) pelos PMNS. O metabolismo oxidativo foi determinado atraves da oxidacao do reagente DCFH-DA (intensidade de fluorescencia) sem estimulo (basal) e apos a estimulacao das celulas com FMLP, PMA e S.aureus. Para o estudo da apoptose os PMNs do sangue periferico foram isolados por meio de centrifugacao em gradiente de Ficoll-Hypaque. Logo apos o isolamento, os PMNs foram marcados com IP e anexina V-FITC para a quantificacao da apoptose por citometria de fluxo. Os leucocitos polimorfonucleares (PMNs) de pacientes do grupo IRC apresentaram maior taxa de apoptose enquanto os PMNs de pacientes do grupo HD apresentaram menor capacidade fagocitica. Nesses grupos encontramos correlacoes inversas entre apoptose e funcao sugerindo que a ativacao inadequada do processo de morte celular programada pode estar associada a disfuncao de PMNs observada na uremia. Em contraste, no grupo DPAC, a taxa de apoptose e a capacidade fagocitica dos PMNs nao foi diferente da do grupo controle (C). Tambem observamos que os PMNs dos pacientes do grupo DPAC apresentaram maior producao de especies reativas de oxigenio (ERO) apos estimulo com o FMLP e com o S.aureus. Em conclusao, encontramos maior apoptose de PMNs em pacientes com insufiCiência renal cronica em tratamento conservador e menor capacidade fagocitica de PMNs nos pacientes em hemodialise...(au)
Somente Metadadados
Estudo da expressao das proteinas reguladoras do ciclo celular, atraves da citometria de fluxo multiparametrica, em leucemia mieloide aguda
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2002) Sthel, Vivia Machado [UNIFESP]
Acesso aberto (Open Access)
Estudo da recuperação das subpopulações de linfócitos T, células NK e células dendríticas após transplante de células progenitoras hematopoéticas.
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2013) Goncalves, Matheus Vescovi [UNIFESP]; Rodrigues, Celso Arrais [UNIFESP]; Yamamoto,Mihoko [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/5962871490589414; http://lattes.cnpq.br/6962573800002763; http://lattes.cnpq.br/9252089988474953; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Introdução: O reestabelecimento do sistema imune apos o transplante de celulas progenitoras hematopoeticas (TCPH) e cenario complexo e heterogeneo. Neste contexto, linfocitos T, celulas NK e celulas dendriticas (DC) possuem cineticas proprias de recuperacao e variacoes nesta cinetica podem influenciar a incidencia de complicacoes pos-transplante como infeccoes, recaida e a doenca do enxerto contra o hospedeiro (DECH). Entretanto, ainda nao esta clara a relacao entre o reestabelecimento de subpopulacoes de linfocitos, celulas NK e DCs e os principais desfechos do TCPH. Objetivos: Caracterizar a cinetica de reconstituicao de DCs, celulas NK, linfocitos T e suas subpopulacoes apos o TCPH; Comparar a cinetica de reconstituicao destas populacoes entre receptores de sangue de cordao umbilical e placentario (SCUP) e receptores de TCPH de medula ossea ou de sangue periferico mobilizado (MO ou SP); Analisar o impacto da reconstituicao das subpopulacoes de linfocitos T, celulas NK e DCs nos principais resultados do TCPH. Pacientes e metodos: Linfocitos T (CD3+) e subpopulacoes (CD4+, CD8+, CD4+8+, CD4-8-), celulas NK (CD56+CD3-) e subpopulacoes (NK56++16- e NK56+16+) e DCs [linhagem negativa, HLA-DR+ e: CD123+11C- (DC plasmocitoide-pDC), CD123-11c+16- (DC mieloide-mDC), CD123-11c+16+ (DC derivada de monocitos-moDC)] foram quantificadas por citometria de fluxo multiparametrica no sangue periferico de pacientes submetidos a TCPH em momentos sequenciais: antes do condicionamento, na enxertia, 3, 7, 14 e 21 dias apos a enxertia (p3, p7, p14, p21) e 60, 100 e 180 dias apos o TCPH. Foram incluidos 111 pacientes de 4 centros (65% masculinos, idade mediana de 17 anos, variacao 1-74) recebendo MO (46%), SCUP (32%) SP (22%), a partir de doadores aparentados (18%) ou nao aparentados (82%). O diagnostico mais comum foi leucemia aguda (LMA 36%, LLA 31%). A maioria dos pacientes recebeu condicionamento mieloablativo (60%) e irradiacao corporal total (TBI) em 51% e 40% recebeu deplecao linfocitaria com timoglobulina ou alentuzumabe. A mediana de seguimento foi de 12 meses (variacao 4-35). Resultados: Pacientes que receberam SCUP apresentaram recuperacao mais lenta de todas as subpopulacoes linfocitarias em comparacao aqueles que receberam MO/SP. Receptores de SCUP apresentaram maior quantidade de NK56++16- nos dias p21 do que os receptores de MO/SP (62 celulas/mm3 vs. 27 celulas/mm3, respectivamente, p=0,05), mas com valores comparaveis de NK56+16+. Os valores de moDC nao foram diferentes entre MO/SP e SCUP, enquanto as mDC e pDC tendem a ter recuperacao mais lenta nos receptores de SCUP. A mortalidade nao relacionada a recaida foi significativamente menor em pacientes com contagens mais altas de DCs quando comparados aos com baixas contagens nas primeiras semanas (p21): pDC - 3% vs. 47%, respectivamente (p<0,001), mDC - 15% vs. 34% (p=0,04), moDC 14% vs. 45% (p=0,04) e NK56++16 - 11% vs. 34% (p=0,03). A incidencia cumulativa de DECH aguda tambem foi menor em pacientes com contagens mais altas de DCs nas primeiras semanas (p21): pDC - 24% vs. 60% (p<0,001), mDC - 27% vs. 62% (p=0,003), moDC - 30% vs. 60% (p=0,006), mas nao NK56++16-. Nenhuma das populacoes estudadas interferiu no risco de recaida ou DECH cronica. A fonte celular nao interferiu no risco de mortalidade, recaida ou DECH aguda ou cronica. Conclusoes: Pacientes que receberam SCUP apresentaram recuperacao mais lenta de todas as subpopulacoes linfocitarias e de DCs e maior quantidade de NK56++16- nas primeiras semanas do que receptores de MO/SP. Menores quantidades de pDC, mDC, moDC nas primeiras semanas apos a enxertia estao associadas com maior incidencia de mortalidade nao relacionada a recaida e DECH aguda
Acesso aberto (Open Access)
Estudo da tolerância lipopolissacarídeo (LPS) em monócitos do sangue periférico de voluntários sadios
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2008) Fernandes, Maria da Luz [UNIFESP]; Salomão, Reinaldo [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
A tolerância ao lipopolissacarídeo (LPS) ocorre quando animais e células expostas ao LPS tornam-se hiporesponsivas a uma subseqüente dose de LPS. Acredita-se que esse mecanismo esteja envolvido na diminuição da resposta celular observada em pacientes com sepse grave e choque séptico. O objetivo do estudo foi avaliar a indução da tolerância em monócitos de voluntários sadios, em sangue total, após a exposição in vitro ao LPS, medido pela detecção de citocina intracelular e espécies reativas de oxigênio (EROs). Material e métodos: As células do sangue periférico foram condicionadas com pequenas dses de LPS por 18h e desafiadas com diferentes agonistas dos Toll-like receptors (lipopeptídeo ativador de macrófagos (MALP-2), flagelina e LPS) e bactérias gram-negativa (Pseudomonas aeruginosa) e gram-positiva (Staphylococcus aureus) mortas por calor ou condicionadas com pequenas doses de MALP-2 por 18h e desafiadas com MALP-2 ou LPS. Para detecção da interleucina-6 (IL-6) intracelular, amostras de sangue total foram estimuladas por 6h. Os monócitos foram identificados pelos parâmetros de dispersão frontal e dispersão lateral e positividade para CD14. As amostras foram marcadas para a verificação da produção de IL-6 intracelular nos monócitos por citometria de fluxo. Para indução de EROs, o sangue total foi estimulado por 30 minutos com LPS, P. aeruginosa, S. aureus. A produção de espécies reativas de oxigênio foi medida por citometria de fluxo pela detecção do 2’,7’ diclorofluoresceína-diacetato. Resultados: O condicionamento com doses crescentes de LPS resultou em menor detecção de IL-6 intracelular nos monócitos após desafio com LPS. Efeito similar foi observado com MALP-2, P. aerugionosa, S. aureus, mas não com a flagelina. O condicionamento com MALP-2 e desafio com MALP-2 ou LPS não resultou em menor detecção de IL- 6 intracelular nos monócitos. O condicionamento com 15ng/mL de LPS, por outro lado, resultou numa produção de EROs preservada ou aumentada nos monócitos após o desafio com LPS, P. aeruginosa, S. aureus. Conclusão: O fenômeno da tolerância envolve uma regulação complexa, na qual a produção de citocinas pró-inflamatórias, como a IL-6, está diminuída, enquanto a produção de EROS está preservada ou até aumentada.
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Estudo de ciclo celular de linfocitos CD4+ de sangue periferico em pacientes infectados pelo virus da imunodefiCiência adquirida tipo 1
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2003) Sauer, Mariana Melillo [UNIFESP]
Uma das principais caracteristicas da infeccao pelo HIV e a progressiva reducao na contagem de linfocitos T CD4+ no sangue periferico. A apoptose destas celulas consiste em uma das possiveis explicacoes para esta queda, como apontado por varios estudos, podendo tambem repercutir em disturbios na distribuicao normal das celulas nas diferentes fases do ciclo celular. O presente estudo foi realizado com o intuito de estudar as fases do ciclo celular de linfocitos CD4+ e CD8+ e as correlacoes com contagem absoluta de linfocitos T CD4+ e carga viral do HIV-1. Inicialmente fez-se a avaliacao dos metodos de identificacao de linfocitos CD4+ e CD8+, atraves de separacao por esferas magneticas comparada a marcacao concomitante com anticorpos monoclonais CD4 e CD8. Em seguida, realizou-se o estudo das fases do ciclo celular atraves da marcacao de DNA com iodeto de propideo. Os resultados demonstraram nao haver diferencas significativas entre os metodos de separacao de linfocitos CD4+ e CD8+ por esferas magneticas e dupla marcacao com anticorpos monoclonais CD4 e CD8, embora tenha sido encontrada maior variabilidade com o uso de esferas magneticas e maior praticidade com o uso da marcacao concomitante. No estudo do ciclo celular de em linfocitos CD4+ e CD8+ foi observado, em comparacao aos controles, aumento proporcional da fase S em pacientes infectados pelo HIV-1 (2,69 por cento vs. 1,19 por cento, p-0,016), em detrimento da fase G 1 (96,11 por cento vs. 98,10 por cento, p-0,005) em linfocitos CD4+, efeito nao reproduzido em linfocitos CD8+. Nenhuma outra correlacao entre ciclo celular, contagem de linfocitos CD4+, CD8+ e carga viral foi encontrada, provavelmente porque todos os pacientes envolvidos apresentavam contagem de linfocitos T CD4+ relativamente alta, e nenhum fazia tratamento com medicacoes anri-retrovirais. Neste trabalho, portanto, foi desenvolvido novo metodo para estudo de ciclo celular de linfocitos CD4+ e CD8+, aplicado na situacao de infeccao pelo HIV. A analise da distribuicao do ciclo pode auxiliar para o melhor entendimento dos mecanismos de perda progressiva de linfocitos T CD4+ destes pacientes
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Estudo de doença residual mínima em crianças com leucemia linfóide aguda por citometria de fluxo
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2005) Delbuono, Elizabete [UNIFESP]; Petrilli, Antonio Sergio [UNIFESP]
Somente Metadadados
Estudo dos mecanismos e características estruturais que regulam a atividade antitumoral do peptídeo antimicrobiano gomesina
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Buri, Marcus Vinicius [UNIFESP]; Miranda, Antonio de [UNIFESP]
A gomesina (Gm) e um potente peptideo antimicrobiano cationico e tambem apresenta citotoxicidade contra melanomas, leucemias e tumores do sistema nervoso. Neste trabalho foram sintetizados e estudados varios analogos da gomesina, [Ser2,6,11,15]-Gm, [Thr2,6,11,15]-Gm e [D-Thr2,6,11,15]-D-Gm, que foram desenhados para testar a influencia das pontes de dissulfeto e da quiralidade na atividade citotoxica contra celulas B16F10-Nex2 (B16). Ja os analogos, [D-Thr2,6,11,15, Pro9]-D-Gm e [Thr2,6,11,15, D-Pro9]-Gm, foram empregados para se avaliar a importancia da conformacao tridimensional. Para que a citometria de fluxo e a microscopia confocal pudessem ser utilizadas como ferramentas os peptideos foram marcados com as sondas rodamina e biotina. Foi mostrado que a Gm promove uma morte celular necrotica causada por formacao de poros na membrana apos ativar mecanismos celulares bem orquestrados. Os peptideos, [Ser2,6,11,15]-Gm e [Thr2,6,11,15, D-Pro9]-Gm, mostraram baixa citotoxicidade contra as celulas B16, baixa resistencia a degradacao e apos 24 horas de tratamento, estao presentes apenas em regioes proximas a membrana. Em contraste, o uso de D-aminoacidos para a sintese do peptideo [D-Thr2,6,11,15]-D-Gm conferiu resistencia a degradacao, aumentou a potencia citotoxica, e pode-se verificar a presenca desse peptideo espalhado pelo citosol das celulas tumorais. Os peptideos [D-Thr2,6,11,15, Pro9]-D-Gm e [Thr2,6,11,15, D-Pro9]-Gm que apresentam estrutura semelhante a Gm, porem sem formacao de pontes de dissulfeto, tambem se mostraram resistentes a degradacao, porem nao estavam presentes no citosol apos 24 horas de tratamento, sendo menos potentes que a Gm, porem mais eficientes que [Thr2,6,11,15]-Gm. Em adicao, o uso de cloroquina (um inibidor de proteases lisossomais) ou MβCD (causa a diminuicao de colesterol na membrana, aumentando sua fluidez) potencializaram o efeito dos peptideos. A ligacao na membrana e a internalizacao foram medidos, mas aparentemente nao sao fundamentais para o efeito citotoxico. Concluindo, foram verificas tres caracteristicas importantes para a atividade da Gm: capacidade de penetracao na celula, resistencia a degradacao e retencao intracelular
Somente Metadadados
Estudo fenotipico e molecular do antigeno de neutrofilo humano-2(HNA-2)
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009) Moritz, Elyse [UNIFESP]
Somente Metadadados
Expressão da molécula CD25 e detecção intracelular de interferon-gama em linfócitos T de crianças e adultos saudáveis e de pacientes com imunodeficiência primária
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2006) Almeida, Liziane Cristina de [UNIFESP]; Pinto, Maria Isabel de Moraes [UNIFESP]
Somente Metadadados
Heteromorfismos Q. caracterização de uma amostra de mongolóides brasileiros e comparação com uma amostra de negróides brasileiros
(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1991) Toledo, Silvia Regina Caminada de [UNIFESP]; Andrade, Joyce Anderson Duffles [UNIFESP]

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