Navegando por Palavras-chave "Citoesqueleto de actina"

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    Acesso aberto (Open Access)
    Estudo da expressão de proteínas SNARE e do remodelamento do citoesqueleto de actina da célula beta pancreática em modelo de patogênese do diabetes tipo 2
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-10-25) Silva, Maria Eduarda Amaral [UNIFESP]; Carvalho, Carolina Prado de França [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/7515875838702169; http://lattes.cnpq.br/1279285936345264; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    O diabetes mellitus (DM) tipo 2 é uma doença de âmbito mundial responsável por grande parte da mortalidade por doenças crônicas. Alterações da expressão de proteínas relacionadas à secreção de insulina são reportadas em portadores da doença, bem como perturbações da homeostase glicêmica. A exocitose dos grânulos de insulina pela célula beta pancreática envolve a formação de um complexo de proteínas SNARE (soluble NSF attachment protein receptors) e o remodelamento do citoesqueleto de actina, através da atuação de proteínas denominadas small Rho-GTPases. O objetivo geral deste estudo foi analisar possíveis alterações na expressão de proteínas relacionadas à fusão dos grânulos de insulina e ao remodelamento dos microfilamentos de actina em ilhotas de camundongos na fase inicial do DM2 induzido por dieta hiperlipídica. Para tal, camundongos machos da linhagem C57BL/6 foram distribuídos em dois grupos: grupo DHL, alimentado com dieta hiperlipídica (HL) contendo 34% de lipídeos, ou grupo controle, alimentado com dieta padrão (CTL), contendo 4,5% de lipídeos. Nossos resultados demonstram que animais do grupo DHL apresentaram significativo aumento no ganho de peso corporal e aumento dos depósitos de gordura visceral (gonadal, mesentérica e retroperitoneal), além de hiperinsulinemia, intolerância à glicose e diminuição na eficiência metabólica. Adicionalmente, também observamos uma perturbação inicial da secreção de insulina, caracterizada pelo diminuído incremento de insulina sob estimulação com 16,7 mM glicose (em relação à condição basal), comparado com o grupo controle. Ilhotas do grupo DHL também apresentam diminuído remodelamento do citoesqueleto de actina da célula beta pancreática, frente à estimulação com concentração supraliminar de glicose (16,7 mM), visto que o grau de marcação para F-actina nessa condição (16,7 mM glicose) é maior em ilhotas do grupo DHL, comparado ao grupo controle. Paralelamente, apenas o grupo controle apresentou aumento nos níveis da proteína Cdc42 frente à estimulação com 16,7 mM glicose e em relação à respectiva condição basal (CTL 2,8 mM glicose). Ilhotas de animais do grupo DHL também apresentam tendência de diminuição da Sintaxina-4, em comparação com ilhotas de animais do grupo controle. Os resultados obtidos nos permitem concluir que o grupo DHL apresenta perturbações iniciais na secreção de insulina, possivelmente associadas ao prejuízo da dinâmica do remodelamento dos filamentos de actina da célula beta-pancreáticas frente a condição estimulatória com glicose (16,7 mM). Esse comprometimento pode ser atribuído à ausência de um aumento significativo dos níveis de Cdc 42 para esse grupo sob essa condição (16,7 mM glicose), em relação à respectiva condição basal (DHL 2,8 mM glicose), ou ainda, devido a possíveis perturbações na ativação dessa proteína frente a condições supraliminares de glicose, e que, particularmente, será alvo de futuras investigações de nosso grupo de pesquisa.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Participação das proteínas ezrina, radixina e moesina (ERM proteins) na invasão celular por amastigotas extracelulares de Trypanosoma cruzi
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2016-11-30) Ferreira, Éden Ramalho de Araujo [UNIFESP]; Mortara, Renato Arruda [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/3754467086294573; http://lattes.cnpq.br/0533784588961610; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    The protozoan parasite Trypanosoma cruzi is the causative agent of Chagas? disease that affects 6-7 million people worldwide, mostly in the South and Central America. Chagas? disease was responsible for 76% of all deaths caused by Neglected Tropical Diseases in Brazil from 2000 to 2011. In mammalian hosts T. cruzi alternates from extracellular (infective) trypomastigote forms and intracellular (replicative) amastigote forms. Additionally, trypomastigotes can differentiate into amastigotes in the extracellular environment generating infective extracellular amastigotes (EAs). Host cell invasion by these forms is mediated by complex cellular signaling events regulating actin filaments, the main component in EA uptake. ERM proteins (ezrin, radixin and moesin) are key elements linking actin filaments to the plasma membrane, important for the maintenance of cell morphology, cell migration and invasion of intracellular pathogens. The aim of this study was to evaluate the role of ERM proteins in actin cytoskeleton-plasma membrane interplay during host cell invasion by EAs. Our results revealed that depletion of host ezrin and radixin but not moesin inhibited EAs invasion in HeLa cells. Confocal microscopy of HeLa cells transfected with ERM proteins?GFP or -HA revealed recruitment of ERM proteins to EAs invasion sites colocalizing with F-actin. Additionally, invasion assays performed with cells overexpressing ERM proteins revealed increased EAs invasion in ezrin and radixin but not moesin overexpressing cells. Finally, time-lapse live imaging confocal microscopy has shown reduced and delayed actin dynamics in ezrin and radixin depleted HeLa cells when compared to control or moesin groups. Altogether, these findings show distinct roles of ERM proteins in actin filament dynamics and plasma membrane interplay during EAs host cell invasion.