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    Avaliacao do comportamento epidemiologico e das praticas terapeuticas nos episodios de candidemia registrados em dois hospitais universitarios no periodo de 1994 a 1998
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1999) Pais, Luisa Patricia Fogarolli [UNIFESP]
    O conhecimento das caracteristicas epidemiologicas e de fatores prognosticos de candidemias sao variaveis importantes na definicao de estrategias de controle, prevencao e terapeutica destas infeccoes. O presente estudo tem por objetivo caracterizar a evolucao de dados epidemiologicos e de praticas terapeuticas em episodios de candidemia documentados em dois hospitais universitarios em um periodo de quatro anos. As informacoes clinicas e epidemiologicas foram obtidas atraves da revisao de prontuarios e preenchimento de ficha clinica padrao para todos os pacientes com candidemia atendidos nestes hospitais em dois periodos: junhol94 a junhol96 e julhol96 a junhol98. Foram analisados 185 episodios de candidemia, sendo 80 no periodo l e 105 no periodo 2. A comparacao entre os dois periodos nao mostrou diferencas importantes com relacao a prevalencia de sexo, idade, unidade de internacao, doencas de base e fatores de risco. Verificou-se, entretanto, aumento de cirurgias gastrointestinais e prematuridade entre os pacientes que desenvolveram candidemia. Houve predominio de especies nao-albicans (64 por cento) em ambos os periodos, sendo C. tropicalis e C. parapsilosis as especies mais prevalentes dentre as nao albicans. C. glabrata e C. krusei continuam infrequentes em nosso meio. Em ambos os periodos, 59 por cento dos pacientes recebeu terapia antifungica, e apenas 47 por cento tiveram o cateter venoso central removido apos o diagnostico. A mortalidade foi maior em pacientes que nao receberam terapeutica antifungica (p=O,OO6; RR O,57) e nos que nao tiveram o cateter venoso central removido (p=o,ooo2; RR O,43). A sobrevida foi significantemente maior (65 por cento, p=O,O4) nos pacientes com candidemia por C parapsilosis. E necessario a implementacao de programas de vigilancia e controle sobre grupos de pacientes com registro progressivo de casos de candidemia, a exemplo de prematuros e pacientes em pos-operatorio, bem como a realizacao de atividades de educacao continuada no sentido de aprimorar a abordagem terapeutica de pacientes com candidemia
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    Avaliação do perfil de susceptibilidade a antifúngicos de 1.000 amostras de Candida spp relacionadas a fungemias
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2004) Matta, Daniel Archimedes da [UNIFESP]; Colombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]
    Introdução: Dentre as infecções causadas por fungos do gênero Candida, a infecção de corrente sangüínea (ICS) destaca-se não apenas por sua alta prevalência e diferentes centros médicos, como também por suas complicações, correlacionando-se a mortalidade da ordem de 50 por cento. Objetivos:1) Avaliar a distribuição de espécies c Candida associadas a episódios de fungemia documentados em hospitais terciários. Descrever o perfil de susceptibilidade a antifúngicos de diferentes espécies de Candida obtidas de amostras clínicas de infecções hospitalares. Material e métodos: Fora avaliadas todas as amostras clínicas de Candida spp. isoladas a partir de sangue c pacientes internados em 4 hospitais terciários da cidade de São Paulo, entre janeiro 1995 e dezembro de 2003. Após triagem inicial de Candida albicans, utilizando-se me cromogênico CHROMagar-Candida, as amostras de Candida não-albicans fora identificadas por análise do perfil bioquímico pelo método comercial manual ID 32 complementadas por análise de microcultivo. A avaliação da susceptibilidade d isolados em estudo aos agentes antifúngicos foi realizada pelo método da microdiluição em caldo, de acordo com as normas de padronização publicadas no documento M2 A2, do National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS, 2002). Os antifúngicos utilizados foram: anfotericina B, 5-fluorocitosina, fluconazol, itraconazol voriconazol. Foi feita uma análise comparativa sobre o perfil microbiológico de cepas de Candida spp. isoladas em 2 períodos: janeiro de 1995 a dezembro de e janeiro 2000 a dezembro de 2000. Resultados: Analisou-se um total de 1000 leveduras, incluindo 400 isolados de C. albicans (40 por cento), 243 de C. tropicalis (24,3 por cento), 238 de C. parapsilosis (23,8 por cento), 44 de C. glabrata (4,4 por cento), 30 de C. guillliermondii (3 por cento), 25 de rugosa (2,5 por cento), 6 de C. krusei e C. pelicullosa (0,6 por cento), 5 de C. lusitaniae (0,5 por cento), e isolado para cada umas das espécies de C. famata, C. lipolytica e C. zeylanoides (1 por cento). Na análise do perfil de susceptibilidade a antifúngicos, as variações das concentrações inibitórias mínimas (CIMs) para 1000 leveduras estudadas foi de 0,06g/ml a 1,0 g/ml para anfotericina B, 0,125g/ml a  64,Og/ml para fluconazol e 5-fluorocitosi 0,03g/ml a 8g/ml para itraconazol e 0,03g/ml a 4,0g/ml para voriconazol. Observou-se amplo espectro de valores de CIM para todos os antifúngicos, exceto para anfotericina B, onde os valores de CIM ficaram entre 5 diluições. Nenhuma amostra apresentou valores de CIM superiores a 1,Og/ml frente a anfotericina B. Apenas 1, das 1000 leveduras testadas tiveram susceptibilidade dose dependente (SDD) e 0,2 por cento delas foram resistentes (R) a fluconazol. Para itraconazol, 5,8 por cento dos isolados for SDD e 1 por cento resistentes a este antifúngico. Para 5-fluorocitosina, 0,9 por cento apresentar resistência intermediária e 2,5 por cento foram resistentes. Aproximadamente 97 por cento amostras tiveram CIM  0,125g/ml para voriconazol. Houve diminuição da atividade de voriconazol frente aos isolados resistentes in vitro a fluconazol e itraconazol. Conclusão: 1) Entre as 1000 amostras avaliadas, C. albicans foi a espécie isolada maior freqüência no estudo. 2) Entre espécies de Candida não-albicans, houve predomínio de C.tropicalis e C. parapsilosis. Vale mencionar um discreto aumento prevalência de C. parapsilosis do primeiro para o segundo período avaliado (19 por cento versus 25 por cento). 3) Resistência a fluconazol de forma geral foi pouco freqüente entre amostras estudadas. Entretanto, houve aumento de 0,7 por cento para 2,7 por cento entre os dois períodos avaliados. As espécies problemas em relação a este antifúngico foram glabrata e C. rugosa. 4) A maior ocorrência de CIMs > 1,0g/ml para voriconazol entre cepas SDD/R para fluconazol e/ou itraconazol, quando comparada a cepas sensíveis a ambos triazólicos, sugerindo que há resistência cruzada in vitro e azólicos nas amostras mencionadas.
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    Avaliação dos aspectos clínicos e epidemiológicos e do tempo de positividade na evolução clínica das infecções da corrente sanguínea por Candida spp
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Nunes, Cintia Zoya [UNIFESP]; Pereira, Carlos Alberto Pires [UNIFESP]
    Objetivo: Avaliar os aspectos clinicos e epidemiologicos das infeccoes da corrente sanguinea por Candida spp, identificar os fatores de risco relacionados ao obito e avaliar o tempo de positividade das candidemia e sua relacao com o obito. Metodos: Estudo de coorte retrospectivo em hospital univesitario com candidemias entre janeiro de 2002 a julho de 2009. Tambem foi realizado um estudo caso-controle oaninhadoo para a analise dos fatores de risco associados ao obito e ao tempo de positividade das hemoculturas. Resultados: Analisados 171 episodios de candidemia. A letalidade ate o trigesimo dia foi de 67,8% e a global de 77,8%. A media de idade foi de 58,6 anos e mediana de 62 anos. O tempo medio de internacao ate o aparecimento da infeccao foi de 23,2 dias. As fontes mais frequentes foram: primaria (36,8%), gastrointestinal (28,0%) e relacionada ao cateter venoso central (15,8%). A Candida albicans (52,0%) foi a especie mais prevalente, seguida pela Candida parapsilosis (21,1%) e Candida tropicalis (17,5%). O tempo medio de positividade foi de 39,6 horas, 76,6% receberam tratamento antifungico e apenas 17% nas primeiras 24 horas da infeccao. A analise univariada identificou as especies nao albicans, a hemotransfusao e a fonte relacionada ao CVC como associadas a um tempo menor de positivacao da hemocultura e a fonte gastrointestinal a um tempo maior. Apenas a fonte relacionada ao cateter nao se confirmou na analise multivariada. Em relacao a evolucao para obito, foram identificados os seguintes fatores: Candida albicans, imunossupressor, hemodialise, fonte respiratoria, idade > 60 anos, Charlson ≥ 3, doenca rapidamente fatal, internacao na UTI, APACHE II ≥ 20, falencia de orgaos e elevados escores no SAPS II e no SOFA. Observou-se, ainda, menor mortalidade associada as Candida parapsilosis e Candida guilliermondii. Na analise multivariada apenas o APACHE II ≥ 20 (OR = 11,84; p < 0,001) foi associado ao obito. Na analise dos 89 episodios de candidemia por Candida albicans, a analise univariada identificou como fatores associados a um tempo de positividade ≤ 36h: hemotransfusao, neoplasia, fonte associada ao cateter venoso central e terapia antifungica adequada, enquanto que a fonte gastrointestinal foi associada a um tempo de positividade maior. Nenhuma dessas variaveis se confirmou na analise multivariada. Em relacao ao obito, os fatores de risco encontrados foram: falencia de pelo menos um orgao, APACHE II ≥ 20, escores elevados no SAPS II e no SOFA e o maior tempo de positividade da hemocultura, unica variavel independente relacionada ao obito ate o trigesimo dia apos a candidemia (OR= 1,041 por hora). Conclusoes: As candidemias acometem pacientes criticos e apresentam elevada letalidade. O indice APACHE II e o melhor escore para se avaliar mortalidade. O tempo de positividade esta associado ao microorganismo, a fonte da infeccao e fatores de risco. A maioria nao recebeu terapia adequada precoce. O tempo de positividade da hemocultura e longo e muito variavel mesmo entre as especies e um maior tempo de positividade foi pela primeira vez associado a uma maior letalidade para Candida albicans, portanto, a decisao de iniciar o tratamento empirico com antifungico nao pode aguardar esse resultado
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    Acesso aberto (Open Access)
    Avaliação epidemiológica, clínica e microbiológica das infecções da corrente sangüínea por Candida spp. na população idosa
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2008-10-29) Guimarães, Thaís [UNIFESP]; Colombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Hematogenous candidiasis is a serious infection that is highly prevalent in medical centers worldwide. In order to better understand the epidemiology and optimize strategies to control bloodstream infections caused by Candida spp., this infection has been studied in specific populations, such as patients at intensive care units, hematologic and neonates. Few information is available about the epidemiology of these infections in elderly patients. Due to the increase of human life expectancy, high incidence of candidemia in elderly patients and the limited number of studies available in the literature, this study aimed to analyze the epidemiological, clinical and microbiological features in elderly patients, compared to young adult population, in terms of Candida species distribution, resistance to antifungal agents, mortality rate and prognostic factors. We analyzed a database included data from three cohort cross-sectional studies collected prospectively in order to determine the epidemiological, clinical and microbiological characteristics of episodes of candidemia documented in 14 hospitals during the period of June 1994 to December 2004. The clinical and epidemiological information were obtained by reviewing medical records and were recorded in standard case report form. Candidemia was defined as at least one positive blood culture for Candida spp., after proper antisepsis, being only the first episode of candidemia considered for characterization of clinical cases. Individuals were categorized as young adults when aged between 14 and 59 years and older persons when aged ≥ 60 years. All pediatric patients (age <14 years) were excluded from the analysis. The characterization of microbial strains was performed in a single laboratory (LEMI-UNIFESP) by conventional methods. Antifungal susceptibility tests were performed using the broth micro dilution assay according to the methodology by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). All data were stored in database and statistical analysis was performed by SPSS version 15.0 and EPI-INFO version 6.0. We analyzed a total of 1.037 cases and the prevalence of elderly in the population studied was 45.2% (469/1037) and 59.3% were male. The candidemia in the elderly occurs more frequently in severe patients, hospitalized at intensive care units, in patients with cancer, diabetes mellitus, cardiac and lung diseases and in patients submitted to central venous catheterization and abdominal surgeries. C. albicans was responsible for most cases of candidemia in the elderly and C. tropicalis was the non-albicans species significantly more prevalent in this age group. There was no difference between the distribution of azole resistance in the age groups evaluated and this occurrence demonstrated to remain stable along the study period. However, cross-resistance was observed. The mortality rate of elderly population was greater than that observed with young adults (69.7% vs. 44.5%, p <0.001) regardless of initial antifungal therapy and the isolated species. The prognostic factors independently associated with death in the elderly population were APACHE II score > 20, presence of heart disease, pulmonary disease, dialysis, abdominal surgery and use of corticosteroids. Elderly patients account for substantial casuistic of candidemia in tertiary hospitals, presenting peculiar features of natural history and high mortality rate. Therefore, is essential to consider more aggressive approach in prophylaxis and antifungal therapy for this population.
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    Avaliacao epidemiologica, clinica e microbiologica das infeccoes de corrente sanguinea por candida spp em pacientes hemodialiticos cronicos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Ourives, Ana Paula Jafet [UNIFESP]
    A insufiCiência renal cronica (IRC) e hemodialise sao consideradas fatores de risco importantes para candidemia, entretanto pouco se conhece sobre as principais condicoes de risco para essa infeccao nesta populacao. O objetivo do nosso estudo foi avaliar a incidencia de infeccao de corrente sanguinea (ICS) por Candida spp. em pacientes sob Terapia Renal Substitutiva (TRS) na modalidade de hemodialise, em duas unidades do Hospital do Rim e Hipertensao, ao longo de 2005 a 2009, bem como analisar as caracteristicas epidemiologicas, microbiologicas e a evolucao clinica desses pacientes. Para isso, foi realizado um estudo transversal, retrospectivo, nas quais variaveis clinicas e epidemiologicas dos pacientes foram avaliadas. Todas as hemoculturas positivas para Candida foram encaminhadas ao LEMI para identificacao da especie, atraves do sistema bioquimico ID32C e sequenciamento molecular da regiao ITS do rDNA. As cepas recuperadas tiveram seu perfil de susceptibilidade avaliado a antifungicos pelo metodo de microdiluicao em caldo (M27-A3). A incidencia de ICS por Candida spp. nos pacientes em TRS sofreu variacao de 0,08 a 0,35 casos/1.000 sessoes de hemodialise, com um aumento da taxa de incidencia em 2006. Realizamos a analise de 29 pacientes, totalizando 31 episodios de candidemia, nos quais foram divididos em 2 grupos distintos: i) hospitalar, constituido por 13 pacientes e ii) comunitario, constituido por 16 pacientes. Hipertensao Arterial Sistemica e Diabete Melito foram as principais condicoes de base para o desenvolvimento de IRC, acometendo 48,3% (n=14) e 20,7% (n=6) dos pacientes, respectivamente. Treze (44,8%) dos 29 pacientes apresentavam transplante renal previo ao evento de fungemia. A presenca de cateter venoso central (CVC) foi observada em 25 pacientes (86,2%), sendo o cateter de longa permanencia para hemodialise (52%, n=13) o mais utilizado. Do total de 29 pacientes, seis (20,7%) evoluiram para candidiase com envolvimento de visceras e 2 para candidemia recorrente. O uso de antibioticoterapia de amplo espectro foi utilizado em 69% dos casos (n=20), assim como o uso de corticoterapia (58,6%, n=17). As especies de Candida isoladas durante o 1° episodio de candidemia foram C. parapsilosis sensu lato (72,4%), C. albicans (13,8%), C. tropicalis (3,45%), C. krusei (3,45%) e C. glabrata (3,45%). De acordo com a identificacao molecular dos isolados recuperados, 19 isolados foram identificados como C. orthopsilosis, 7 C. parapsilosis sensu stricto, 1 C. albicans e 1 C. glabrata. A sobrevivencia geral dos pacientes foi de 72,4% em 30 dias. Quando comparados os 2 grupos, os pacientes incluidos no grupo hospitalar faziam maior uso de imunossupressores pos-transplante que aqueles incluidos no comunitario. O uso do cateter de longa permanencia foi muito elevado nos pacientes do grupo comunitario em relacao aos do grupo hospitalar (n=11, 68,8%, vs n=2, 15,4%, respectivamente, P=0,003). De forma geral, foi observada uma maior prevalencia de especies pertencentes ao Complexo C. parapsilosis (72,4%) em ambos os grupos. Em contrapartida, C. albicans, C. tropicalis, C. krusei e C. glabrata somente foram isoladas no grupo hospitalar. O grupo comunitario apresentou sobrevivencia maior em todos os periodos avaliados. Todas as cepas avaliadas neste estudo foram susceptiveis aos antifungicos testados, excecao de 1 amostra de C. glabrata que foi resistente a caspofungina. Concluimos que em 2006 houve aumento dos casos de candidemia nos pacientes em TRS na modalidade de hemodialise, configurando possivel surto. Isto pode ter ocorrido devido a maior parte dos pacientes realizar hemodialise via CVC, o que demonstra ser um dos principais fatores de risco para a aquisicao de candidemia por especies pertencentes ao Complexo C. parapsilosis. Alem disso, documentamos outras condicoes de risco como transplante previo recente, uso de corticoterapia e imunossupressores
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    Avaliacao fenotipica e genotipica de isolados de Candida albicans e Candida dubliniensis armazenados em banco de microorganismos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2001) Sant'ana, Priscilla de Laet [UNIFESP]
    Objetivos: Avaliar a presenca de Candida dubliniensis entre leveduras previamente identificadas como C. albicans estocadas no banco de microorganismos do Laboratotio Especial de Micologia - UNIFESP. Metodos: Amostras estocadas entre 1994 e 2000, exibindo colonias verdes em meio CHROMagar Candida foram incluidas na triagem para C. dubliniensis atraves de teste de crescimento em 42ºC. Isolados com pouco ou nenhum crescimento foram analisados por RAPD, com 3 primers para confirmar a identificacao. Caracterizacao fenotipica atraves do sistema ID32C e genotipagem por PFGE foram realizadas. 0 sistema Candida Check (latron) foi empregado para determinacao dos sorotipos dos isolados. 0 perfil de susceptibilidade a antifungicos foi obtido atraves do metodo de microdiluicao em caldo (NCCLS). Resultados: Apos testarmos 548 isolados em prova de temperatura, 46 amostras que apresentaram pouco ou nenhum crescimento em 42ºC foram analisadas por RAPD. Onze isolados foram identificados como C. dubliniensis e avaliados por cariotipagem em PFGE, gerando 9 diferentes padroes para 11 isolados testados. Todas as amostras de C. dubliniensis pertenceram ao sorotipo A e foram sensiveis aos azolicos e a anfotericina B. A maioria dos isolados de C. albicans (82 por cento) pertenceram ao sorotipo A e apenas 17 (3 por cento) foram SDD ou resistentes a um ou mais azoticos. Conclusoes: A incidencia de C. dubliniensis encontrada foi baixa (2 por cento), obtida principalmente de cavidade oral de pacientes com AIDS. Isolados de C. dubliniensis apresentaram alta diversidade de genotipos sendo todos sensiveis a anfotericina B e azoticos. C. aibicans sorotipo A, sensivel a todos os antifungicos testados, foi o principal fenotipo encontrado entre nossas amostras estocadas
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    Acesso aberto (Open Access)
    Brazilian flora extracts as source of novel antileishmanial and antifungal compounds
    (Instituto Oswaldo Cruz, Ministério da Saúde, 2008-08-01) Tempone, André Gustavo; Sartorelli, Patricia [UNIFESP]; Teixeira, Denise; Prado, Frederico O; Calixto, Ivete Arl; Lorenzi, Harri; Melhem, Márcia Sc; Instituto Adolfo Lutz Serviço de Parasitologia Laboratório de Toxinologia Aplicada; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); Instituto Plantarum de Estudos da Flora
    Natural products have long been providing important drug leads for infectious diseases. Leishmaniasis is a protozoan parasitic disease found mainly in developing countries, and it has toxic therapies with few alternatives. Fungal infections have been the main cause of death in immunocompromised patients and new drugs are urgently needed. In this work, a total of 16 plant species belonging to 11 families, selected on an ethnopharmacological basis, were analyzed in vitro against Leishmania (L.) chagasi, Leishmania (L.) amazonensis, Candida krusei, and C. parapsilosis. Of these plant species, seven showed antifungal activity against C. krusei, five showed antileishmanial activity against L. chagasi and four against L. amazonensis, among them species of genus Plectranthus. Our findings confirm the traditional therapeutic use of these plants in the treatment of infectious and inflammatory disorders and also offer insights into the isolation of active and novel drug prototypes, especially those used against neglected diseases as Leishmaniasis.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Candidúria: uma abordagem clínica e terapêutica
    (Sociedade Brasileira de Medicina Tropical - SBMT, 2007-06-01) Colombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]; Guimarães, Thaís [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); Hospital do Servidor Público Estadual de São Paulo
    Candiduria remains a controversial issue for clinicians once that it may represent a broad variety of possibilities including colonization, local or systemic infection. We will discuss the epidemiology, diagnosis and treatment of candiduria in different settings of patients, including renal transplant recipients. Definitions on therapy are mostly based on epidemiological and clinical data. Once antifungal therapy is required the following antifungal treatment may be used: intravenous amphotericin B, bladder irrigation with amphotericin B or fluconazole. Blood cultures may be required in patients with candiduria and high risk for developing hematogenous infection. Removal of the urinary catheter must be considered in order to avoid persistent candiduria and recurrence.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Caracterização clínica e epidemiológica das infecções de corrente sanguínea causadas por Candida spp. no Hospital São Paulo
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2010-10-27) Wille, Marcos Paulo [UNIFESP]; Colombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Among the invasive infections caused by the genus Candida, it is worthwhile to emphasize the clinical relevance of bloodstream infections (BSIs), namely hematogenous candidiasis or candidemia. The hematogenous candidíases is a severe infection which has a high prevalence in medical centers worldwide. The aim of this study is to analyze the evolution of incidence rates of candidemia during the period of 11 years and to evaluate the possible changes in the epidemiological profile of patients with candidemia admitted at the São Paulo Hospital along the 2 periods: 1994-1999 versus 2000-2004. This is a retrospective study developed from a transversal cohort, with data collected prospectively for determination of epidemiological and microbiological features from episodes of candidemia in patients admitted at the São Paulo Hospital during the period of June 1994 to December 2004. The clinical and epidemiological informations by reviewing medical records and were recorded in standard case report form. Candidemia was defined as at least one positive blood culture for Candida sp. after proper antisepsis, being only the first episode of candidemia considered for characterization of clinical cases. The characterization of microbial strains was performed in a single laboratory (LEMI – UNIFESP) by conventional methods. Antifungal susceptibility tests were performed using the broth micro dilution assay according to the methodology by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). All data were stored in database and statistical analysis was performed by SPSS version 15.0 and EPI-INFO version 6.0. We analyzed a total of 388 episodes of BSIs caused by Candida spp, and the prevalence of infection was mainly observed in young adults population (> 14 years-old), which accounted for 61.1% (237/388) from all cases, and 60.3% (234) were male. Candida non-albicans species corresponded to 57.6% (223/388) of the casuistic, being C. tropicalis and isolates of the C. parapsilosis complex the most prevalent species observed along the period studied. In the second study period candidemia was more frequently observed in the elderly population, heart disease, lung disease, liver disease and kidney failure. On the other hand, there was a higher prevalence of neurologic disease and non-fungal infectious syndrome in the second study period. At this time, the major occurrence of degenerative diseases in the individuals indicates more prevalence of these diseases in the elderly. We observed a substantial number of patients about 30% which did not have opportunity to treat with antifungal drugs. The overall mortality documented was 55.4%, with no changes along the period studied. We could demonstrate during the 11 years that there were no significant changes in the incidence of candidemia at the São Paulo Hospital, neither in the pattern of Candida species distribution. In the contrast, we observed a clear tendency of high prevalence of candidemia in young adults and in the elderly populations along the second period, with more records of this infectious disease in individuals with more comorbities.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Caracterização clinica e microbiológica de episódios de candidemia por C. parapsilosis
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2005) Silva, Ligia Raquel Brito Francisco da [UNIFESP]; Colombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Realizou-se estudo coorte prospectivo em 4 hospitais de São Paulo no período de março de 2002 a fevereiro de 2003. Incluiu-se todos os pacientes que apresentaram hemocultura positiva para C. albicans ou C. parapsilosis. As leveduras foram identificadas ao nível de espécie por sistema comercial e submetidas a testes de susceptibilidade através de microdiluição em caldo (NCCLS). Informações clínicas e epidemiológicas foram colhidas através de ficha clínica padrão e armazenadas em banco de dados (EPI-INFO). Fatores de risco para ocorrência de infecção por C. parapsilosis foram definidos por análise univariada e multivariada. Foram documentados 282 episódios de candidemia, sendo 107 por C. albicans (54,2% homens, mediana 50 anos) e 64 por C. parapsilosis (59,4% homens, mediana 27,5 anos). Neutropenia, quimioterapia e CVC de longa permanência (p=0,01) foram condições de risco para fungemia por C. parapsilosis em análise univariada. Na análise multivariada identificou-se a presença de CVC longa permanência (p=0,01) como fator de risco para esta infecção. A mortalidade foi maior em pacientes com fungemia por C. albicans (61,7% versus 45,3%, p=0,03). Todos os isolados testados foram sensíveis a azólicos e 5-fluorocitosina, com apenas um isolado de C. parapsilosis resistente a anfotericina B.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Caracterização da diversidade genotípica de cepas de Candida parapsilosis isoladas de hemoculturas
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2007) Amorim, Cledja Soares de [UNIFESP]; Colombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Introdução: A heterogeneidade genética de Candida parapsilosis tem sido reportada com emprego de distintos métodos moleculares, identificando claramente três grupos (grupos I, II e III). Recentemente, a análise filogenética baseada no polimorfismo de alguns genes propôs uma reclassificação de C. parapsilosis grupo II e III em espécies distintas: Candida orthopsilosis e Candida metapsilosis, respectivamente. Ainda há poucos estudos epidemiológicos avaliando a prevalência e relevância clínica dessas espécies. Métodos moleculares têm sido empregados para discriminar esses três grupos e também para tipagem intra-específica dessas novas espécies. Entretanto, isolados de C. parapsilosis não têm demonstrado grande diversidade genotípica por estes métodos. É necessário o desenvolvimento de técnicas moleculares de baixo custo para viabilizar a identificação dessas espécies em laboratório de rotina. Objetivos: 1) selecionar oligonucleotídeos para utilização em RAPD que apresentem poder discriminatório para identificação de C. parapsilosis, C. orthopsilosis e C. metapsilosis. 2) avaliar a prevalência dessas três espécies em amostras de hemoculturas coletadas em hospitais da América Latina. 3) analisar a diversidade genotípica entre isolados de C. parapsilosis oriundos de diferentes áreas geográficas. Material e métodos: Para este estudo, foram selecionadas todas as amostras de hemoculturas identificadas fenotipicamente como C. parapsilosis, catalogadas no Banco de Microrganismos do Laboratório Especial de Micologia da UNIFESP, que foram coletadas durante o período de 2003 a 2005, incluindo as cepas de referência destas três espécies. Após identificação fenotípica, através do sistema de ID32C e microcultivo, as colônias sugestivas de C. parapsilosis foram submetidas ao método RAPD para identificação de espécie. Para interpretação dos resultados, os perfis genotípicos gerados pelo RAPD foram submetidos à análise por dendrograma utilizando o programa GEL COMPAR II versão 4.5. Todas as amostras identificadas como C. orthopsilosis e C. metapsilosis neste estudo foram submetidas ao seqüenciamento da região ITS para confirmação da identificação de espécie. Resultados: Inicialmente, foram estudados 7 oligonucleotídeos para serem utilizados em RAPD que tivessem reprodutibilidade e poder discriminatório em amostras de origem epidemiologicamente conhecida. Desses, o iniciador 1281 apresentou melhor performance, portanto foi o escolhido para realização neste estudo. Do total das 166 amostras estudadas, 148 (89%) eram C. parapsilosis, 13 (8%) C. orthopsilosis e 5 (3%) foram identificadas como C. metapsilosis. A análise por dendrograma revelou que as cepas de C. orthopsilosis apresentaram maior heterogeneidade genotípica entre si. Cepas de C. parapsilosis foram geneticamente mais semelhantes entre si (Sab 80%) e formaram 6 subgrupos com uma similaridade superior a 90%. Estes subgrupos eram constituídos, em sua maioria, por cepas de mesma localidade geográfica demonstrando serem mais relacionadas entre si. As análises dos isolados oriundos do estado e da cidade de São Paulo demonstraram uma maior consistência do método, mostrando maior similaridade genética entre cepas de cidades vizinhas e de mesmo centro médico, revelando disseminação de cepas de mesma origem clonal que sofreram microevoluções nestes centros médicos. Conclusões: O RAPD, com o emprego do iniciador 1281 demonstrou ser uma ferramenta de grande utilidade na identificação das espécies do complexo C. parapsilosis. C. parapsilosis foi a espécie de maior prevalência entre as amostras de hemocultura estudadas, seguida de C. orthopsilosis e C. metapsilosis. Quanto à análise genotípica intra-específica, C. orthopsilosis foi a espécie mais heterogênea do grupo. C. parapsilosis foi a espécie mais homogênea geneticamente, provavelmente devido à sua maior adaptação ao homem. Cepas dessa espécie podem tornar-se persistentes em cada cidade ou por centros médicos.
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    Caracterização de colonização e fungemias por espécies de Candida em pacientes internados em unidades de terapia intensiva
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2004) Rosas, Robert Fabian Crespo [UNIFESP]; Colombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]
    Introdução: Pacientes internados em unidades de terapia intensiva (UTI) constituem população de risco para a ocorrência de candidemia. O objetivo deste estudo foi avaliar a dinâmica de colonização e infecção por Candida spp. Em pacientes de UTI. Casuística e métodos: Durante um período de 18 meses, realizou-se estudo de coorte prospectivo longitudinal incluindo pacientes de ambos os sexos, com idade igual ou superior a 12 anos, internados por diferentes patologias clínicas e/ou cirúrgicas na UTI por 72 horas ou mais. Todos os pacientes incluídos foram avaliados até a alta ou óbito. A colonização foi avaliada no momento da admissão e posteriormente duas vezes por semana, com coletas sistematicamente realizadas nos seguintes sítios: região anal, urina, secreção traqueal, ferida cirúrgica e pele ao redor do ponto de inserção do cateter venoso central. Pacientes com febre colheram duas amostras de hemocultura no sistema de lise-centrifugação (Isolator®). Foram obtidos dados demográficos, procedimentos médicos invasivos, uso de antibióticos e dados clínicos dos pacientes incluídos. Avaliou-se através de análise multivariada os fatores de risco para colonização e infecção da corrente sangüínea por Candida spp.. Os microrganismos isolados foram identificados por metodologia convencional. O banco de dados foi analisado no software estatístico SPSS, versão 10.0. Resultados: Avaliou-se um total de 349 pacientes, com mediana de tempo de internação de 12 dias, 60 por cento do sexo masculino, mediana de idade de 52 anos e APACHE II escore de 22 pontos. Colonização por espécies de Candida foi observada em 72,5 por cento da população estudada e os sítios mais colonizados foram: trato gastrointestinal (39,6 por cento), trato urinário (33,8 por cento) e trato respiratório (15,5 por cento). As espécies mais freqüentemente isoladas foram: C. albicans (50 por cento) e entre as não-albicans observamos a seguinte distribuição: C. rugosa (41 por cento), C. glabrata (29 por cento), C. tropicalis (12 por cento), C. parapsilosis (11,2 por cento),…(au).
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    Caracterização fenotípica dos diferentes genótipos de Candida parapsilosis isolados de hemocultura
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2007) Goncalves, Sarah Santos [UNIFESP]; Colombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Introdução: Isolados de C. parapsilosis sao fisiologicamente indistinguiveis, mas geneticamente heterogeneos. Em estudo recente, baseado em variacoes da sequencia de ONA observada entre os grupos, Tavanti et al. (2005) propuseram que cada um desses grupos fossem considerados especies distintas, C. parapsilosis, C. orthopsilosis e C. metapsilosis, respectivamente. Objetivos: 1) Avaliar, atraves da tecnica de RAPO, a prevalencia dessas especies em isolados de ICS de varias regioes do Brasil; 2) Verificar o comportamento fenotipico dessas especies, a fim de averiguar possiveis diferencas em relacao ao perfil metabolico, sensibilidade a antifungico e producao de biofilme. Material e Metodos: 141 cepas, identificadas previamente atraves de testes fenotipicos como C. parapsilosis, foram analisadas utilizando a tecnica de RAPO para identificacao de C. parapsilosis, C. orthopsilosis e C. metapsilosis utilizando o iniciador 1281. As cepas identificadas como C. orthopsilosis e C. metapsilosis tiveram a regiao ITS do rDNA sequenciada para confirmacao da identidade. Posteriormente, as amostras encontradas como C. orthopsilosis, C. metapsilosis e 24 cepas de C. parapsilosis foram avaliadas em relacao aos seguintes testes fenotipicos: i) micromorfologia, ii) crescimento em caldo hipertonico, iii) tolerancia a temperatura de 42° C, iv) perfil bioquimico utilizando o sistema 1032 C, v) teste de susceptibilidade a antifungicos (TSA) pelo metodo de microdiluicao em caldo, utilizando anfotericina B, fluconazol, itraconazol, voriconazol, 5-fluorocitosina e caspofungina, vi) producao e quantificacao de biofilme pelo metodo de coloracao com cristal violeta. Resultados: 124 (87,9 por cento) isolados foram identificados como C. parapsilosis, 13 (9,2 por cento) isolados como C. orthopsilosis e 4 (2,9 por cento) como C. metapsilosis. Nao foi possivel a identificacao de apenas 3 isolados pela tecnica de RAPO, porem sua identificacao foi confirmada como C. orthopsilosis atraves de sequenciamento da regiao ITS do rDNA. O comportamento dos isolados das 3 especies foi semelhante em relacao ao crescimento em alta temperatura e alta concentracao salina. Nao houve diferencas micromorfologicas relevantes entre as especies. Atraves do sistema de 1032 C, foi possivel observar que somente 3 isolados de C. metapsilosis (60 por cento), foram tolerantes a actidiona e 1 (20 por cento) assimilou o acucar ribose. Quanto ao TSA, a ocorrencia de resistencia entre os isolados foi vista somente para 2 cepas frente a 5-fluorocitosina. Em relacao ao biofilme, 60 por cento (15) das cepas de C. parapsilosis foram fortes produtoras de biofilme seguidas de 14,3 por cento (2) das cepas de C. orthopsilosis. Todos os isolados de C. metapsilosis deste estudo revelaram ser fracos produtores de biofilme. Conclusao: A tecnica de RAPO, empregando o iniciador 1281, apresentou-se como um metodo pratico, rapido e eficaz na diferenciacao das especies do complexo C. parapsilosis, identificando 97,9 por cento das cepas estudadas. C. parapsilosis foi a especie mais prevalente como patogeno de infeccao sistemica que as especies do complexo C. parapsilosis. Quanto as provas fenotipicas, podemos concluir que nao sao eficientes na identificacao de especies deste complexo, sendo necessario o uso de ferramentas moleculares para correta identificacao das mesmas. Tendo em vista poucas alteracoes em relacao a susceptibilidade a drogas entre as especies do complexo, o interesse maior na identificacao esta relacionado a estudos epidemiologicos
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    Caracterizacao molecular e variabilidade da regiao espacadora transcrita interna (ITS) do gene ribossomal de isolados de Candida spp. de interesse medico
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Merseguel, Karina Bellinghausen [UNIFESP]
    As infeccoes invasivas por Candida nao-C. albicans tem emergido como problemas de Saúde publica mundial. A identificacao correta de Candida spp. e fundamental para a definicao de estrategias de controle e tratamento das infeccoes fungicas. Nosso objetivo foi avaliar as taxas de concordancia da identificacao de isolados de Candida spp. por metodos fenotipicos e por metodo molecular, assim como caracterizar variabilidades intra e interespecificas da regiao ITS (Internal Transcribed Spacer) do DNA ribossomal (rDNA). Selecionamos 300 cepas de Candida spp. depositadas no Banco de Microrganismos do Laboratorio Especial de Micologia u LEMI (UNIFESP), no periodo de 1997 a 2011, isoladas de pacientes com candidemia ou de pacientes HIV positivos/AIDS com candidiase oroesofagica. A identificacao fenotipica foi realizada por cultivo em meio CHROMagarTM Candida, micromorfologia e perfil bioquimico (ID32C), complementada por teste de tolerancia em caldo hipertonico e temperatura de 42° C quando pertinente. A identificacao molecular foi realizada atraves do sequenciamento da regiao ITS do rDNA e as sequencias obtidas foram comparadas as sequencias depositadas nos bancos genomicos publicos do National Center for Biotechnology Information (NCBI) and Centraalbureau voor Schimmelcultures (CBS). Para identificacao correta em nivel de especie, consideramos a identidade maxima  a 98%. Para analise das variabilidades intra e interespecificas da regiao ITS, calculamos a diversidade dos haplotipos e a distancia p nao corrigida. Houve concordancia entre a identificacao fenotipica e molecular para 87% dos isolados de Candida spp. analisados. Com o metodo molecular foi possivel discriminar as especies do complexo C. parapsilosis (n=69), sendo 34 isolados de C. parapsilosis (sensu stricto), 31 C. orthopsilosis, 3 C. metapsilosis e 1 isolado de Lodderomyces elongisporus. Resultados discrepantes tambem foram observados para outros isolados de Candida spp.: um isolado foi identificado fenotipicamente como C. guilliermondii e molecularmente como P. caribbica, enquanto tres isolados que tiveram perfil duvidoso na identificacao fenotipica pelo sistema ID32C foram identificados como C. haemulonii pelo metodo molecular. Na analise da variabilidade intraespecifica da regiao ITS, identificamos diferentes haplotipos entre 11 especies de Candida, observando-se maior polimorfismo na regiao ITS1 e maior numero de haplotipos entre as especies relacionadas a fontes endogenas de aquisicao de infeccao. A analise da distancia u p nao corrigida mostrou que as distancias intraespecificas sao manifestamente menores que as distancias interespecificas. Concluimos que os metodos fenotipicos, quando realizados por profissionais experientes em micologia, permitem a identificacao correta das especies de Candida de maior prevalencia clinica. O metodo molecular possibilitou diferenciar as especies do complexo C. parapsilosis e especies raras consideradas emergentes. A analise do polimorfismo da regiao ITS do rDNA indicou diferentes padroes de variabilidade genetica entre as especies de Candida, demonstrando sua utilidade como marcador genetico para identificacao de especies e tambem para estudos evolutivos, assim como para inferencias sobre a historia natural das infeccoes hematogenicas causadas por leveduras do genero Candida de importancia medica
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    Ceratites fúngicas: epidemiologia, aspectos clínicos, suscetibilidade aos antifúngicos e alternativas terapêuticas
    (Universidade Federal de São Paulo, 2024-10-14) Linhares, Fernanda Machado Bezerra [UNIFESP]; Oliveira, Lauro Augusto de [UNIFESP]; Farah, Ana Luisa Hofling de Lima [UNIFESP]; Sousa, Luciene Barbosa de [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/7050225867972978; http://lattes.cnpq.br/2367491641205774; http://lattes.cnpq.br/5591822363508144; http://lattes.cnpq.br/5869033836984565
    Objetivo: Este estudo tem por finalidade avaliar aspectos epidemiológicos, clínicos, suscetibilidade antifúngica, estratégias terapêuticas e resultados visuais de pacientes com ceratite fúngica tratados no setor de Córnea e Doenças Externas Oculares do Departamento de Oftalmologia da Universidade Federal de São Paulo (Unifesp) – Escola Paulista de Medicina e resultou em três publicações. 1. Manejo das ceratites fúngicas em centro de córnea de referência no Brasil. Métodos: Estudo retrospectivo, descritivo e observacional, a partir da análise de prontuários, incluindo 66 pacientes com ceratite fúngica e exame de cultura do raspado corneano positivo. Resultados: Quarenta e cinco pacientes eram do sexo masculino (68,2%), e a média de idade foi de 48,06 (± 17,39) anos. A maioria dos pacientes (65,2%) apresentou início dos sintomas há mais de 15 dias. Fusarium spp. foi o fungo mais frequentemente isolado (32 casos; 48,5%), seguido por Candida parapsilosis (12 casos; 18,2%). Trinta e quatro pacientes (51,5%) foram submetidos à injeção intracameral de anfotericina B (5μg por 0,1ml). Destes, onze (32,3%) tiveram a infecção erradicada. Nos outros 23 pacientes (67,7%), o transplante terapêutico foi necessário. Dos 66 pacientes, quarente e três (65,1%) evoluíram para transplante terapêutico, e três (4,5%) foram submetidos à evisceração ou enucleação. Cinquenta e três pacientes (80,3%) apresentaram acuidade visual final pior que 20/200. Conclusões: Os fungos filamentosos foram os mais prevalentes e de maior associação com indicação de procedimentos cirúrgicos e recidiva da infecção após transplante terapêutico. A injeção intracameral de anfotericina B mostrou-se uma alternativa terapêutica segura para ceratites fúngicas refratárias. 2. Ceratites fúngicas causadas por espécies de Candida: identificação molecular, suscetibilidade antifúngica, capacidade de formação de biofilme e aspectos clínicos. Métodos: Estudo transversal, experimental e não intervencionista, incluindo 13 isolados de Candida sp., recuperados de 13 pacientes com diagnóstico de ceratite por Candida. A identificação dos isolados foi feita por meio do CHROMagarTM e confirmada pelo sequenciamento de ácido desoxirribonucleico (DNA). Foi testada a sensibilidade antifúngica dos isolados na forma planctônica (células isoladas) a quatro antifúngicos: fluconazol, anfotericina B, voriconazol e anidulafungina. A capacidade de formação de biofilme de cada cepa foi avaliada pelo método de redução do sal de tetrazol XTT e a sensibilidade antifúngica das amostras de biofilme. Os resultados foram relacionados com os desfechos clínicos de cada paciente. Resultados: Dentre os 13 isolados, dois eram C. albicans, dez eram C. parapsilosis (sensu stricto) e um era C. orthopsilosis. Todos os isolados na forma planctônica foram classificados como suscetíveis ou com suscetibilidade intermediária aos quatro antifúngicos testados. Quatro isolados (30,7%) apresentaram produção muito baixa de biofilme, enquanto os outros nove foram produtores de biofilme (69,3%). Todas as amostras de biofilme não foram suscetíveis aos antifúngicos testados. Cirurgia ocular prévia foi o fator de risco mais comum (84,6%) associado à ceratite fúngica, e C. parapsilosis foi a espécie de Candida mais frequente (76,9%). Quatro pacientes (30,7%) necessitaram de transplante de córnea e dois (15,4%) de evisceração. Conclusões: A suscetibilidade aos antifúngicos foi menor nas amostras de biofilme do que nos isolados de células planctônicas. Apesar da suscetibilidade in vitro, seis pacientes (46,1%) não responderam ao tratamento clínico e necessitaram de cirurgia. 3. Voriconazol intracameral no tratamento das ceratites fúngicas graves: série de casos. Métodos: Estudo prospectivo, longitudinal e intervencionista, incluindo sete pacientes com ceratite fúngica refratária ao tratamento tópico convencional ou com acometimento de câmara anterior. Os pacientes receberam injeção intracameral de voriconazol 50 microgramas (μg)/0,1 mililitro (ml) como tratamento adjuvante (até quatro repetições, com intervalo de 72 horas). O desfecho primário do estudo foi a erradicação da infecção, e os desfechos secundários foram a necessidade de transplante de córnea e a melhor acuidade visual corrigida (MAVC). Resultados: Dos sete pacientes com ceratite fúngica tratados com voriconazol, quatro apresentaram culturas do raspado corneano positivas para fungos, enquanto os outros três foram confirmados por meio da microscopia confocal. A injeção intracameral de voriconazol foi realizada uma vez em quatro casos, três vezes em dois casos e quatro vezes em um caso. Quatro pacientes apresentaram descemetocele com perfuração corneana iminente e foram tratados com adesivo de cianoacrilato e lente de contato terapêutica. Quatro pacientes apresentaram cura da infecção, e três pacientes foram submetidos a transplante de córnea terapêutico. A acuidade visual final melhorou em dois casos, porém, todos os pacientes apresentaram MAVC conta dedos ou pior. Conclusões: O uso de injeção intracameral de voriconazol é uma opção terapêutica segura no tratamento de ceratites fúngicas profundas e refratárias. Apesar de o diagnóstico clínico de erradicação fúngica ter sido observado em todos os casos, três pacientes necessitaram de transplante terapêutico e todos apresentaram perda visual total ou quase total. Outras estratégias de tratamento devem ser consideradas, visando melhorar os resultados visuais dos pacientes.
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    Chronic mucocutaneous candidiasis and systemic lupus erythematosus: a new variant of chronic mucocutaneous candidiasis?
    (Informa Healthcare, 2012-05-01) Moraes-Vasconcelos, Dewton de; Domingues-Ferreira, Mauricio; Pieri, Patricia de Campos; Duarte, Alberto Jose da Silva [UNIFESP]; Universidade de São Paulo (USP); Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Chronic mucocutaneous candidiasis (CMC) is characterized by susceptibility to Candida infection of skin, nails, and mucous membranes. Autoimmune endocrinopathies are common in CMC patients, but there are no reports of the involvement of systemic autoimmune disorders. We present here the first case of this kind of association in a patient with an autosomal dominant variant of CMC. the individual had had this disorder since childhood and systemic lupus erythematosus with secondary antiphospholipid syndrome, as well as renal, articular and hepatic manifestations without thymoma.
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    Colonização fúngica da cavidade oral de crianças nascidas de mães soropositivas para HIV no primeiro ano de vida
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2000) Hornke, Lorena [UNIFESP]
    A candidiase oral e a infeccao oportunista mais frequente na populacao com AIDS e contribui para o aumento da morbidade e custo no tratamento destes pacientes. A colonizacao oral por especies de Candida esta bem estudada na populacao de adultos com AIDS mas poucos estudos foram feitos com criancas. Sabendo-se que a maioria destas infeccoes sao provenientes da flora colonizante endogena, estudamos a colonizacao por fungos na cavidade oral de pares maes e filhos soropositivos para HIV e os comparamos com pares maes soropositivas para HIV e seus filhos sororevertidos para HIV e um grupo controle de maes e filhos soronegativos para HIV na mesma faixa etaria. Fizeram parte de nosso estudo 92 pares maes soropositivas para HIV e seus filhos soronegativos para HIV, 14 pares maes/filhos soropositivos para HIV e 75 pares maes/filhos soronegativos para HIV. Foram isoladas 509 cepas de Candida spp. Nas maes houve predominio das especies de C. albicans ocorrendo em 83,2 por cento das maes soropositivas para HIV e 89,2 por cento nas maes soronegativas para HIV; ja nas criancas houve predominio das especies de C. nao-albicans, ocorrendo em 72,5 por cento das criancas infectadas por HIV, 67,2 por cento nas criancas sororevertidas para HIV e 69,1 por cento das criancas sonegativas para HIV. Entre as especies nao albicans nas maes houve predominio de C. tropicalis e C. glabrata e nos grupos de criancas houve predominio das especies de C. parapsilosis e C. tropicalis. A colonizacao mista foi mais frequente na populacao de criancas, estando assim distribuidor criancas HIV positivas 21 por cento, criancas sororevertidas para HIV 27 por cento, criancas soronegativas para HIV 17,6 por cento, maes soropositivas para HIV 10,6 por cento e esteve ausente nas maes soronegativas para HIV. Em relacao a susceptibilidade aos antifungicos testados observamos que as especies nao-albicans sao menos susceptiveis aos antifungicos em relacao a C. albicans. Nao encontramos C. albicans resistentes aos antifungicos sendo todas as especies de susceptibilidade reduzida pertencem ao grupo de C. nao-albicans
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    Colonizacao por leveduras em criancas hospitalizadas e profissionais de Saúde
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1993) Heredia, Maria Susana [UNIFESP]
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    Comparação genotípica e fenotípica de diferentes isolados clínicos de colonização e candidemia por Candida rugosa
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009-07-29) Terçarioli, Gisela Ramos [UNIFESP]; Colombo, Arnaldo Lopes [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Introduction: Candida rugosa is an emergent pathogen recognized by its higher occurrence in Latin American countries. This yeast has the ability to colonize and cause human bloodstream infections as well as to show resistance to several antifungal drugs, specifically to azoles. Objectives: To compare phenotypic properties such as virulence attributes and antifungal susceptibility, as well as to perform molecular identification and typing of C. rugosa clinical isolates obtained from patients who were either colonized or developed candidemia due to this species during the hospitalization period. We were also interested in evaluating such differences among strains isolated across two different periods: 1995/96 and 2001/02. Material and Methods: The strains were phenotypically characterized according to virulence factors, including the production of extra cellular enzymes (protease, phospholipase and lipase) and biofilm formation. We performed susceptibility testing to 5 antifungal drugs by using broth microdilution: amphotericin B, fluconazole, voriconazole, caspofungin and anidulafungin. To confirm identification to the species level and evaluate genetic variability, we have employed RAPD, microsatelite and rDNA ITS region sequencing. Results: Phenotypic properties varied considerably among the isolates, specifically regarding to hydrolytic enzymes production. Most of the isolates were low proteinase producers. The strains were phospholipase negative and showed a not very expressive biofilm formation in general. Nevertheless, lipase production was the only virulence factor considerably expressed by the clinical isolates, specifically by blood strains, suggesting the importance of this attribute in C. rugosa infection. The strains were sensitive to all the antifungal drugs tested, except fluconazole. The clinical isolates were highly related as determined by 3 different methods. However the control strain ATCC10571 was considered genotipically very different Our isolates were 90.5% similar among them and 87% similar to C. rugosa control strain as determined by RAPD, and 92% similar among them and 86,5% similar to ATCC10571, as determined by microsatelite. All the isolates were identified as C. rugosa by ITS region sequencing. The percentage of similarity ranged from 89% to 93% for the clinical isolates, and 99% to C. rugosa ATCC10571. Conclusions: It was not possible to establish a direct relationship between the expression of all virulence properties and patients clinical outcomes. However there is mounting evidence that lipase activity influences candidemia due to C. rugosa. It is possible that clonal dissemination in the hospital environment have occurred throughout several years. In addition, the genetic differences found between our isolates C. rugosa control strain ATCC10571, together with the phenotypic differences observed, such as higher biofilm formation and rough colony morphology, as well as low lipase activity for this control strain, suggest the genetic heterogeneity among the taxon C. rugosa.
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    Comparative study of agar diffusion test and the NCCLS macrobroth method for in vitro susceptibility testing of Candida spp.
    (Kluwer Academic Publ, 1999-01-01) Soni, LMF; Burattini, M. N.; Pignatari, ACC; Gompertz, O. F.; Colombo, A. L.; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    We performed a prospective double-blind study to evaluate the correlation between inhibition zones obtained by a disk-diffusion test, using Neo-sensitabs of fluconazole (Rosco Diagnostica), and the MICs generated by the NCCLS macrobroth dilution assay. Eighty clinical isolates, representing 5 of the clinically relevant species of Candida, were tested simultaneously by both methods. A clear inverse correlation was found between the results obtained by both tests (r = -0.69). in addition, there was high degree of agreement between methods in the identification of susceptible isolates. However, the resistance definition by disk-diffusion test had a positive predictive value of only 17%. Our data support the hypothesis that Rosco Fluconazole Neo-sensitabs have potential as a screening test for the identification of Candida isolates susceptible to fluconazole. Resistant isolates should be further investigated by standardized broth procedures.