Navegando por Palavras-chave "Anticorpos Monoclonais"

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    Anticorpos monoclonais contra proteina de 75kDa da superficie de Paracoccidioides brasiliensis inibem o crescimento e diminuem a doenca experimental pelo fungo
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2007) Xander, Patricia [UNIFESP]; Lopes, Jose Daniel [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Paracoccidioides brasiliensis e fungo termo-dimorfico responsavel pela paracoccidioidomicose (PCM), micose granulomatosa sistemica prevalente na America Latina. O fungo libera muitos antigenos, os quais podem encontrar-se transitoriamente ligados a superficie celular. Dois anticorpos monoclonais (mAbs) de diferentes isotipos especificos para proteina de 75 kDa foram produzidos e caracterizados. A proteina e secretada pelo P. brasiliensis e foi purificada e caracterizada. Usando os mAbs, a molecula foi purificada e in vitro apresentou atividade de fosfatase. Analises de microscopia confocal e citometria de fluxo demonstraram que ambos mAbs reconhecem a proteina na superficie do fungo, principalmente nas regioes de brotamento. Experimentos in vitro mostraram que o crescimento do P. brasiliensis foi inibido na presenca dos anticorpos. Alem disso, quando as celulas na fase de levedura do fungo foram opsonizadas com os mAbs levaram a aumento da fagocitose por macrofagos peritoneais murinos. Ensaios de imunizacao passiva com camundongos experimentalmente infectados com o P. brasiliensis tambem foram realizados. Os resultados mostraram que os animais tratados com os mAbs tiveram reducao na contagem das CFUs do pulmao, quando comparados aos animais controle, e a histopatologia mostrou diminuicao da inflamacao, ausencia de celulas fungicas e praticamente nao houve formacao de granulomas
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    Antigeno carcinoembrionari: extracao, purificacao, producao de anticorpos monoclonais e aplicacoes
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1985) Hartfiel, Renate [UNIFESP]
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    Caracterizacao de anticorpos monoclonais dirigidos a lipofosfoglicano de formas promastigotas de Leishmania(Leishmania) amazonensis: papel protetor na infeccao
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2002) Valero Lapchik, Valderez Bastos [UNIFESP]
    Este estudo analisou o papel do lipofosfoglicano (LPG) de formas promastigotas de L. (L.) amazonensis, na infectividade do parasita, utilizando anticorpos monoclonais (MoAbs) VST-1 (IgG3) e VST-2 (IgM) dirigidos contra LPG. Neste trabalho foi tambem utilizado o MoAb ST-3 (IgG3), produzido contra glicoesfingolipideos de formas amastigotas, que reconhece em promastigotas de L. (L.) amazonensis a fracao de LPG. Por imunofluorescencia o MoAb VST-1 apresentou marcacao de superficie com formas promastigotas de L. (L.) amazonenses; o MoAb VST-2 reconheceu promastigotas de L. (L.) amazonenses e L. (L.) major, enquanto que o MoAb ST-3 reconheceu formas promastigotas de L. (L.) amazonensis e L. (V.) braziliensis. Estes resultados foram confirmados por radioimunoensaio (RIA) celular. Por PAGE-SDS, foi demonstrado que LPGs de L (L.) amazonensis e de L. (L.) major apresentam-se polidispersos com pesos moleculares aparentes entre 35 e 80 kDa e entre 8 e 45 kDa, respectivamente. Por Westem 81ot, a reatividade dos MoAbs VST-1 e ST-3 com LPG purificado de L. (L.) amazonenses foi intensa, por outro lado, o MoAb VST-2 reagiu preferencialmente com LPG de L. (L.) major. Os MoAbs VST-1, VST-2 mostraram-se especificos para LPG, nao reconhecendo outras fracoes de glicolipideos quando analisados por RIA. f A reatividade para os MoAbs VST-1, VST-2 e ST-3 por RIA foi favorecida quando o LPG purificado foi adsorvido em superficie positiva apos tratamento da placa de poliestireno com poli-L-lisina, ou em superficie contendo componentes lipidicos de membrana, como fosfatidil colina e colesterol. Foi constatado um aumento da sensibilidade do metodo em cerca de uma ordem de grandeza em relacao ao ensaio tradicional, na placa de poliestireno sem tratamento previo. Nestas condicoes se verificou que os MoAbs VST-1 e ST-3 detectam baixas concentracoes de LPG como 100 ng/poco, e o MoAb VST-2, cerca de 1 ng do antigeno/poco. Estudos de caracterizacao...(au)
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    Caracterizacao de antigenos especificos de Leishmania (Viannia) braziliensis reconhecidos por anticorpos monoclonais
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2000) Silveira, Thais Gomes Verzignassi [UNIFESP]
    Foram produzidos anticorpos monoclonais que reconhecem promastigotas de L. (V.) braziliensis, denominados SST-1, SST-2, SST-3 e SST-4. Estes MoAbs foram analisados juntamente com os MoAbs ST-3, ST-4 e ST-5 (STRAUS et ai., 1993) quanto a reatividade com L. (V.) braziliensis, por tecnicas de, radioimunoensaio em fase solida, imunofluorescencia indireta e Western blotting imunocoloracao de HPTLC. Em L. (V.) braziliensis os MoAbs SST-1, ST-3 e ST-5 reconhecem glicolipideos. Por imunofluorescencia indireta verificou-se que os antigenos reconhecidos estao localizados na superficie do promastigota, e por imunoeletromicroscopia observa-se marcacao de superficie em forma de patches. O MoAb SST-1 reconhece glicolipideos de promastigotas de L. (V.) braziliensis (serodemas l a 7), L. (V.) naiffi e L. (V.) guyanensis. Nao foram detectados glicolipideos reconhecidos pelo MoAb SST-1 em amastigotas de L. (V.) braziiiensis, em promastigotas de L. (V.) panamensis e L. (V.) lainsoni, em amastigotas e promastigotas de L. (L.) amazonensis, L. (L.) major e L. (L.) chagasi e epimastigotas de T. cruzi. Os MoAbs ST-3 e ST-5 sao tambem reativos com formas promastigotas de L. (V.) braziliensis, reconhecendo componentes glicolipidicos distintos daqueles reconhecidos pelo MoAb SST-1. A importancia dos epitopos reconhecidos pelos MoAbs SST-1, ST-3 e ST-5 para a infectividade do parasita foi analisada em cultura de macrofagos infectados com promastigotas de L. (V.) braziliensis. Somente os fragmentos Fab dos MoAbs ST-3 e ST-5 inibiram significativamente a infeccao dos macrofagos, corroborando a importancia dos epitopos Galb1-3Gal na interacao parasita-macrofago. Por outro lado, o epitopo reconhecido pelo MoAb SST-1 parece nao estar envolvido nesta interacao. O MoAb SST-2 reconhece um doublet de 24-28kDa e um componente de 72kDa, cujo epitopo e conformacional. Verificou-se alta marcacao por imunofluorescencia e por imunoeletromicroscopia de toda superficie do parasita O MoAb SST-3 reconhece um triplet de natureza glicoproteica, de 160, 170 e 180 kDa cuja reatividade e abolida por tratamento com m-periodato, indicando que o epitopo e carboidrato. Por imunofluorescencia e imunoeletromicroscopia observa-se marcacao restrita a membrana do flagelo do parasita...(au)
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    Caracterização do perfil de segurança infeccioso dos anticorpos monoclonais imunossupressores
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2021) Silva, Nayara Aparecida De Oliveira [UNIFESP]; Melo, Daniela Oliveira de [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo
    The occurrence of infections is a widely known adverse event for immunosuppressive drugs, including monoclonal antibodies (mAB). However, immunosuppressive therapy is not the only risk factor for the development of infections. The autoimmune disease also increases susceptibility to site-specific infections, which may be enhanced by immunosuppression. Thus, the same immunosuppressive mAB may present differences in the infectious profile for each indication due to the influence of autoimmune disease on the risk of certain infections. Given this scenario, the aim of the study was to evaluate the infectious profile, by indication, of immunosuppressive mABs approved for the treatment of two or more autoimmune diseases. A crosssectional, retrospective case/non-case type study was conducted using data from spontaneous reports of suspected adverse drug events (ADEs) received by the Food and Drug Administration (FDA) through June 2020 via the FDA Adverse Event Reporting System (FAERS). Disproportionality analysis on the chance of reporting was performed from the calculation of Reporting Odds Ratios (ROR) with confidence interval at the 95% level (95% CI) and chi-square test with Yates' correction. Ten mABs were analyzed, being 4 anti-TNF alpha (adalimumab, certolizumab, golimumab, and infliximab), 4 anti-interleukin (ixekizumab, secukinumab, tocilizumab, and ustekinumab), and 2 anti-integrin (natalizumab and vedolizumab). Disproportionality analysis identified increased odds of reporting infectious events that appears to be associated with either the (i) indication alone, as these were infections that had disproportionality to an indication independent of the mAB used - as was the case with Clostridium difficile intestinal infections in patients with inflammatory bowel disease, abscesses in patients with Crohn's disease (CD), cytomegalovirus infection in patients with ulcerative colitis (UC), and osteomyelitis in patients with rheumatoid arthritis (RA); or to (ii) the binomial of indication and mAB use, i.e. infections with disproportionality in the chance of reporting for some indication and for one or more mABs, not all of them - such as increased chance of reporting pneumonia, infectious arthritis, and joint tuberculosis in RA patients on anti-TNF use and sepsis in CD patients on anti-integrins. The conclusion is that autoimmune diseases can modulate the infectious profile, increasing the risk of reporting certain infectious events. Thus, the same mAB may show differences in the profile of infectious ADEs according to the indication of use, and these differences should be taken into consideration when designing risk minimization plans to increase treatment safety.
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    Caracterizacao estrutural e imunoquimica de glicoinositol fosforilceramidas e monohexosil ceramidas de fungos patogenicos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2002) Toledo, Marcos Sergio [UNIFESP]
    Para um melhor entendimento da importancia e do papel biologico dos glicoesfingolipideos (GSLs) e suas relacoes com as doencas causadas por diferentes fungos patogenicos, nos analisamos as estruturas moleculares de GSLs de diferentes fungos como: Paracoccidioides brasiliensis, Histoplasma capsulatum, Sporothrix schenckii, Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Cryptococcus laurentii, Cryptococcus albidus and Aspergillus fumigatus. GSLs de fungos foram isolados e purificados por DEAE-Sephadex, HPLC e HPTLC preparativa. As estruturas foram elucidadas por espectroscopia por 1-D e 2-D NMR, ESIIMS-CID/MS e GC/MS. Foram descritas as estruturas de glicosilinositol fosforilceramidas (GIPCs) presentes nas formas de micelio e levedura de P. brasiliensis: Pb-1 (Galf(31->6(Manpa1-->3)Manpa1->21ns1->P-->1Cer) e Pb-2 (Manpa1->3Manpa1->21ns1->P->1Cer), 0 GIPC Pb-1 apresentou reatividade com todos os soros de pacientes com PCM testados, e esta reatividade e devida ao residuo terminal de (3-Galf. Foram descritos tambem os GIPCs de S. schenckii, sendo que os GIPCs da forma de micelio descritos sao: Ss-M1 (Manpa1-->61ns1-->P-->1Cer), Ss-M2 (Manpa1--->3Manpa1->61ns1->P->1Cer), Ss-M3 (Manpa1->3(Galpp1->4)Manpa1->21ns1->P->1Cer), e das formas de levedura sao: Ss-Y1 (Manpa1-->3Manpa1 ->61ns1->P-->1 Cer), Ss-Y2 (Manpa1->3Manpa1->2/61ns1->P->1Cer) e Ss-Y6 (Manpa1->3Manpa1->6GIcNH2a1->21ns1->P->1Cer). Esta foi a primeira descricao de glicoesfingolipideos com os cores Manpa1-),61ns e GlcNH2a1->21ns. Foram caracterizados tambem monohexosil ceramidas (CMHs) de P. brasiliensis, H. capsulatum, A. fumigatus, A. niger, Cryptococcus spp, C. albicans e S. schenckii. Estudos estruturais de CMHs de P. brasiliensis e H. capsulatum mostraram a presenca de altos niveis de insaturacao (E)-03 nos acidos graxo das formas de micelio, quando comparados com as...(au)
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    Clonagem, expressão e efeito antitumoral da proteína recombinante SCFV 3F12E7 ANTI-FGF2
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2019-12-18) Costa, Bruno Andrade [UNIFESP]; Moraes, Jane Zveiter De [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/6568232956872184; http://lattes.cnpq.br/5616724867233141; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Evidence suggests that fibroblast growth factor 2 (FGF2) plays an important role in the growth of tumors and metastases. THE antiangiogenic immunotherapy, associated with cytotoxic therapies, has already shown its potential and had its use approved by the FDA (from English, Food and Drug Administration) for the treatment of some tumors. In recent work by our group, a monoclonal antibody, the anti-FGF2 mAb 3F12E7, was developed, which inhibited tumor growth and metastases in preclinical studies (Aguiar et al., 2016). Despite promising results, the IgG integral monoclonal antibody failed to inhibit the growth of already established tumors, which encouraged us to redesign new smaller agents targeting FGF2. Like this, continuing the studies of the group, in the present work, we describe a recombinant scFv antibody (single chain fragment variable) generated by union of the light and heavy chains of the IgG monoclonal antibody 3F12E7 (Pignatari et al., 2007). The advantage is that antibodies in the form of scFv, because they are smaller, infiltrate more easily into solid tumor masses (Farajnia et al., 2014; Xenaki et al., 2017). To obtain this antibody, the genes of interest were cloned into a bacterial expression vector and the variable domains of light and heavy chains were connected by a linker of 15 glycine-serine residues (Tripathi et al., 1998; Brígido et al., 2002; Molnár et al., 2003). The expression of scFv 3F12E7 anti-FGF2 was confirmed by an immunofluorescence assay performed in transfected cells. In vitro, biotin-labeled anti-FGF2 scFv 3F12E7 recognized the purified FGF2 and in B16-F10 tumor extracts. For in-house tests live, B16-F10 cells were implanted in mice (C57Bl / 6, 5x105 /animal).
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    Contribuicao ao estudo de proteinas ligantes de laminina atraves de anticorpos monoclonais
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1988) Gomes, Laurecir [UNIFESP]
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    Correlação quantitativa e qualitativa de glicoesfingolipídeos em diferentes estágios da inflamação do tecido pulpar dental
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2002) Carvalho, Maria Cristina Coelho de [UNIFESP]; Takahashi, Helio Kiyoshi [UNIFESP]
    A proposta dessa tese foi analisar o perfil de glicoesfingolipideos (GSLs) presentes nos tecidos pulpares dentais em diferentes estagios de inflamacao obtidos apos tratamento endodontico e compara-los com o perfil de GSLs de tecidos pulpares normais obtidos apos a extracao de terceiros molares integros. Sessenta amostras de tecidos pulpares foram removidos apos diagnostico clinico e radiografico e subdivididos em cinco grupos) Grupo A (controle) 15 tecidos pulpares sem sinais e sintomas de inflamacao; Grupo BI 15 tecidos inflamados reversivelmente; Grupo C: 15 tecidos inflamados irreversivelmente Grupo D: 7 tecidos necroticos sem area de lesao ossea perirradicular e Grupo D1: 8 tecidos necroticos com area de lesao ossea perirradicular. Apos a realizacao dos procedimentos de extracao e purificacao dos GSLs, as fracoes neutras e acidicas de GSLs foram analisadas por cromatografia em camada delgada de alta resolucao(HPTLC) e quantificadas por densitometria a 525nm. Diferencas quantitativas foram observadas no perfil GSLs entre os tecidos. Celulas de tecido pulpar inflamado apresenta diferenca estatistica significante no total de GSLs por mg de tecido (B > D > A), com excecao do grupo D1 apresentando apenas tracos de GSLs. Diferencas qualitativas foram tambem observadas entre os grupos. No perfil de GSLs neutros dos tecidos inflamados (grupo B, C e D) foram detectados a presenca 1e CMH, CDH, CTH, Globo, nLc4 e H1 Por outro lado no grupo controle nao detectamos a presenca de H1, enquanto que, no grupo D1, nLc4 e H1 nao foram detectados. O grupo B, foi o unico a apresentar reatividade por imunocoloracao de placas de HPTLC ou imunofluorescencia indireta com o MoAb ST-3, indicando que os CMHs dos tecidos do grupo B sao galactosilceramida. 0 perfil de gangliosideos apresentado por todos os grupos foi GM3, GM1 e GD1a, com excecao para o grupo D1, onde GM3 estava ausente
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    Desenvolvimento de anticorpos especificos para receptor B 1 de cininas humano
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009) Faria, Atila Granados Afonso de [UNIFESP]
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    Desenvolvimento de um método imunofluorimetrico para dosagem da pro-insulina sérica
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1994) Dalbosco, Ivaldir Sabino [UNIFESP]; Russo, Ewaldo Mario Kuhlmann [UNIFESP]
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    Deteccao de antigenos circulantes (gp43 e gp70) em liquidos biologicos e pacientes com paracoccidioidomicose com finalidade diagnostica e monitoramento
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2004) Silva, Silvia Helena Marques da [UNIFESP]
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    Distribuição de componentes de Trypanosoma cruzi e de proteínas miofibrilares do músculo cardíaco em Calomys callosus cronicamente infectados e imunossuprimidos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2003) Taniwaki, Noemi Nosomi [UNIFESP]; Mortara, Renato Arruda [UNIFESP]
    Um modelo experimental de reativação da doença de Chagas crônica com um agente imunossupressor foi desenvolvido a fim de se obter informações sobre do ciclo de vida intracelular do Trypanosoma cruzi e o arranjo das miofíbrilas cardíacas, com o propósito de entender melhor o processo de reativação que ocorre no homem. Calomys caffosus cronicamente infectados com as cepas Y e CL de T. cruzi sofreram reagudização quando tratados com ciclofosfamida, um agente imunossupressor. Cortes de 5 - 8 mm de parafina foram processados para microscopia confocal de imunofluorescência. Anticorpos monoclonais (AcM) produzidos contra as formas do T. cruzi foram usados com base em reatividades previamente descritas: AcM 2C2, reage com um epitopo carboidrato em Ssp-4, uma glicoproteína majoritária da superfície dos amastigotas, enquanto AcM 1 D9, 2137, 3139, 4139 identificam epitopos sobre Ssp-4 diferentes do AcM 2C2. Amostras foram coradas com DAPI para visualizar o cinetoplasto e o núcleo dos parasitas. AcM 2C2 apresentou um padrão de fluorescência homogeneamente distribuído sobre a superfície dos amastigotas; AcM 4139 e 3139 apresentaram a mesma distribuição observada em 2C2. Marcação muito fraca e negativa foi observada com AcM 1 D9 e 2137, respectivamente. AcM 3132, que reage com um epitopo nãocarboidrato de formas flageladas e AcM 4135 que também detecta um epitopo nãocarboidrato, revelou a bolsa flagelar em amastigotas alongados e a membrana plasmática dos parasitas que estavam sofrendo divisão. Para observação das proteínas miofibrilares, a técnica de recuperação antigênica foi utilizada nos cortes de parafina. Os cortes foram submetidos a tripla marcação; 1. AcM para visualizar as diferentes proteínas miofibrilares (miosina, actina, desmina, tropomiosina, troponina T, titina e a-actinina) do músculo cardíaco; 2. Soro chagásico humano para marcar a suprefície dos parasitas; 3. DAPI (para marcar DNA) que coram o núcleo das células e cinetoplasto e núcleo dos parasitas. Em paralelo, culturas primárias de cardiomiócitos de Calomys caflosus recémnascidos foram desenvolvidas para obtenção de informações adicionais sobre o arranjo ou desarranjo das miofibrilas durante a proliferação do T cruzi nestas células. Tanto amostras in vivo como in vitro apresentaram regiões com perda de estriação transversal, acúmulo de. marcação e desarranjo das miofibrilas. Ao E microscópio eletrônico de transmissão também foram observados desarranjos das ...(au).
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    Estimulacao da rede idiotipica em camundongos permite producao de anticorpos capazes de reconhecer e mimetizar gangliosidio GD3 de melanoma humano
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2000) Ramos, Angelita Silva [UNIFESP]
    os crescentes indices de incidencia e o notavel potencial metastatico do melanoma tornaram urgente a busca de novas abordagens terapeuticas. Ao contrario do que ocorre em celulas normais, o gangliosidio GD3 e abundantemente expresso no melanocito transformado. E, por isso, considerado marcador tumoral, potencialmente alvo para imunoterapia. Sua utilizacao como imunogeno, entretanto, esta comprometida por ser de dificil purificacao e de baixa imunogenicidade, Antigenos nao proteicos nao dao origem a resposta celular ou a celulas de memoria, e a resposta imune estimulada e composta, principalmente, de anticorpos da classe IgM. A imunizacao com anticorpo anti-idiotipico, contendo a imagem interna do GD3, foi proposta como alternativa para provocar resposta imune mais eficaz. MAb anti-GD3 R24 (AB1) foi utilizado na obtencao dos anticorpos anti-idiotipicos. Camundongos BALB/c imunizados com esse anticorpo produziram anticorpos anti-idiotipicos (AB2) e tambem anti-anti-idiotipicos (AB3). Anticorpos AB2 e AB3 monoclonais foram obtidos. MAb AB3 5.G8 reconheceu GD3, purificado ou expresso em celulas de melanoma humano, promoveu citotoxicidade dependente de complemento e tambem do tipo ADCC. ln vivo foi capaz de proteger contra crescimento tumoral, de forma comparavel a observada com MAb R24. MAb AB2 5.E3 reconheceu AB1 e AB3, inibiu a ligacao de AB1 a GD3 e, quando utilizado como imunogeno, foi capaz de estimular a producao de anticorpos anti-anti-idiotipicos ligantes de GD3. Alem disso, a producao de AB3, a partir da imunizacao com AB1, implicou na formacao intermediaria de AB2 e reforcou a ideia de que interacoes idiotipo-anti-idiotipo podem participar tambem da modulacao da resposta imune
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    Estrutura e função de antígenos carbohidratos de Leishmania e Paracoccidioides brasilienses: produção de anticorpos monoclonais
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1996) Takahashi, Helio Kiyoshi [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo [UNIFESP]
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    Estudo da especificidade da Prolil Oligopeptidase recombinante de cerebro de porco e variante e producao de anticorpos monoclonais
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2006) Hemerly, Jefferson Pessoa [UNIFESP]