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    Aderências peritoneais produzidas experimentalmente em ratos: estudo comparativo
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1987) Koh, Ivan Hong Jun [UNIFESP]; Pinus, José [UNIFESP]
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    Análise das respostas cardiovasculares em ratos submetidos ao modelo do abrasamento elétrico da amígdala
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011-04-27) Pansani, Aline Priscila [UNIFESP]; Scorza, Fulvio Alexandre [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Objetivo: As alterações cardiovasculares podem contribuir para a morte súbita e inesperada em epilepsia (SUDEP). Com o intuito de verificar as possíveis alterações cardiovasculares que ocorrem durante a epileptogênese, avaliamos a frequência cardíaca (FC), pressão arterial média (PAM) e variabilidade da frequência cardíaca (VFC) em ratos submetidos ao modelo do abrasamento elétrico da amígdala. Métodos: Ratos Wistar machos (n=15) foram submetidos ao modelo de epilepsia pelo abrasamento elétrico. A FC e a PAM foram registradas antes, durante e após as crises epilépticas. Os valores de FC foram registrados durante todo o processo do abrasamento. A PAM foi mensurada apenas após o abrasamento completo (n=5) e em ratos controle (n=4). A VFC foi avaliada antes do abrasamento, na 5ª e na 10ª crise do estadio 5. Após os experimentos, os ratos foram mortos, o coração removido e submetido à histologia. ANOVA para mais de três grupos e teste t de Student para dois grupos foram usados para análise. A significância estatística foi estabelecida em 5%. Resultados: A FC de repouso aumentou nos estadios 1 (404±41 bpm), 3 (429±47 bpm) e 5 (437±25 bpm) comparada ao período controle (354±23 bpm). A FC diminuiu no primeiro terço da crise, e a magnitude da bradicardia aumentou progressivamente do estadio 1 (-86±35 bpm) ao estadio 5 (-253±72 bpm) (n=8). A metil-atropina suprimiu a bradicardia. Ao final da crise a FC retornou a valores basais, mas no estadio 5 houve uma taquicardia rebote, cuja magnitude aumentou com o aumento do número de crises. O aumento da FC durante as 10 primeiras crises estadio 5 (72±25 bpm; <10 crises; n=13) foi menor comparada às crises subsequentes (144±102 bpm; ≥10 crises, n=11; p<0,05). Ratos com ≥10 crises tiveram uma FC de repouso menor (358±33 bpm) do que os ratos com <10 crises (408±48 bpm). A PAM de repouso foi maior nos ratos abrasados (127±7 mmHg) do que nos seus controles pareados (105±4 mmHg). Durante as crises, a PAM aumentou 60±10 mmHg durante seu terço inicial, retornando progressivamente aos valores basais. A fentolamina não aboliu a hipertensão ictal. Não houve diferença entre os grupos <10 crises e ≥10 crises na variabilidade da frequência cardíaca, nem na avaliação histológica do miocárdio. Não houve alteração no tecido cardíaco dos ratos com epilepsia, independente do número de crises. Conclusão: As crises epilépticas foram acompanhadas de mudanças significativas no controle autonômico. A progressão do abrasamento aumentou progressivamente a atividade parassimpática durante as crises. A repetição de crises tônico-clônicas generalizadas, provocou uma taquicardia rebote e hipertensão arterial, mostrando que as crises também modificam a regulação simpática cardiovascular.
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    Animal model for progressive resistance exercise: a detailed description of model and its implications for basic research in exercise
    (Universidade Estadual Paulista, 2013-03-01) Cassilhas, Ricardo Cardoso [UNIFESP]; Reis, Ismair Teodoro; Venancio, Daniel Paulino [UNIFESP]; Fernandes, Jansen [UNIFESP]; Tufik, Sergio [UNIFESP]; Mello, Marco Tulio de [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); Universidade Federal de Uberlândia Instituto de Genética e Bioquímica Laboratório de Bioquímica e Biologia Molecular
    The Several animal models have been proposed for resistance training. In addition, the results of these studies have been highly variable. Some of the studies have used negative reinforcement, electric shock or food deprivation to motivate the learning of the task. Features such as conditioning through electric shock may undermine the significance of the results or even prevent the model from being successfully executed. Due to these reasons, in this study we propose to use an adaptation of the vertical ladder climbing model for progressive resistance training in rats, albeit with a unique feature to ensure the homogeneity of the study groups: a period of adaptation to the apparatus without any negative reinforcement followed by a subsequent pairing of animals based on their ability to learn. The animals were distributed in the experimental group who were subjected to 8 weeks of a progressive resistance exercise protocol and the control group. After 8wks, the gastrocnemius, soleus, flexor digitorum longus (FDL), and plantaris muscles were removed and the cross-sectional area morphometry was obtened. The animals from experimental group showed hypertrophy [F(4, 15)=17,404, P < 0.001] for gastrocnemius [60% of hipertrophy; Control (2628,64 ± 348,50) versus Experimental (4207,77 ± 1256,52); ES=1.96; Power=0,86]; FDL [35% of hipertrophy; Control (2753,80 ± 359,54) versus Experimental (3711,84 ± 279,45); ES=2.99; Power=0.99] and plantaris [38% of hipertrophy; Control (2730,44 ± 320,56) versus Experimental (3767,30 ± 625,80); ES=2.19; Power=0.92], without modifications for soleus. All animals successfully completed the 8-week progressive resistance training program without any injuries, abandonment or death. Negative reinforcements such as electric shock were not required at any time in the experiment. In conclusion, we showed an adaptation of the previus model for progressive resistance training in rats. A period of adaptation to the apparatus without any negative reinforcement followed by a subsequent pairing of animals based on their ability to learn may be a alternative strategy for the original protocol. We also observed hypertrophy (gastrocnemius, FDL, and plantaris) showed the vality of this procolos for resistance exercise issues. The results of this study may be useful in basic/ applied neuroscience research and resistance exercise.
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    Aspectos morfológicos e histométricos da reparação tecidual das feridas cutâneas de ratos após irradiação com o laser de hélio-neônio
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1988) Soares, José Homero [UNIFESP]; Goldenberg, Saul [UNIFESP]
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    Avaliação da cicatrização apos implantação da tela de polipropileno/poliglecaprone na correção do defeito produzido na parede abdominal em ratos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Yasojima, Edson Yuzur [UNIFESP]; Lopes Filho, Gaspar de Jesus [UNIFESP]
    Objetivo: avaliar os efeitos do oleo de copaiba e andiroba na correcao de defeito abdominal tratado com a utilizacao de tela de polipropileno/poliglecaprone em ratos. Metodos: foi criado um defeito na parede abdominal, corrigido com tela de polipropileno/poliglecaprone em 60 ratos. Estes foram aleatoriamente distribuidos em cinco grupos: controle, copaiba por administracao oral (gavagem), andiroba por gavagem, embebimento da tela no oleo de copaiba e embebimento no oleo de andiroba. A eutanasia foi realizada apos 7, 14 e 21 dias de pos operatorio. Foi analisado o processo de cicatrizacao em relacao as telas quanto aos aspectos macroscopicos e microscopicos. Resultados: todos os animais apresentaram aderencias abdominais, sendo estas menores no grupo copaiba gavagem (p<0,05). Na microscopia, todos os animais apresentaram inflamacao na fase aguda, sendo que esta resposta inflamatoria foi mais bem caracterizada pelo granuloma tipo corpo estranho em volta dos fragmentos da tela; este nao foi encontrado no grupo embebido copaiba, conjuntamente com os fragmentos da tela. Houve uma maior zona de necrose e de fibrose no grupo embebido copaiba e andiroba, em relacao ao controle (p<0,05). Os grupos gavagem copaiba e andiroba apresentaram uma maior quantidade de fibras colagenas em relacao ao grupo controle. Conclusao: os oleos de copaiba e andiroba, administrados via gavagem, apresentaram uma modulacao de resposta inflamatoria, comprovado pela diminuicao da quantidade de aderencias, sem prejudicar o processo de cicatrizacao. Os oleos abreviaram o processo de formacao de fibras colagenas. Contudo, quando administrados por via embebimento, prejudicaram o processo de cicatrizacao abdominal, sendo que o oleo de copaiba apresentou efeito corrosivo na tela
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    Avaliação da expressão genica do estresse oxidativo e da defesa antioxidante em rim de camundongos, submetidos a isquemia e repercussão intestinal, sob oxigenação hiperbólica
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Teruya, Roberto [UNIFESP]; Fagundes, Djalma José [UNIFESP]
    Objetivo: determinar o perfil da expressao genica relacionado ao estresse oxidativo e a resposta antioxidante em rim de camundongos submetidos a isquemia e reperfusao de intestino delgado e submetidos a oxigenacao hiperbarica. Metodos: Trinta camundongos (C57-BL/6) foram submetidos a anestesia, laparotomia, sendo vinte e quatro animais submetidos a isquemia intestinal de 60 minutos seguido de 60 minutos de reperfusao. Tres desses grupos com seis animais foram submetidos a oxigenacao hiperbarica em periodos distintos: durante a isquemia (GOHB-I), durante o periodo de reperfusao (GOHB-R), nos periodos de isquemia e reperfusao (GOHB-IR) e um grupo nao recebeu a OHB (GIR). Um grupo foi somente anestesiado, operado, sem realizar clampeamento vascular do intestino (GC). Foram coletados especimes de intestino e rim para estudo histologico (coloracao HE) e avaliacao do grau de lesao morfologica. A expressao de 84 genes foi determinada pelo sistema, da Reacao de Polimerase em Cadeia em Tempo Real (RT-qPCR - SA BiosciencesTM - Quiagen Co). Para dados da expressao genica foi considerada a variacao do ciclo limiar (Ct) do grupo estudo comparado com o ciclo limiar (Ct) grupo controle expressos na base logaritmica (2) pela formula [2-ΔΔCt], admitido um p≤0,05 para rejeicao da hipotese de nulidade. Resultados: nos animais do grupo GIR, houve expressao genica acima do limiar de normalidade, mostrando relacao da isquemia intestinal com o estresse oxidativo no tecido renal. Nos grupos GOHB-R (36.9%) e no GOHB-IR (47.6%), tambem ocorreu expressao acima do limiar de normalidade. No GOHB-I (8,3%), houve reducao do numero de genes com expressao acima da normalidade, evidenciando uma acao favoravel da OHB nessa situacao sobre o estresse oxidativo e da defesa antioxidante. Conclusoes. A IR intestinal promoveu um perfil de hiperexpressao dos genes relacionados ao estresse oxidativo e defesa antioxidante a distancia sobre o tecido renal. A aplicacao da OHB durante a isquemia promoveu uma significante reducao no numero de genes expressos acima do limiar da normalidade. A OHB aplicada durante a reperfusao ou na isquemia/reperfusao manteve um perfil similar ao do grupo controle
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    Avaliação dos efeitos do éter etílico 5% por via endovenosa para anestesia geral em cães
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1997) Siqueira, Venilton José [UNIFESP]; Goldenberg, Saul [UNIFESP]
    Foi proposta uma modalidade de anestesia geral endovenosa para caes em procedimentos experimentais utilizando-se o eter etilico puro diluido a 5 % em solucao de ringer com lactato de sodio, resfriado a 4 ° C, e assim administrado ate o plano anestesico. Como Medicacao Pre Anestesica foi utilizado uma droga miorrelaxante central e hipno-analgesica - o cloridrato de xilazina - associado a uma droga anti colinergica - o sulfato de atropina. Para a avaliacao do estado anestesico, bem como suas possiveis interferencias com o status cardiovascular, foram mensurados em intervalos de tempo de 5 minutos as frequencias cardiacas e respiratorias, bem como monitoracao cardiaca constante. O eletrocardiograma na derivacao DII, foi registrado logo apos a aplicacao da medicacao pre anestesica, quando seus efeitos foram os maximos, e logo apos a descontinuacao do processo anestesico; isto para avaliar os efeitos da solucao de eter etilico sobre o coracao. Nao foram encontradas modificacoes significantes na duracao da onda P do complexo eletrocardiografico, conforme outros autores tambem nao encontraram, e os valores para a frequencia cardiaca foram ligeiramente maiores no comeco da anestesia do que no final, evidenciando a metabolizacao de alguns farmacos. Concluimos entao, que tal procedimento e ideal para cirurgias de duracao que nao ultrapassem 30 minutos, e que nao interfere significantemente com os parametros fisiologicos do animal
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    Caracterização de vesículas extracelulares exportadas pelo fungo
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Vallejo, Milene Carmes [UNIFESP]; Puccia, Rosana [UNIFESP]
    Este trabalho resultou no estudo de vesículas extracelulares do fungo patogênico Paracoccidioides brasiliensis na fase de levedura. Estas estruturas foram caracterizadas nos isolados Pb3 e Pb18 que pertencem a grupos filogenéticos diferentes e provocam um perfil distinto de infecção em camundongos B10.A. Vesículas extracelulares de 20 a 200 nm transportam antígenos, como visto nas reações de immunoblot com soro de pacientes com paracoccidioidomicose. Um novo epitopo de α-galactosil foi identificado nas vesículas extracelulares, como também na parede celular e em vacúolos intracelulares P. brasiliensis. Proteínas do sobrenadante de cultura do isolado Pb18 foram separadas em frações de vesículas (ves) e livre de vesículas (ves-free), e analisadas por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (LC-MS/MS). Foram identificadas, com dois ou mais peptídeos, 205 proteínas de vesículas, contra 260 de ves-free incluindo 120 compartilhadas. A proporção de proteínas de vesículas e ves-free classificadas como secretadas foi aproximadamente 70%, a maioria utilizando o transporte por vias não convencionais. Analisamos proteínas das frações de vesículas de P. brasiliensis com ortólogos em vesículas de H. capsulatum, C. neoformans e S. cerevisiae. Foram identificadas 72 proteínas de vesículas de Pb18 (35%) com ortólogos em pelo menos duas das outras espécies analisadas. Entre elas, sequências que participam de processos metabólicos de carboidrato e proteína, atividade antioxidante, tradução, sinalização e transporte foram enriquecidos nas vesículas. Com esse trabalho, fornecemos uma comparação completa com outros proteomas de vesículas fúngicas e ampliamos a visão sobre proteomas extracelulares em fungos. Nossa análise lipidômica identificou 36 espécies de fosfolipídeos nas vesículas extracelulares dos isolados Pb3 e Pb18, incluindo fosfatidilcolina, fosfatidiletalonamina, ácido fosfatídico, fosfatidilserina, fosfatidilinositol e fosfatidilglicerol. O ácido graxo C18:1 predominou nas vesículas do Pb3, enquanto nas vesículas de Pb18 o C18:2 foi mais abundante. O esterol predominante nas vesículas de Pb3 e Pb18 foi o brassicasterol, seguido por ergostetol e lanosterol. Foram identificadas nas vesículas dos dois isolados 2 espécies de monohexosilceramidas. As preparações de vesículas de ambos os isolados foram capazes de estimular a produção de citocinas em macrófagos RAW264.7. A produção de TNF-α foi maior em células estimuladas com vesículas do Pb3, ao contrário da expressão de IL-10 que foi maior ao estímulo com vesículas de Pb18. Acreditamos que nosso trabalho adiciona dados ao entendimento futuro da biologia das vesículas extracelulares, incluindo sua biogênese e função na interação patógeno-hospedeiro.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Caracterização dos efeitos da exposição aos componentes do cigarro sobre o controle neural do sistema cardiovascular em ratos normotensos e ratos espontaneamente hipertensos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011-06-29) Valenti, Vitor Engrácia [UNIFESP]; Ferreira, Celso [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Objectives: To evaluate the effects of sidestream cigarette smoke (SSCS) on neural control of cardiovascular system in normotensive and spontaneously hypertensive rats (SHR). Method: Wistar, Wistar-Kyoto rats (WKY) and SHR were exposed to SSCS for three weeks, five days per week, 180 minutes per day at a concentration of carbon monoxide between 100 and 300 ppm. Baroreflex was stimulated with a vasodepressor dose of sodium nitroprusside (NPNa, 50ìg/kg, iv) and with a pressor dose of phenylephrine (PE, 8ìg/kg, iv). In order to evaluate the effects of catalase inhibition into the fourth cerebral ventricle (4th V) on cardiovascular responses, we injected the catalase inhibitor 3-amino-1,2,4-triazole (ATZ, ìg/100ìL 0.01). Results: It was observed in Wistar rats exposed to SSCS that catalase inhibition caused more intense responses on basal HR and bradycardic peak. Central catalase inhibition affected in a higher intensity baseline HR and bradycardic peak WKY rats exposed to SSCS. On the other hand, in SHR SSCS exposure affected the tachycardic peak after central inhibition of catalase in a higher intensuty. Conclusion: Exposure to SSCS alters the sympathetic component of the baroreflex in WKY and SHR and caused more severe cardiovascular responses to catalase inhibition into the 4th V in Wistar and WKY rats.
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    Cininases hepáticas de rato: preparação e caracterização de uma serino-peptidade
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1978) Naffah-Mazzacoratti, Maria da Graca [UNIFESP]; Sampaio, Claudio Augusto Machado [UNIFESP]
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    Comparação entre os efeitos de lesões do nucleus basalis magnocellularis e do hipocampo na memória de ratos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1989) Oliveira, Maria Gabriela Menezes de [UNIFESP]; Bueno, Orlando Francisco Amodeo [UNIFESP]
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    Acesso aberto (Open Access)
    Efeito da 2,3,7,8 tetraclorodibenzo-p-dioxina (TCDD) na expressão gênica global da glândula mamária de ratas durante o desenvolvimento
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009) Pereira, Julia Santucci [UNIFESP]; Silva, Ismael Dale Cotrim Guerreiro da [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    OBJETIVO: Este estudo teve como objetivo verificar as modificações causadas na proliferação celular e na expressão gênica da glândula mamária de ratas com 21, 35, 50 e 100 dias que foram expostas à 2,3,7,8 tetraclorodibenzo-p-dioxina (TCDD) durante a gestação (tratamento pré-natal) ou durante a lactação (tratamento pré-pubertal). MÉTODOS: Para o tratamento pré-natal, ratas Sprague-Dawley prenhas receberam no 15º dia após a concepção dose única de 3,0µg de TCDD/kg através de gavagem. Para o tratamento pré-pubertal, ratas lactantes receberam no 14º e 17º dias pós-parto 6,67ng ou 20,0ng de TCDD/g. Animais controles receberam volume equivalente de óleo de gergelim. Ao atingiram 21, 35, 50 e 100 dias de idade, as filhotes fêmeas das ratas que receberam TCDD foram sacrificadas e tiveram as glândulas mamárias extraídas para estudo do índice de proliferação celular e expressão gênica. Para o cálculo de índice de proliferação celular, dez ratas por grupo receberam uma injeção intraperitoneal de 200 mg/kg de 5-bromo-2’-deoxiuridina (BrdU) e através de imunohistoquímica foram identificadas as células que estavam proliferando em cada estrutura da glândula mamária. Outras dez ratas por grupo tiveram o RNA da glândula mamária extraído, e este foi utilizado para o estudo de expressão gênica através de microarrays. Para determinar os genes diferencialmente expressos utilizou-se o teste-t bayesiano empírico moderado. Genes diferencialmente expressos (p<0,01) foram então categorizados de acordo com a função biológica ou via canônica de ação. Ainda, genes que se destacaram foram validados através de RT-PCR em tempo real. RESULTADOS: O tratamento pré-pubertal alterou a proliferação celular nas glândulas mamárias das ratas com 35, 50 e 100 dias, principalmente nos botões terminais (TEBs). A análise da expressão gênica demonstrou que o número máximo de genes diferencialmente expressos foi observado nos animais com 100 dias que receberam TCDD durante a gestação. No tratamento pré-pubertal, observou-se que a alta dose causou mais alterações do que a dose baixa. Cyp1b1 foi o gene que mais sofreu aumento de expressão em diferentes idades. A categorização dos genes desregulados de acordo com a função biológica mostrou que TCDD tem uma ampla ação, principalmente após o tratamento pré-pubertal com maior dose. As classes de genes mais afetadas foram proto-oncogenes, genes supressores de tumor e genes relacionados com o metabolismo de lipídeos. A via de sinalização mais atingida foi a via de sinalização do receptor de aril-hidrocarbono (AhR). Também se observou alterações na expressão de genes participantes da via de metabolização do estradiol, aumentando a produção de metabólitos prejudiciais ao DNA. CONCLUSÕES: O tratamento com TCDD resultou em mudanças na proliferação celular e na expressão gênica da glândula mamária das ratas. As mudanças gênicas observadas indicam que a célula mamária é submetida a estímulos genotóxicos ao mesmo tempo em que genes de reparo de DNA e supressores do crescimento tumoral ficam ativados no intuito de manter a estabilidade genômica.
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    Efeito inibitório do clorobutanol no útero e ducto deferente de rato
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1992) Wanderley, Almir Gonçalves [UNIFESP]; Jurkiewicz, Aron [UNIFESP]
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    Acesso aberto (Open Access)
    Efeitos da hiperprolactinemia no disco epifisário da tíbia de camundongos fêmeas ooforectomizadas após tratamento com esteóides sexuais
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2013) Wolff, Roberta Bastos [UNIFESP]; Soares Junior, Jose Maria [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/7115064118881203; http://lattes.cnpq.br/8685778521335260
    Objetivo: Avaliar os efeitos da hiperprolactinemia induzida pelo tratamento continuo por 50 dias com metoclopramida no disco epifisario da tibia de camundongos femeas, adultas e ooforectomizadas apos o tratamento com estrogenio, progesterona e testosterona. Materiais e metodos: 140 camundongos femeas, adultas, virgens, com 100 dias de idade e com peso entre 30-35 gramas, foram divididas aleatoriamente em 14 grupos constituidos por 10 animais cada: V - tratados com 0,2 ml de solucao salina 0,9%; H u tratados com 200μg de metoclopramida dissolvida em 0,2 ml de solucao salina 0,9%; Ovx/V u ooforectomizados e tratados com 0,2 ml de solucao salina 0,9%; Ovx/H u ooforectomizados e tratados com 200μg de metoclopramida dissolvida em 0,2 ml de solucao salina 0,9%; Ovx/V+E u ooforectomizados e tratados com 0,2 ml de solucao salina 0,9% e 2μg de propionato de estradiol; Ovx/H+E u ooforectomizados e tratados com 200μg de metoclopramida dissolvida em 0,2 ml de solucao salina 0,9% e 2μg de propionato de estradiol; Ovx/V+P u ooforectomizados e tratados com 0,2 ml de solucao salina 0,9% e 2mg de propionato de progesterona; Ovx/H+P u ooforectomizados e tratados com 200μg de metoclopramida dissolvida em 0,2 ml de colucao salina 0,9% e 2mg de propionato de progesterona; Ovx/V+T u ooforectomizados e tratados com 0,2 ml de solucao salina 0,9% e 90μg de propionato de testosterona; Ovx/H+T u ooforectomizados e tratados com 200μg de metoclopramida dissolvida em 0,2 ml de solucao salina 0,9% e 90μg de propionato de testosterona; Ovx/V+E+P u ooforectomizados e tratados com 0,2 ml de solucao salina 0,9% e 2μg de propionato de estradiol + 2mg de propionato de progesterona; Ovx/H+E+P u ooforectomizados e tratados com 200μg de metoclopramida dissolvida em 0,2 ml de solucao salina 0,9% e 2μg de propionato de estradiol + 2mg de propionato de progesterona; Ovx/V+E+P+T u ooforectomizados e tratados com 0,2 ml de metoclopramida e 2μg de propionato de estradiol + 2mg de propionato de progesterona + 90μg de propionato de testosterona; Ovx/H+E+P+T u ooforectomizados e tratados com 200μg de metoclopramida dissolvida em 0,2 ml de solucao salina 0,9% e 2μg de propionato de estradiol + 2mg de propionato de progesterona + 90μg de propionato de testosterona. Todos os grupos foram tratados por 50 dias consecutivos. No 50o dia, os animais foram decapitados para a coleta do sangue da aorta e este foi enviado para analise da dosagem serica do hormonio prolactina e esteroides sexuais estrogenio, progesterona e testosterona. As tibias retiradas foram processadas, descalcificadas e emblocadas em parafina. Cortes do disco epifisario da regiao distal das tibias foram obtidos, onde foram analisados e obtiveram-se as estatisticas das analises morfometricas, apos coloracao com os corantes Hematoxilina/Eosina e Tricromio de Massom e imunoexpressao da proteina anti-apoptotica Bcl-2. Resultados: A hiperprolactinemia, assim como o procedimento de ooforectomia bilateral diminuiram significativamente a proliferacao celular e formacao ossea e aumentaram a morte celular no disco epifisario. No entanto, o tratamento com o estrogenio aumentou a proliferacao celular, a progesterona aumentou a formacao ossea e a testosterona aumentou tanto a proliferacao celular quanto a formacao ossea, idependemente do processo de ooforectomia bilateral e a hiperprolactinemia. Quando o tratamento foi ministrado conjuntamente, sempre os resultados foram melhores do que quando ministrado isoladamente. Os resultados da imunoexpressao da proteina anti-apoptotica Bcl-2 evidenciou positividade nos condrocitos do final da zona de cartilagem proliferativa e inicio da zona de cartilagem hipertrofica, mostrando que a aplicacao exogena dos esteroides sexuais faz com que haja uma maior protecao a cartilagem, devido a retardar a morte celular nessas celulas e com isso, aumenta a formacao ossea. Conclusoes: A ooforectomia e a hiperprolactinemia levaram os camundongos femeas a terem maior impacto negativo na qualidade da morfologia ossea, devido a degeneracao da cartilagem, causada por maior quantidade de morte celular programada. O tratamento com os tres esteroides sexuais associados produziu os resultados mais positivos sobre a morfologia e crescimento osseo do disco epifisario, do que quando utilizados isoladamente, independentemente do processo de ooforectomia bilateral e do tratamento com a metoclopramida
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    Acesso aberto (Open Access)
    Efeitos da privação de sono sobre a plasticidade hipocampal: a importância dos receptores AMPA
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Dubiela, Francisco Paulino [UNIFESP]; Hipólide, Débora Cristina [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Diversos estudos mostram que a falta de sono interfere na formacao de novas memorias, especialmente as dependentes do hipocampo. Em consonancia, ha trabalhos que mostram que a privacao de sono (PS) interfere sobre o ritmo teta hipocampal (4 a 12 Hz), mas nao ha dados consistentes sobre seus efeitos durante a aprendizagem de tarefas de memora. Ha evidencias indiretas que sugerem o envolvimento de receptores glutamatergicos ionotropicos do tipo AMPA, que constituem um fator essencial tanto para a aprendizagem de tarefas como para a plasticidade hipocampal. Tratamentos com farmacos que atuam sobre os receptores AMPA tem se mostrado eficazes na prevencao de prejuizos de memoria induzidos por patologias neurais, bem como na modulacao do ritmo teta hipocampal. Portanto, o objetivo do presente estudo foi investigar o envolvimento dos receptores AMPA hipocampais sobre os prejuizos de memoria de ratos, induzidos pela privacao de sono. Na primeira etapa, foram realizadas analises da marcacao autorradiografica de receptores AMPA e da transcricao da subunidade GluR1 apos a privacao de sono, bem como experimentos farmacologicos com potenciador (aniracetam) e antagonista (GYKI 52466) de receptores AMPA, com o proposito de prevenir os prejuizos apresentados por ratos privados de sono na tarefa de esquiva inibitoria. Na segunda etapa, foi realizada a caracterizacao do ritmo teta hipocampal e seus subtitpos (teta tipo 1 e tipo 2) durante uma tarefa de reconhecimento de objetos em apos PS. Na primeira etapa, foi observado uma diminuicao da marcacao autorradiografica de receptores AMPA especificamente na formacao hipocampal de ratos privados de sono por 96 h, que se normaliza com uma recuperacao de sono por 24 h. Por outro lado, nao foram encontradas alteracoes na hibridizacao in situ da subunidade GluR1 hipocampal. Dados de experimentos farmacologicos mostraram que a administracao aguda de aniracetam (100 mg/kg) foi eficaz na prevencao de prejuizo de desempenho de esquiva inibitoria de ratos privados de sono, ao passo que tratamentos agudo e cronico com GYKI 52466 nao surtiram efeito. Na segunda etapa, ratos com implantes de eletrodos na formacao hipocampal desempenharam uma tarefa de reconhecimento de objetos apos PS de 72 h, e apresentaram prejuizo nessa condicao. A analise da potencia do ritmo teta hipocampal mostrou que o ritmo teta tipo 2 esta reduzido durante o treino da tarefa, e que se normaliza na ocorrencia do teste apos a recuperacao de sono. A partir dos dados obtidos nas duas etapas, conclui-se que: 1) a privacao de sono reduz a marcacao de receptores AMPA hipocampais, por meio de modificacoes pos-transcricionais de suas subunidades, e que a recuperacao de sono normaliza esse efeito; 2) o potenciador aniracetam previne o prejuizo de memoria de ratos privados de sono na tarefa de esquiva inibitoria; 3) a privacao de sono modifica o ritmo teta hipocampal durante a aprendizagem de uma tarefa de reconhecimento de objetos, e sugere a participacao dos receptores AMPA hipocampais nessa condicao
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    Efeitos da privação de sono sobre parâmetros cardiovasculares em ratos machos e fêmeas
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011-06-29) Tenório, Neuli Maria [UNIFESP]; Andersen, Monica Levy [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Curtailment of sleep time is a characteristic of modern society, and the reciprocal association between duration of sleep and weight gain has been under scrutiny as of late. The consequences of such factors upon the cardiovascular system remain to be fully elucidated, particularly along a full life span. Moreover, the consequences of sleep deprivation may also be influenced by the gender. The current study thus purported to examine the impact of acute sleep deprivation associated to obesity in female Zucker rats of different ages (Paper 1) and to compare the effects of paradoxical sleep deprivation (PSD) and chronic sleep restriction (SR) in male and female eutrophic rats (Paper 2) upon the cardiovascular (Papers 1 and 2) and hormonal (Paper 2 ) parameters. For the experiments described in Paper 1 lean and obese female Zucker rats 3, 6, and 15 months old were distributed into either control groups (CTRL, homecage) or sleep deprived (SD). For the experiments of Paper 2 adult female and male Wistar rats were distributed in either control groups (CTRL, home-cage) or in Paradoxical Sleep Deprivation for 96h groups (PSD-96h) or Sleep Restriction for 21 days groups (SR 21 days). In both experiments the subjects were anesthetized according to respective SD protocol or equivalent time in the CTRL groups, after which a catheter was placed in their femoral artery and vein. The baroreflex sensibility index was measured by means of phenilephrine (bradicardiac response) and sodium nitroprussiate (taquicardiac response). For the experiments conducted for Paper 2 a different group of subjects was used for blood harvesting to assess the concentrations of adrenocorticotrophic hormone (ACTH). In Paper 1 we observed that obesity resulted in dysfunctional taquicardia in subjects from 3 months of age and on. At 6 and 15 months of age the bradicardiac and taquicardiac response were significantly smaller in obese subjects when compared to respective lean groups. At 15 months of age the interaction between obesity, SD and age caused the greatest consequences in the cardiovascular system as arterial. Results of Paper 2 show that the average arterial pressure was significantly higher in the SR group when compared to the CTRL group in both genders. In females, cardiac frequency was significantly higher after PSD when compared to respective controls. The SR protocol attenuated the vagal baroreflex response similarly in males and females. The sympathetic baroreflex response was attenuated in the PSD and SR groups, but in females this parameter was affected only after PSD. No significant difference in relation to gender was observed in any of the cardiovascular parameters. PSD did increase ACTH concentrations significantly when compared to controls of both genders. The body of results yielded by both studies suggests that different periods of lost sleep lead to specific consequences in cardiovascular and hormonal parameters, and such effects were similar in male and female rat subjects.
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    Efeitos da suplementação de quiabo e/ou treinamento físico em animais com Síndrome Metabólica
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2019-06-05) Moura, Elizabeth de Orleans Carvalho de [UNIFESP]; Medeiros, Alessandra [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Metabolic syndrome (MS) is an association of at least three cardiovascular risk factors, such as hypertension, type 2 diabetes mellitus, obesity, among others. Inadequate feeding, genetics, and sedentarism are among the main factors that contribute to the development of MS. This study investigated the effects of consumption of okra (O) for six weeks, five days a week, twice a day and/or exercise training (ET) for six weeks, five days a week, one hour a day, on 14- week-old male Zucker rats. Forty male Zucker rats were used, eight of which were lean and were part of the lean control group (CTL) and the other thirty-two were obese and were randomly divided into obese control group (MS, n = 8), okra group (O, n = 8), exercise training group (ET, n = 8) and the association of the two therapies group (ETO, n = 8). Body mass, glycemic, triglyceride, total cholesterol and blood pressure profiles were analyzed; maximum tolerance to physical effort; metabolic cage; liver mass, glycogen, levels of cytokines (TNF-α and IL-10) and levels of Alanine aminotransferase and Aspartate aminotransferase; soleus and EDL muscles mass and glycogen. The results were expressed as mean ± standard error of the mean (SEM) and statistically analyzed ANOVA (one or two-way), when necessary. In all the presented results 5% was adopted as limit of statistical significance (p <0.05). It was observed that the body mass, the glycemic and hemodynamic profile weren’t diferent between the groups. On the other hand, the O group had lower triglyceride levels than CTL and MS group. Regarding to the total cholesterol, both therapies prevented the significant increase at the end of the experiment. In the physical exercise test, ET and ETO groups presented better results. Regarding to the hepatic parameters, the liver mass was not different between the groups, however, glycogen was higher in ET group comparing to the CTL group and the interleukin 6 was higher in MS, O and ET comparing to the CTL group. The other cytokines analyzed weren’t different between the groups, the same occurred with the liver damage analysis. In the muscular parameters, the masses of the soleus and EDL muscles showed no difference between the groups, however, glycogen had a higher concentration in the soleus in ET and ETO comparing to CTL and MS group. These results lead us to conclude that both therapeutic interventions offeredbenefits for the animals with MS, but their association potentiated these results and seems to be the most indicated.
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    Efeitos do tratamento com corticosterona sobre medidas de ansiedade, neurogenêse hipocampal e imunorreatividade a proteina FOS
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Diniz, Leila [UNIFESP]; Viana, Milena de Barros [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/3053794724319601; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Evidências previas indicam que altos níveis de corticosterona (CORT) aumentam respostas de defesa a estímulos aversivos, como a esquiva e o congelamento. Em contraste, a CORT administrada cronicamente não altera comportamentos defensivos apresentados em resposta a exposicao ao predador, como a fuga. Dado que diferentes respostas comportamentais de defesa tem sido associadas com transtornos de ansiedade especificos, a observacao de que a CORT cronica altera somente alguns comportamentos defensivos pode ser de relevancia para o melhor entendimento da fisiopatologia da ansiedade. No presente trabalho foram investigados os efeitos da administração cronica de CORT em ratos Wistar machos (300 g), atraves do implante cirurgico de pellets de CORT (200 mg, liberacao ao longo de 21 dias), sobre as respostas de esquiva e fuga do labirinto em T elevado (LTE). Estes dois comportamentos defensivos tem sido associados com o transtorno de ansiedade generalizada (TAG) e o transtorno do panico (TP), respectivamente. Uma vez que o antidepressivo tricíclico imipramina e utilizado com sucesso para o tratamento dos dois quadros clínicos, os efeitos do tratamento cronico com imipramina (15 mg, ip) tambem foram investigados. Para a melhor compreensao dos mecanismos neurobiologicos relacionados aos efeitos comportamentais acarretados pelas drogas analisamos a imunorreatividade a proteína fos (fos-ir), com o objetivo de mapear as áreas encefálicas ativadas pela administracao cronica de CORT e imipramina. Tambem foi avaliado o numero de celulas positivas para o marcador de neurogenese doublecortina (DCX) no hipocampo e mensurada a concentracao plasmatica de CORT no 21° dia de tratamento. Os resultados sugerem que a administracao cronica de CORT facilita o desempenho da tarefa de esquiva do LTE, um efeito ansiogenico, sem alterar as respostas de fuga. A imipramina reverteu de forma significativa os efeitos ansiogenicos da CORT, embora, por si so, a droga nao tenha apresentado efeitos ansioliticos. Alem disso, a droga diminuiu a atividade locomotora dos animais medida em um campo aberto. A CORT aumentou a fos-ir no septo ventrolateral, na amigdala medial e no nucleo paraventricular do hipotalamo, e diminuiu a fos-ir na coluna lateral da substancia cinzenta periaquedutal. A imipramina por outro lado, aumentou a fos-ir na amigdala medial e diminuiu no hipotalamo anterior. O tratamento com CORT tambem diminuiu o numero de celulas positivas para DCX no hipocampo ventral e dorsal e manteve os niveis plasmaticos deste glicocorticoide elevado durante todo o tratamento. A imipramina reverteu os efeitos da CORT. Estes dados sugerem que os efeitos comportamentais da CORT e da imipramina sao mediados por circuitos neurais especificos, e por vezes sobrepostos, o que pode ser relevante para um melhor entendimento da fisiopatologia do TAG e do TP.
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    Envolvimento do sistema colinérgico nas estratégias utilizadas por ratos durante a aprendizagem de uma tarefa de discriminação no labirinto em T
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011) Soares, Juliana Carlota Kramer [UNIFESP]; Oliveira, Maria Gabriela Menezes [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Diversos estudos sugerem a existência de múltiplos sistemas de memória. Tanto em humanos, como em animais experimentais, existem evidências de que a aprendizagem espacial depende da integridade do hipocampo. Já a aprendizagem egocêntrica depende do estriado e estruturas relacionadas. No presente estudo, utilizou-se a tarefa de discriminação no labirinto em T, que é um dos paradigmas experimentais no qual a contribuição destes sistemas neurais pode ser observada. Esta tarefa implica na utilização de um labirinto em T, no qual os ratos são treinados a ir para o lado esquerdo ou direito para obter uma recompensa. Os animais podem realizar a tarefa utilizando as diferentes estratégias de aprendizagem que dependem do hipocampo e do estriado. Uma vez que a ACh parece exercer um importante papel na modulação destes sistemas de memória, o presente estudo investigou a participação do sistema colinérgico central nas estratégias utilizadas por ratos, durante a aprendizagem da tarefa de discriminação no labirinto em T. Os resultados obtidos mostraram que há, respectivamente, uma dupla dissociação dos efeitos da escopolamina no hipocampo e no estriado nas tarefas de discriminação espacial e egocêntrica no labirinto em T. A administração da escopolamina diretamente no hipocampo dorsal causou prejuízo no desempenho dos ratos submetidos à versão espacial da tarefa de discriminação no labirinto em T, mas não afetou a versão egocêntrica, quando esta foi realizada na ausência de pistas espaciais. Já a administração da escopolamina na região dorsolateral do estriado prejudicou a versão egocêntrica, sem interferir na versão espacial da tarefa de discriminação do labirinto em T. No entanto, quando os animais dispuseram de ambos os tipos de estratégias para realizar a tarefa, a escopolamina não afetou o seu desempenho. Em conjunto, esses resultados indicam que sistema colinérgico central exerce uma função modulatória sobre o hipocampo e o estriado, corroborando a existência de sistemas múltiplos de memória.
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    Estudo comparativo entre a sutura contínua e a com pontos separados na parede abdominal de ratos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1997) Tognini, João Ricardo Filgueiras [UNIFESP]; Goldenberg, Saul [UNIFESP]
    O objetivo deste experimento foi comparar a sutura continua e a sutura com pontos separados no fechamento da parede abdominal. Foram utilizados 48 ratos machos Wistar, submetidos a laparotomia com tecnica de dierese padronizada , 24 submetidos a sutura da parede abdominal por tecnica continua e 24 com pontos separados, com fio polidioxanona. No 7º e 14º dia de pos-operatorio foram submetidos a eutanasia 12 animais de cada grupo e deles retirados a camada musculo-fascial abdominal envolvendo a cicatriz operatoria e dividida aleatoriamente em dois segmentos (cranial e caudal), um para ser submetido a avaliacao da forca de rotura mediante o uso de tensiometro e outro para exame histologico. Nos segmentos destinados ao tensiometro nao foram retiradas as suturas e os mesmos foram submetidos a forca crescente, aplicada perpendicularmente a cicatriz ate ocorrer a rotura da mesma, com seus valores anotados. Os segmentos levados ao exame histologico foram corados por Hematoxilina-Eosina e Picrosirius Red F3BA, sendo feito observacao qualitativa do processo cicatricial e quantitativa do colageno. Os resultados encontrados foram analisados estatisticamente. Concluiu-se que no 7º dia de pos operatorio a parede abdominal suturada com pontos separados e mais resistente, porem sem diferencas significantes na quantidade de colageno, do que a suturada por tecnica continua, e no 14º dia, ambas se equivalem nos dois parametros estudados, em ratos