Navegando por Palavras-chave "Proteínas de plasma seminal"

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    Acesso aberto (Open Access)
    Análise proteômica do plasma seminal de homens com obesidade com e sem alteração nos parâmetros espermáticos
    (Universidade Federal de São Paulo, 2024-09-10) Carvalho, Renata Cristina de [UNIFESP]; Fraietta, Renato [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/1545035937368744; http://lattes.cnpq.br/2678949812673271
    Objetivo: Comparar a expressão de proteínas seminais entre amostras de homens com obesidade com e sem alterações nos parâmetros espermáticos. Ainda, verificar se as proteínas justificam a alteração espermática e se tal prejuízo também é refletido nos aspectos funcionais do espermatozoide. Métodos: Neste estudo observacional, homens com idade entre 20 e 50 anos foram distribuídos em 3 grupos de acordo com sua porcentagem de gordura corporal e características espermáticas, sendo: grupo controle eutrófico, obesidade sêmen normal e obesidade sêmen alterado. A coleta da amostra seminal aconteceu após 2 a 7 dias de abstinência ejaculatória; com ela realizou-se a análise seminal convencional, que auxiliou na distribuição dos grupos, análise funcional dos espermatozoides (integridade do DNA, atividade mitocondrial e integridade do acrossoma) e, com a alíquota restante, centrifugações foram aplicadas para separação do plasma seminal. Assim, o plasma seminal obtido foi utilizado para avaliação dos níveis proteicos; para tal, quantificamos o total de proteínas, preparamos cada amostra e realizamos a análise proteômica sem alvo definido usando espectrometria de massas (LC-MS/MS). A análise estatística dos dados gerais dos participantes e das variáveis seminais foi realizada pelo software SPSS incluindo avaliação de normalidade, homogeneidade, além de teste General Linear Model (GLM) com post-hoc de Sidak, sempre considerando p menor que 0,05. Por fim, os dados gerados pela proteômica foram utilizados para identificação das proteínas diferencialmente representadas entre os grupos (teste ANOVA com post-hoc LSD realizado pelo software MetaboAnalyst). Resultados: 73 homens participaram do estudo (19 no grupo controle eutrófico, 33 em obesidade sêmen normal e 21 em obesidade sêmen alterado) apresentando uma média de idade de 31,05, 33,88 e 36,67 anos, respectivamente. Conforme esperado, os grupos de obesidade apresentaram maior peso, porcentagem de gordura corporal e IMC em relação ao grupo eutrófico, mas sem diferença entre si. A análise seminal convencional indicou resultados significativos para as variáveis motilidade progressiva, motilidade não progressiva, imóveis, concentração e contagem espermática, morfologia, vitalidade e total de espermatozoides móveis morfologicamente normais (MMN) sendo que os piores valores foram observados sempre no grupo obesidade sêmen alterado com exceção da variável motilidade não progressiva na qual os resultados significativos foram entre os grupos de eutróficos e obesidade sêmen normal (este último apresentando menor porcentagem de espermatozoides com motilidade não progressiva). Em relação aos aspectos funcionais dos espermatozoides, o grupo obesidade sêmen alterado apresentou maior porcentagem de espermatozoides com DNA totalmente fragmentado e maior prejuízo na atividade mitocondrial espermática; já a integridade do acrossoma foi pior para os grupos de obesidade em relação aos homens eutróficos. Por fim, na análise proteômica foram encontradas 746 proteínas sendo que 30 delas se mostraram diferencialmente representadas entre os grupos; no grupo obesidade sêmen alterado verificamos que 3 proteínas estavam praticamente ausentes (Kunitz-type protease inhibitor 3, Ovochymase-2, Dipeptidase 3). Além disso, as outras proteínas apresentaram resultados significativos variados entre os grupos sempre com menor concentração nos grupos de obesidade e ainda menor no grupo de obesidade sêmen alterado. Conclusões: Homens com obesidade e alteração nas características espermáticas podem apresentar também maior prejuízo nos aspectos funcionais dos seus gametas e nas vias moleculares seminais.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Validação de um painel de biomarcadores proteicos no plasma seminal de adolescentes com e sem varicocele
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2016-04-19) Belardin, Larissa Berloffa [UNIFESP]; Cedenho, Agnaldo Pereira [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/1386922092780490; http://lattes.cnpq.br/4341099347238414; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Objective: To verify the seminal levels of potential biomarkers for testicular changes in adolescent varicocele. The specific objectives were to verify if the presence of varicocele and seminal alterations can alter the levels of the following proteins: Cab45 (45 kDa calcium-binding protein); LEFTY1 (Left-right determination factor 1); DNase I (deoxyribonuclease-1); PAP2-Alpha (Lipid phosphate phosphohydrolase 1); IFGBP7 (Insulin-like growth factor binding protein-7); IGHG3 (Ig gamma-3 chain C region); CRISP-3 (Cysteine-rich secretory protein 3). Method: This observational study included 61 adolescents, aged 15 to 17 years old with full sexual maturity (Tanner V), which were divided into 3 groups: control (without varicocele, n=20); VSN (with varicocele, normal semen analysis, n=22); and VSA (with varicocele and altered semen analysis, n=19). The adolescents collected one seminal sample after 2 to 5 days of ejaculatory abstinence. After semen liquefaction semen was centrifuged, in order to separate the seminal plasma from cellular constituents. Total protein in each sample was then quantified, and a volume correspondent to 50 ?g of protein for each patient was used for Western blotting for the follow proteins: Cab 45, LEFTY1, DNase I, PAP2-Alpha, IGFBP7, IGHG3 and CRISP-3 (all were normalized to the protein Epididymis Secretory Sperm Binding protein 67p Li [DJ-1]). Results: We observed lower sperm concentration (million/mL) and morphology (% normal sperm) in the VSA group when compared to the other groups. There was a decrease in the levels of Cab45 in both groups of adolescents with varicocele (VSN and VSA), with a lowest value in the VSA group. DNase I levels were lower in the group of adolescents with varicocele and altered semen analysis (VSA). There was an overexpression of IGFBP7 in the groups with varicocele when compared with control groups, and an overexpression of the two isoforms of CRISP-3 protein in the VSA group. Conclusion: Proteomics of seminal plasma reflects changes in testicular function in the adolescent varicocele. The levels of proteins LEFTY1, PAP2-Alpha, IGHG3 are not altered in the presence of a varicocele. Cab45 levels are decreased in the presence of varicocele; DNase I levels are decreased in the presence of seminal alterations and varicocele. Conversely, IGFBP7 is a positive marker of varicocele, and CRISP-3 is a positive marker of varicocele and altered semen quality. These results may help in the future to determine the medical management for early surgical intervention in varicocele.