Navegando por Palavras-chave "Antimicrobiano"

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    Acesso aberto (Open Access)
    Atividade antimicrobiana de extratos biológicos provenientes de actinomicetos de diferentes biomas brasileiros
    (Universidade Federal de São Paulo, 2023-01-04) Coelho, Carolina Forestieri [UNIFESP]; Vasconcellos, Suzan Pantaroto de [UNIFESP]; Ferreira, Karen Spadari [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/9765455719275677; http://lattes.cnpq.br/4254240006926714; http://lattes.cnpq.br/2097970674134397
    Um vasto número de microrganismos vem contribuindo no desenvolvimento de processos biotecnológicos, devido à sua inerente habilidade à produção de metabólitos secundários bioativos, incluindo-se fármacos, combustíveis, insumos e enzimas/proteínas. Actinomicetos, principalmente os afiliados ao gênero Streptomyces sp., têm se destacado pela crescente produção de compostos bioativos, sendo caracterizados como microrganismos habilidosos a sobreviverem em condições atípicas, tais como elevadas temperaturas, condições de salinidade/ pH adversas, além de escassez de água. Nesse contexto, o presente estudo teve como objetivo a avaliação de isolados de actinomicetos, obtidos a partir de diferentes amostras ambientais de biomas brasileiros, quanto à produção de compostos bioativos de interesse à investigação em diferentes frentes de trabalhos de pesquisas. Foram realizadas análises de MIC (Concentração Mínima Inibitória) de maneira a avaliar-se extratos orgânicos obtidos a partir dos cultivos microbianos. Foi possível a seleção de um isolado de Streptomyces sp., denominado como AC 166, por conta de suas habilidades enzimáticas demonstradas em trabalhos preliminares realizados por nosso grupo de pesquisas BIOMICRO. Tal isolado foi analisado com relação ao seu transcriptoma. Fizemos o uso da ferramenta Bacterial and Viral Bioinformatics Resource Center (BV-BRC - https://www.bv-brc.org/) para a avaliação do conteúdo proteico e caracterização de suas categorias funcionais. As análises de MIC do extrato orgânico obtido a partir do isolado AC166 foram realizadas frente ao patógeno Escherichia coli. A análise do transcriptoma permitiu a identificação de algumas características funcionais que podem estar atreladas às habilidades do AC 166, incluindo-se sua possível habilidade à produção de genes de resistência antibiótica. Futuramente, pretende-se realizar o entrelaçamento dos dados obtidos a partir das análises do transcriptoma, com os resultados a serem coletados por meio das caracterizações das moléculas que compõem os extratos orgânicos provindos dos cultivos do isolado AC166, de maneira a verificar sobre os potenciais bioativos que podem ser produzidos por tal linhagem de Streptomyces sp.
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    Acesso aberto (Open Access)
    ATP sulfurilase: sua relação com o fator de transcrição Cys3 e a regulação da biossíntese dos aminoácidos sulfurosos em Cryptococcus neoformans
    (Universidade Federal de São Paulo, 2022-01-22) Meneghini, Mariana Reis [UNIFESP]; Pascon, Renata Castiglioni [UNIFESP]; Martho, Kevin Felipe; http://lattes.cnpq.br/3222282659352681; http://lattes.cnpq.br/4203540318082044; http://lattes.cnpq.br/1490092712517613
    C. neoformans é um fungo oportunista que acomete principalmente pacientes imunocomprometidos causando infecções letais como a meningite criptococócica. Em decorrência da resistência deste patógeno aos medicamentos atuais, da escassez de antifúngicos e de tratamentos ineficazes, o estudo sobre os mecanismos de virulência e as interações entre patógeno e hospedeiro são de grande importância médica. Os fungos são eucariotos, assim como os seus hospedeiros, tornando muito difícil a identificação de novos alvos farmacológicos que tenham alta toxidade seletiva. A via de síntese de aminoácidos sulfurosos é exclusiva das bactérias, plantas, parasitas e dos fungos, é de extrema importância para a sobrevivência de C. neoformans in vitro e in vivo e representa um potencial alvo de inibidores com alta toxicidade seletiva. Os mecanismos de regulação desta rota de biossíntese têm sido muito estudados, sendo que o fator de transcrição central, Cys3, controla a ativação de vários genes desta via biossintética. Nossos estudos anteriores de imunoprecipitação e espectrometria de massas apontaram que Cys3 faz parte de um complexo contendo duas fosfatases (calcineurina subunidade catalítica e regulatória e a fosfatase Gpp2), as quais foram confirmadas como sendo parte deste complexo regulatório. Uma quarta proteína, a ATP sulfurilase foi identificada, mas ainda não havia sido confirmada como participante deste complexo. A primeira etapa deste trabalho confirmou a hipótese de que a ATP sulfurilase codificada pelo gene MET3 interage fisicamente com a proteína Cys3 e com a subunidade regulatória da calcineurina (Cna1-ߡC) pela técnica de interação entre proteínas por duplo híbrido em S. cerevisiae. A segunda parte deste trabalho teve por objetivo deletar o gene MET3 na linhagem contendo a construção Gfp-Cys3. Foram feitos experimentos de deleção gênica, mas devido às restrições para o trabalho presencial durante a pandemia do Covid-19 não foi possível cumprir todos os objetivos propostos. Neste trabalho de conclusão de curso serão apresentados os resultados de deleção gênica e análise fenotípica dos transformantes obtidos por biolística e posteriormente por eletroporação usando o sistema CRISPR-Cas9.
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    Desenvolvimento de curativo a base de kefiran e própolis em matriz polimérica para recobrimento de lesões teciduais
    (Universidade Federal de São Paulo, 2023-12-08) Martins, Eduardo Ferreira [UNIFESP]; Esposito, Elisa [UNIFESP]; Passador, Fábio Roberto [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/0152213852695153; http://lattes.cnpq.br/0121461197043560; http://lattes.cnpq.br/0027792317209654
    Entre 2008 e 2016 o Departamento de Informática do Sistema Único de Saúde (SUS) registrou um número de 37.565.785 procedimentos cirúrgicos realizados pelo Sistema. Dentre estes procedimentos, 1,63% resultaram na morte do paciente, podendo ser quase a metade deste número atribuída a infecções nosocomiais decorrentes dos procedimentos pós-operatórios. Outro dado importante relacionado a lesões cutâneas é o número de pessoas que tratam queimaduras por ano no Brasil, que foi de aproximadamente 1 milhão de pacientes em 2017, dos quais cerca de 2500 vieram a óbito. Dentre as causas das mortes estão a profundidade da queimadura, a demora no socorro e, principalmente, a dificuldade em tratar determinadas lesões que podem acarretar processos infecciosos. Desta forma têm-se duas situações claras e pujantes da necessidade do desenvolvimento de novos materiais e substâncias que possam auxiliar nos tratamentos de injúrias cutâneas e garantir uma melhor recuperação e qualidade de vida para o paciente. A própolis é uma resina produzida por abelhas que pode ser utilizada na confecção de novos materiais, uma vez que apresenta propriedades favoráveis, sendo elas atividade antimicrobiana, antifúngica, cicatrizante e antioxidante, podendo ser um componente promissor para curativos. Um segundo produto de origem natural avaliado é o kefiran, um exopolissacarídeo produzido por grãos de kefir de leite no seu processo fermentativo com elevado potencial antimicrobiano, antinflamatório e cicatrizante. A associação destes compostos possui elevado interesse biotecnológico para busca da promoção da saúde, tendo sido estudada através da sua dispersão em uma emulsão farmacológica e utilizando um filme polimérico fino como matriz de suporte. Os extratos de própolis foram produzidos e caracterizados quanto às suas propriedades físico-químicas, bem como kefiran, produzido por microrganismos isolados dos grãos de kefir, as bases e os filmes poliméricos, de modo a fornecer informações acerca das possibilidades de sua associação na formação de um curativo bioativo para aplicação no tratamento de lesões cutâneas. As caracterizações se basearam em propriedades estruturais, térmicas, organolépticas e de propriedades biológicas, dentre outras caracterizações realizadas. Os protocolos de produção das amostras de extrato de própolis originaram diferentes extratos, sendo o extrato etanólico de própolis verde o principal candidato para a aplicação pretendida, diante de seu teor de extrato seco (69,14%) e boa atividade antimicrobiana, com índices de inibição acima de 90%. O kefiran foi produzido e caracterizado com sucesso utilizando culturas de microrganismos isolados, apresentando elevado índice de pureza (97,95%) e rendimento (1,33g/L), condizente com o esperado e proporcionando, também, boa atividade antimicrobiana (também com índices de inibição superiores a 90% a depender da concentração). Os filmes poliméricos produzidos apresentaram boas propriedades térmicas e coeficientes de barreira adequados para a aplicação em pele, sendo o filme produzido a partir da blenda dos polietilenos de alta densidade (HDPE) e linear de baixa densidade (LLDPE) o detentor do melhor coeficiente de permeseletividade encontrado nas amostras testadas (3,2 Barrer). Deste modo, foi possível associar o extrato de própolis e o kefiran à duas bases farmacológicas (anidra e gel) de modo a produzir um novo material com elevado interesse tecnológico e farmacêutico.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Estudo de nanopartículas metálicas e bimetálicas para aplicações em medicina e agricultura
    (Universidade Federal de São Paulo, 2024-02-29) Lopes, Isabela Santos [UNIFESP]; Courrol, Lilia Coronato [UNIFESP]; Caseli, Luciano [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/892916291017293; http://lattes.cnpq.br/7225675813566195; http://lattes.cnpq.br/8652646215861192
    Este trabalho descreve a síntese, caracterização e aplicação de nanopartículas (NPs) de prata, cobre e ouro, sintetizadas por fotorredução com os aminoácidos ácido aminolevulínico (ALA) e sua forma metilada ácido aminolevulinato de metila (MALA) e o ácido gama aminobutírico (GABA). As nanopartículas foram caracterizadas por espectroscopia no UV-Vis, microscopia eletrônica de transmissão (MET), potencial Zeta, espectroscopia do infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e microscopia de força atômica. O potencial de aplicação das nanopartículas sintetizadas na agricultura e medicina foi avaliado. Os resultados analisados mostram nanopartículas em tamanho nanométrico com alta estabilidade coloidal com potencial Zeta negativo acima de -25.0 mV, formato esférico no caso das nanopartículas de prata, cobre e ouro com ALA, MALA, GABA e ALAGABA. As nanopartículas de prata e cobre foram aplicadas em nanopriming com sementes de girassol. Resultados de fluorescência da clorofila, decaimento do tempo de vida, fator de crescimento da planta e percentual de germinação foram obtidos e mostraram o aumento da intensidade de fluorescência da clorofila e no fator de crescimento das mudas em comparação com sementes tratadas com água. A eficácia das nanopartículas de prata e cobre como agentes antimicrobianos foi testada as com as bactérias E. coli e S. aureus e os fungos fitopatogênicos A. grandis, C. truncatum, C. cassiicola e F. oxysporum. A citotoxicidade das NPs de ouro revestidas com ALA, MALA e GABA foram estudadas em células MCF-7 para a realização da terapia com raio x de baixa energia. Com este trabalho obtivemos uma melhor compreensão dos mecanismos envolvidos no processo de síntese das NPs, nas aplicações médicas e o papel fundamental da atuação das NPs de ouro com ALA, MALA e GABA. NPs de prata e cobre se mostraram promissoras como carreadores do ALA e GABA para a célula vegetal, com ação antimicrobiana satisfatória contra as bactérias e fungos estudados e em nanopriming de sementes.
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    Funcionalização De Nanopartículas Metálicas Com Diferentes Combinações De Peptídeos Para Aplicações Como Agentes Antimicrobianos E Antitumorais
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-11-27) Formaggio, Daniela Maria Ducatti [UNIFESP]; Tada, Dayane Batista [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Metal nanoparticles (NPs) have showing promising applications in the biomedical field. These NPs have unique physicochemical properties, as well as great chemical versatility on their surface, which allows new modifications and incorporations of different molecules. In addition, they have the advantage of accumulating preferentially in tumor tissues due to the enhanced permeability and retention effect, known as EPR. The incorporation of therapeutic peptides to the surface of metallic NPs could be a promising strategy to improve their applications as therapeutic molecules. Peptides are highly selective molecules. However, they are also vulnerable to some in vivo pharmacologic barriers limiting their effective action, including low bioavailability or deactivation by enzymes. In this work, three types of metal NPs were prepared: gold NPs (AuNPs), silver NPs (AgNPs) and bimetallic NPs composed by gold and platinum (AuPtNPs). NPs were characterized by ultraviolet-visible spectroscopy (UV-Vis), dynamic light scattering (DLS), transmission electron microscopy (TEM), inductively coupled plasma optical emission spectroscopy (ICP-OES) and X-ray diffraction (XRD). Aiming at biomedical applications, NPs were firstly evaluated regarding their toxicity by cell viability assays using human fibroblast cells (HS68 cell line) and embryonic toxicity test in zebrafish (Danio rerio). The assays showed better biocompatibility of AuNPs compared to AgNPs and AuPtNPs. Thus, AuNPs were studied as carriers of antitumor and antimicrobial peptides as an alternative approach of overcoming the pharmacokinetic limitations inherent in these molecules. Two peptides derived from complementary monoclonal antibodies (CDRs) with amino acid sequences YISCYNGATSYNQKFK (C7H2) and RASQSVSSYLA (HuAL1) were previously identified by collaborators of this project demonstrating excellent toxicity against tumor cells, antimetastatic activity as well as a potent antimicrobial activity. The peptides were individually conjugated to the AuNPs surface, forming the AuNPsC7H2 and AuNPsHuAL1 NPs. The peptides were also linked together forming the AuNPsC7H2HuAL1. The in vitro results suggested an improved antitumor activity for AuNPsHuAL1 and AuNPsC7H2HuAL1 against metastatic melanoma tumor cell line (B16F10-Nex2) compared to the peptides in solution. In vivo, the peptide combination of HuAL1 and C7H2 was even more efficient when linked to AuNPs. The antimicrobial activity of the three NPs separately as well as the peptide functionalized AuNPs were also evaluated employing microdilution test against strains of Candida Albicans, Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus. The results confirm an intrinsic antimicrobial action of the three metal NPs and an optimal antibiotic action for AuNPsHuAL1.