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Title: Drifter technique: a new method to obtain metaphases in Hep-2 cell line cultures
Authors: Lima, Eleonidas Moura
Rissino, Jorge Dores
Guimarães, Adriana Costa
Overal, David James
Khayat, André Salim
Souza, Patrícia Carvalho de
Christofolini, Denise Maria [UNIFESP]
Smith, Marilia de Arruda Cardoso [UNIFESP]
Burbano, Rommel Rodríguez [UNIFESP]
Universidade Federal do Pará Centro de Ciências Biológicas Departamento de Biologia
Universidade de São Paulo (USP)
Universidade Federal do Pará Centro de Ciências Biológicas Departamento de Genética
Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Keywords: Hep-2 cell line
drifter technique
mitotic index
Issue Date: 1-Jul-2005
Publisher: Instituto de Tecnologia do Paraná - Tecpar
Citation: Brazilian Archives of Biology and Technology. Instituto de Tecnologia do Paraná - Tecpar, v. 48, n. 4, p. 537-540, 2005.
Abstract: The Hep-2 cell line is derived from laryngeal carcinoma cells and is often utilized as a model in carcinogenesis and mutagenesis tests. To evaluate the proliferative potential of this line, we developed a cytogenetic methodology (drifter technique) to obtain metaphases from cells that loose cellular adhesion when they underwent mitosis in culture. By this procedure, 2000 cells were counted, resulting in a mitotic index (MI) of 22.2%. Although this MI was not statistically different from the one obtained using either a classical cytogenetic method or a cell synchronization technique, the drifter technique has the advantage of not requiring the use of some reagents for the obtention of metaphases and also of diminishing the consumption of maintenance reagents for this cell line.
A linhagem celular Hep-2 é formada por células de carcinoma da laringe e é muito utilizada em modelos de carcinogênese e mutagenêse. Para avaliar o potencial proliferativo desta linhagem, desenvolvemos uma metodologia citogenética (técnica do sobrenadante) para obtenção de metáfases a partir de células que, ao entrarem em mitose, perdem adesão celular, ficando em suspensão no meio de cultura. Através deste procedimento, foram contadas 2000 células, correspondendo a um índice mitótico (IM) de 22.2% . Apesar de o IM obtido por esta técnica não ter sido estatisticamente diferente do IM obtido por outras metodologias citogenéticas clássicas, a técnica do sobrenadante é vantajosa porque elimina o uso de alguns reagentes utilizados na obtenção de metáfases e também diminui o consumo de reagentes de manutenção desta linhagem.
URI: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/2590
ISSN: 1516-8913
Other Identifiers: http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132005000500005
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