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Title: Identificação e caracterização de genes diferencialmente expressos em hifas de Candida albicans
Other Titles: Identification and characterization of genes differentially expressed in hypha of Candida albicans
Authors: Briones, Marcelo Ribeiro da Silva [UNIFESP]
Melo, Analy Salles de Azevedo [UNIFESP]
Keywords: Candida albicans
Testes genéticos
Mutagênese insercional
Adenosina trifosfatases
Issue Date: 2004
Publisher: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Citation: São Paulo: [s.n.], 2004. 173 p.
Abstract: A transicao morfologica de levedura para hifa e essencial para a virulencia de Candida albicans. Esta transicao envolve a expressao de genes hifa-especificos que estao sob o controle de fatores transcricionais. Para descobrir genes hifa-especificos utilizamos um metodo de triagem diferencial, onde clones de biblioteca de DNA genomico foram hibridizados com sondas de cDNA de levedura e hifa. Dois clones com aumento de expressao em hifa foram selecionados. O sequenciamento dos insertos destes clones permitiu a identificacao de dois genes metabolicos importantes: CaHXT7 (high-affinity hexose transporter) e CaYLL34 (da familia AAA ATPase). As regioes codificadoras completas destes genes foram caracterizadas e a analise das proteinas hipoteticas revelou que: (1) CaHxt7p tem um dominio de transportador de hexose e (2) CaYll34p tem dois dominios AAA ATPase, com possivel papel na fusao de membranas e degradacao de proteinas (por exemplo, a valosina humana). Este e o primeiro estudo que demonstra aumento de expressao de genes metabolicos em hifas de C. albicans. CaYLL34 foi inativado por mutagenese insercional, utilizando o cassete HisG-URA3HisG, gerando o mutante M61. Esta linhagem apresentou alteracoes morfologicas acentuadas como aumento de vacuolo, de tamanho celular e diminuicao na taxa de inducao de hifa em todas as condicoes analisadas. Estes resultados mostram que a diminuicao parcial dos niveis de CaYll34p celular e suficiente para afetar a morfologia celular caracteristica, porque somente um alelo foi inativado, enquanto o outro continua funcional. Ainda, a associacao dos produtos de CaHXT7 e CaYLL34 com a formacao de hifas torna estas proteinas potenciais alvos para desenvolvimento de novas drogas antifungicas
URI: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/18813
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