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Title: Isolamento e caracterização dos genes codificadores da glicoproteina de superfície de 90 kDa(GP90) e das proteinas ricas em serina, alanina e prolina (SAP) de Trypanosoma cruzi
Other Titles: Isolation and caracterization of the genes that encode a surface glycoprotein of 90 kDa(GP90) and serine-, alanine-, and proline-rich proteins(SAP) of T. cruzi
Authors: Franco da Silveira, José [UNIFESP]
Carmo, Mirian Silva do [UNIFESP]
Keywords: Antígenos de Superfície
Trypanosoma cruzi
Issue Date: 2001
Publisher: Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Citation: São Paulo: [s.n.], 2001. 117 + 21 anexos p. ilus.
Abstract: Os tripomastigotas metaciclicos do Trypanosoma cruzi expressam na sua superficie uma proteina majoritaria de 90 kDa (GP90). Anteriormente, nos tinhamos relatado o isolamento de um clone de cDNA (T7, GenBank L11287) que codifica a regiao carboxi-terminal da GP90. Com o objetivo de isolar copias completas da regiao transcrita do gene GP90, nos clonamos cDNAs por RT-PCR e triagem imunologica de bibliotecas de expressao de cDNA. O clone cDNA-L1, o prototipo do gene GP90, apresenta uma fase de leitura aberta (ORF) que codifica um polipeptideo de 694 aminoacidos com uma Mr aparente de 75.839,97 daltons. Ele paresenta dois motivos Asp (SxDxGxTW), assim como o motivo VTVxNVFLYDR, ambos comuns a todos membros da superfamilia GP85/sialidase de T. cruzi. A ORF do cDNA-LI contem dois possiveis codons de iniciacao e um sitio de splice antes do segundo ATG, sugerindo a existencia de desplicing alternativo nos transcritos do gene GP90. O cDNA J20b, isolado por triagem imunologica de uma biblioteca de expressao, codifica o dominio C-terminal da GP90 com uma sequencia tipica de insercao de ancora GPI. Analise dos clones de cDNA GP90 revelou a existencia de varios sitios de modificacoes pos-traducionais, tais como N-glicosilacao e adicao de ancora GPI. Estruturalmente, as GP90s sao glicoproteinas de superficie contendo cadeias de oligossacarideos N-ligados e podem ser ancoradas a membrana por uma sequencia GPI. Comparacao das sequencias do gene GP90 com membros do grupo II (GP85, TC85, SA85, ASP-2) da superfamilia das GP85/sialidase revelou 52-62 por cento de identidade ao nivel de aminoacidos, com regioes bastante conservadas separadas por sequencias divergentes de aminoacidos. Baseando-se nas suas propriedades estruturais os genes iiP90 poderiam ser considerados como membros do grupo II da superfamilia das GP85/sialidases. Analise de Northern blot mostrou que os genes GP90 sao preferencialmente acumulados nos tripomastigotas metaciclicos. Estudos adicionais sobre a transcricao destes genes utilizando-se RT-PCR mostrou a presenca de transcritos GP90 em...(au)
URI: http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/17480
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