Avaliação do perfil de susceptibilidade a fluconazol e voriconazol frente a isolados de Candida spp. pelo método de disco-difusão

Avaliação do perfil de susceptibilidade a fluconazol e voriconazol frente a isolados de Candida spp. pelo método de disco-difusão

Alternative title Evaluation of the fluconazole and voriconazole susceptibility profile of yeasts clinical isolates for disk diffusion method.
Author Azevedo, Ana Carolina de Almeida Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Colombo, Arnaldo Lopes Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Infectologia - São Paulo
Abstract Introdução: Em 2004, o NCCLS padronizou a técnica de disco-difusão para ensaios com fluconazol. Este teste permite a análise de grande número de amostras com custo reduzido, resultado rápido e de fácil interpretação, não exigindo equipamento especial, sendo assim de grande utilidade em estudos de vigilância de resistência a fluconazol e voriconazol. Objetivos: 1) Avaliar a distribuição de espécies de Candida identificadas em diferentes materiais biológicos obtidos de pacientes hospitalizados. 2) Descrever o perfil de susceptibilidade pelo método de disco-difusão para as diferentes amostras de Candida spp. frente a fluconazol e voriconazol. 3) Avaliar a prevalência de isolados de Candida spp. resistentes a fluconazol. Material e Métodos: Foram incluídas todas as amostras de Candida spp. isoladas de diversos materiais biológicos, provenientes de dois hospitais terciários da cidade de São Paulo, entre janeiro de 1998 a dezembro de 2003. Após triagem de Candida albicans, utilizando-se meio cromogênico CHROMagar- Candida, os isolados de Candida não-albicans foram identificados por análise do perfil bioquímico pelo método comercial ID-32C, complementados por análise de microcultivo. O perfil de susceptibilidade das amostras frente a fluconazol e voriconazol foi realizado pelo método de disco-difusão, de acordo com a normatização do documento do NCCLS M44-A (2004). A determinação dos diâmetros dos halos inibitórios foi realizada utilizando de um sistema automatizado de leitura de placas para análise das imagens - BIOMIC. Resultados: Avaliou-se 4.625 isolados clínicos de Candida spp., incluindo 2.393 cepas de C. albicans (51,7%), 658 de C. tropicalis (14,2%), 503 de C. glabrata (11%), 495 de C. parapsilosis (10,8%), 292 de C. rugosa (6,3%), 195 de C. guilliermondii (4,2%), 53 de C. krusei (1,1%) e 36 de Candida spp. Na análise dos resultados qualitativos de susceptibilidade a fluconazol as amostras de C. albicans, C. parapsilosis e C. tropicalis apresentaram diâmetro dos halos inibitórios maiores, resultado este que sugere alta susceptibilidade destas cepas a fluconazol. Para os isolados de C. glabrata, C. krusei e C. rugosa os halos obtidos apresentaram menores diâmetros, dado compatível com susceptibilidade reduzida destas espécies a fluconazol. Em relação a voriconazol, os isolados de C. albicans, C. parapsilosis, C. glabrata e C. tropicalis apresentaram diâmetros dos halos inibitórios maiores. Para as amostras de C. krusei e C. rugosa, os halos apresentaram menor diâmetro em relação as espécies mais susceptíveis. Na análise dos resultados quantitativos de susceptibilidade a fluconazol as taxas de SDD/R para os isolados avaliados foram de 2,0 e 5,8%, respectivamente, sendo visto maior porcentagem de SDD/R com C. glabrata, C. krusei e C. rugosa. Com exceção das amostras de C. rugosa, todas as amostras testadas com voriconazol apresentaram valores de CIM90 ≤ 0,5μg/mL. Conclusão: 1. Em nosso estudo, das 4.625 espécies de Candida testadas, C. albicans foi a espécie prevalente em todos os fluídos biológicos avaliados. 2. Entre as leveduras de Candida não-albicans, as espécies mais freqüentes foram C. tropicalis, C. glabrata e C. parapsilosis em ambos os períodos avaliados. 3. Susceptibilidade dose-dependente (SDD) e resistência a fluconazol foram pouco freqüentes, ocorrendo em apenas 2,0 e 5,8% das amostras, respectivamente. As espécies com maior porcentagem de isolados SDD/R para fluconazol foram C. glabrata, C. krusei e C. rugosa. 4. Voriconazol apresentou melhor atividade in vitro comparado a fluconazol, mesmo em cepas fluconazol-resistentes. 5. Não houve aumento de resistência a fluconazol e voriconazol nas amostras de Candida spp. testadas ao longo do período avaliado.

Introduction: The disk diffusion for fluconazole and voriconazole recently standardized by the NCCLS M44-A is suitable to test a large number of samples.. Objectives: 1) Evaluate the distribution of Candida species identified in different biological materials obtained from hospitalized patients in 2 tertiary hospitals. 2) Describe the antifungal susceptibility profile of different Candida species by the disk diffusion technique, using fluconazole and voriconazole disks. 3) Assess the prevalence of fluconazole resistant Candida spp. isolates. Methods: All clinical samples of Candida species originated from various types of biological material, between January 1998 to December 2003 in 2 tertiary hospitals in São Paulo were evaluated in this study. After initial screening for Candida albicans in chromogenic medium CHROMagar® Candida, the samples of non-albicans Candida species were identified by analysis of their biochemical profiles in the commercial system ID 32C and supplemented with microcultive. In vitro susceptibility to fluconazole and voriconazole were evaluated by according to the NCCLS M44-A disk diffusion method that was determination of inhibition diameters was read and interpreted automatically by the BIOMIC® image-analysis plate reader system. Results: A total of 4,625 yeast isolates were tested, including the following species: 2,393 C. albicans (51,7%), 658 C. tropicalis (14,2%), 503 C. glabrata (11%), 495 C. parapsilosis (10,8%), 292 C. rugosa (6,3%), 195 C. guillermondii (4,2%), 53 C. krusei (1.1%) e 36 Candida spp. The analyses of the qualitative results of susceptility profile to fluconazole, C. albicans, C. parapsilosis and C. tropicalis showed large inhibition zones diameters, suggesting high susceptibility of these strains to this antifungal. Isolates of C. glabrata, C. rugosa and C. krusei exhibited smaller diameters, compatible with the reduced susceptibility of these species to fluconazole. Regarding voriconazole, the isolates of C. albicans, C. parapsilosis, C. tropicalis and C. glabrata showed large inhibition zones diameters. However, C. krusei and C. rugosa isolates generated smaller inhibition zones diameters than other species more susceptible. In the analyses of the quantitative results of susceptility profile to fluconazole, a percentage of SDD/R to the isolates evaluated were 2,0% and 5,8%, respectively. The species that exhibited the highest rate of DDS/R were C. glabrata, C. krusei and C. rugosa. Regarding voriconazole, the majority of all yeast isolates tested showed CIM90 ≤ 0,5 µg/mL, except the samples of C. rugosa. Conclusion: 1. Among 4,625 yeast cultures evaluated, C. albicans was the species with the greatest frequency in all biological materials evaluated. 2. Among non-albicans Candida species, C. tropicais, C. glabrata and C. parapsilosis were most frequently in both the period assess. 3. DDS/R were low frequency, occurring in 2,0% and 5,8% of the samples, respectively. The incidence of species judged as DDS/R to fluconazole was C. glabrata, C. krusei and C. rugosa. 4. Voriconazole exhibited better activity in vitro than fluconazole, even in isolates resistant-fluconazole. 5. The resistance of fluconazole and voriconazole did not increase in the isolates of Candida spp. during the evaluated period.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Keywords Disco-difusão
Candida spp
Fluconazol
Voriconazol
Resistência a fluconazol
Pirimidinas
Language Portuguese
Date 2005-01-01
Published in AZEVEDO, Ana Carolina de Almeida. Avaliação do perfil de susceptibilidade a fluconazol e voriconazol frente a isolados de Candida spp. pelo método de disco-difusão. 2005. 100 f. Dissertação (Mestrado em Ciências) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo, São Paulo, 2005.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 100 p.
Access rights Open access Open Access
Type Dissertation
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/9094

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