Análise Da Resposta Imune Celular Após O Direcionamento In Vivo De Antígenos Do Hiv Para Células Dendríticas

Análise Da Resposta Imune Celular Após O Direcionamento In Vivo De Antígenos Do Hiv Para Células Dendríticas

Author Apostolico, Juliana De Souza Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Rosa, Daniela Santoro Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Microbiologia E Imunologia
Abstract The epidemic caused by human immunodeficiency virus (HIV) is the most important emerging infection in the last decades and until now, there is not an effective vaccine against HIV. Different approaches have been evaluated, such as recombinant proteins, viral vectors, DNA vaccines and, most recently, dendritic cell (DC) targeting. This strategy is based on DC features that place them as central for induction of immunity. Targeting is accomplished by the use of chimeric monoclonal antibodies (mAb) directed to DC surface receptors fused to the antigen of interest. In previous studies, our group showed that immunization of mice with a DNA vaccine encoding multiple CD4+ T cell epitopes from HIV-1 was able to induce broad, polyfunctional and long-term CD4+ and CD8+ T responses. Although the results obtained with this vaccine formulation are quite promising, DNA vaccines have shown limited immunogenicity in humans. For this reason, in the recent years, different strategies and platforms for immunogens production have been developed. In this context, the main goal of this project was to produce a chimeric mAb against the DC surface receptor (DEC205) fused to the HIV epitopes. To this end, a chimeric mAb aDEC205 fused to a sequence of eight epitopes for CD4+ T cells of HIV (αDECHIVBr8) and a DNA vaccine (pVAXHIVBr8) encoding the same epitopes were produced. Our results showed that mice immunized with αDECHIVBr8 in the presence poly (I:C) adjuvant presented higher CD4+ and CD8+ T cell responses when compared to mice that received the DNA vaccine (pVAXHIVBr8). In addition, pVAXHIVBr8 prime followed by αDECHIVBr8 boost induced higher magnitude and amplitude with proliferating- cytokine producing T cell responses to HIV-1 peptides than homologous DNA immunization or heterologous αDEC prime/DNA boost. When we analyzed the influence of adjuvants on the cellular immune response, we observed that mice immunized with poly (I:C) was able increase the expression of co-stimulatory molecules in DCs, and induced higher CD4+ and CD8+ polifunctional T cells when compared with the adjuvants: MPL, CpG ODN or αGalCer. Based on these results, we conclude that homologous prime-boost and heterologous boosting immunization strategies targeting CD4+ epitopes to DCs are effective to improve HIV-specific cellular immune responses when compared to standalone DNA immunization. Moreover, our results indicate that antigen targeting to DC is an efficient strategy to boost immunity against a multiepitope imunogen, especially in the context of DNA vaccination. Key-words: Human immunodeficiency virus (HIV), DNA vaccine, dendritic cells, DEC205, monoclonal antibody, epitopes, adjuvants.

A epidemia causada pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) é uma infecção emergente das últimas décadas e, até o momento, não existe uma vacina profilática eficaz disponível. Diferentes estratégias vem sendo avaliadas como proteínas recombinantes, vetores virais, vacinas de DNA e mais recentemente, o direcionamento de antígenos para as células dendríticas (DCs). Esta estratégia é baseada em diversas características das DCs, que desempenham um papel central na indução da imunidade. O direcionamento é realizado através do uso de anticorpos quiméricos monoclonais (mAb)fusionados aos antígenos de interesse diretamente apara receptores de superfície das DCs. Em estudos prévios, nosso grupo demonstrou que a imunização de camundongos com uma vacina de DNA, codificando epítopos promíscuos para LT CD4+ do HIV-1, foi capaz de induzir resposta ampla e polifuncional de LT CD4+ e CD8+. Apesar dos resultados obtidos serem bastante promissores, as vacinas de DNA apresentam limitada imunogenicidade em humanos. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo produzir um mAb quimérico contra um receptor de superfície das DCs (DEC205) em fusão com oito epítopos para linfócitos T CD4+ do HIV (αDECHIVBr8) e uma vacina de DNA codificando os mesmos epítopos (pVAXHIVBr8). Os resultados mostraram que camundongos imunizados com αDECHIVBr8 na presença do adjuvante poly (I:C) pela via intraperitoneal (I.P) apresentaram maior frequência de LT CD4+ e T CD8+ quando comparados aos camundongos imunizados com a vacina de DNA pVAXHIVBr8. Além disso, animais imunizados com a estratégia de prime/boost heteróloga ou seja, que receberam uma dose inicial (prime) com pVAXHIVBr8 seguida de reforço (boost) com αDECHIVBr8 apresentaram superior magnitude e amplitude de células T que proliferam e produziram citocinas em resposta aos peptídeos do HIV-1 do que os animais imunizados com a estratégia de prime/boost homóloga com HIVBr8 ou a estratégia heteróloga com prime com αDEC e boost com DNA. Por último, foi avaliado a influência dos adjuvantes poly I:C, Monofosforil lipídeo A (MPL), CpG ODN e αGalactosil-ceramida (αGalcer) nas imunizações com o αDECHIVBr8. Foi possível observar que a imunização com αDECHIVBr8 na presença de poly I:C foi capaz de aumentar a expressão de moléculas coestimulatórias nas populações de DCs e induzir maior frequência de linfócitos T CD4+ e T CD8+ polifuncionais quando comparado as imunizações assistidas pelos demais adjuvantes. Baseados nestes resultados, podemos concluir que estratégias de imunização que utilizam o direcionamento de epítopos para DCs na presença do adjuvante poly I:C induzem resposta imune celular de magnitude superior. Além disso, os resultados reforçam o conceito de que o direcionamento de antígenos para DCs é uma estratégia eficiente para aumentar a resposta imune antígeno-específica, especialmente no contexto de vacinas de DNA.
Keywords Human Immunodeficiency Virus (Hiv)
Dna Vaccine
Dendritic Cells
Dec205
Vírus Da Imunodeficiência Humana (Hiv)
Vacina De Dna
Células Dendríticas
Dec205
Nticorpo Monoclonal
Language Portuguese
Date 2017-11-30
Research area Desenvolvimento De Alternativas Terapêuticas E Vacinais Anti-Microbianas, Anti-Virais, Anti-Parasíticas E Antitumorais. Avaliação Da Resposta Imunológica, Mecanismos De Ação E Biologia Celular
Knowledge area Imunologia
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 132p.
Origin https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5555347
Access rights Closed access
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50702

Show full item record




File

File Size Format View

There are no files associated with this item.

This item appears in the following Collection(s)

Search


Browse

Statistics

My Account