Papel Da Tetrahidrobiopterina, Cofator Da Óxido Nítrico Sintase, Na Progressão Do Melanoma

Papel Da Tetrahidrobiopterina, Cofator Da Óxido Nítrico Sintase, Na Progressão Do Melanoma

Author Goncalves, Diego De Assis Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Melo, Fabiana Henriques Machado De Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Microbiologia E Imunologia
Abstract Cancer is one of the leading causes of death in the world today. Increased levels of reactive oxygen species, including superoxide anion (O2∙−), and the consequent installation of a pro-oxidant environment, contribute to the development of this disorder. The enzyme nitric oxide synthase (NOS), responsible for the production of nitric oxide, becomes the source of O2∙− when it is in a state referred as uncoupled. The presence of tetrahydrobiopterin cofactor (BH4) is critical to keeping the enzyme coupled. The objective of this study was to evaluate the uncoupling of nitric oxide synthase and its contribution to carcinogenesis in human melanoma cells. The data obtained suggest that BH4 synthesis is compromised in melanoma lineages. Through qPCR we show that the expression levels of the transcripts from via de novo, salvage and recycling pathways are altered in tumors when compared to melanocytes, suggesting low levels of BH4 and uncoupling of NOS in tumor cells. When treated with BH4 and L-sepiapterin (a precursor of BH4), cells from the SK-MEL-28 melanoma cell line showed decreased superoxide anion levels. Treatment with BH4 and L-sepiapterin decreased the cell viability of SK-MEL-28 cells. These same cells when treated with BH4 showed reduced ability to form colonies and tumorspheres. It has been shown that treatment with BH4 and L-sepiapterin rendered SK-MEL-28 cells more sensitive to apoptosis. This work contributed to evaluate the importance of BH4, as a cofactor of nitric oxide synthase, in the progression of melanoma.

Atualmente o câncer é uma das principais causas de morte no mundo. O aumento dos níveis de espécies reativas de oxigênio, entre elas o ânion superóxido (O2∙−),e a consequente instalação de um ambiente pró-oxidante,contribuem para o desenvolvimento dessa desordem. A enzima óxido nítrico sintase (NOS), responsável pela produção de óxido nítrico, se torna fonte de O2∙− quando está num estado referido como desacoplado. A presença do cofator tetrahidrobiopterina (BH4) é fundamental para manter a enzima acoplada. O objetivo deste trabalho foi avaliar se em células de melanoma humano ocorre o desacoplamento da óxido nítrico sintase e a sua contribuição na carcinogênese. Os dados obtidos sugerem que a síntese de BH4 está comprometida em linhagens de melanomas. Através de qPCR mostramos que os níveis de expressão dos transcritos dos genes da via de novo, salvamento e reciclagem estão alterados no melanoma quando comparados aos melanócitos, sugerindo baixo níveis de BH4 e desacoplamento da NOS nas células tumorais. Quando tratados com BH4 e L-sepiapterina (um precursor da BH4), células da linhagem de melanoma SK-MEL-28 apresentaram diminuição dos níveis de ânion superóxido. O tratamento com BH4 e L-sepiapterina diminuiu a viabilidade celular das células SK-MEL-28. Essas mesmas células quando tratadas com BH4 apresentaram redução na capacidade de formar colônias e tumoresferas. Foi mostrado que o tratamento com BH4 e L-sepiapterina, tornou as células SK-MEL-28 mais sensíveis à apoptose. Este trabalho contribuiu para avaliar a importância da BH4, como cofator da óxido nítrico sintase, na progressão do melanoma.
Keywords Células Tumorais
Células Tumorais
Language Portuguese
Date 2017-06-29
Research area Estudos De Biologia Celular, Sinalização, Mecanismos De Patogenicidade E Fatores De Virulência Em Patógenos Humanos (Vírus, Bactérias, Fungos E Tripanosomatídeos) E No Cancer
Knowledge area Biologia Celular
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 128p.
Origin https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5081503
Access rights Closed access
Type Dissertation
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50691

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