Detecção Da Linfocitose B Monoclonal Com Fenótipo De Leucemia Linfocítica Crônica E Avaliação Das Subpopulações Linfocitárias Em Indivíduos De Origem Nipônica Residentes No Brasil

Detecção Da Linfocitose B Monoclonal Com Fenótipo De Leucemia Linfocítica Crônica E Avaliação Das Subpopulações Linfocitárias Em Indivíduos De Origem Nipônica Residentes No Brasil

Author Faria, Mariane Ferreira De Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Yamamoto, Mihoko Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Medicina (Hematologia)
Abstract Introduction: Chronic Lymphocytic Leukemia (CLL) is the most common leukemia in the Western world, with an incidence of more than 3 cases per 100,000 individuals per year. However it is rare in Japanese, with an estimated incidence of 0.2 to 0.3 per 100,000 people per year. It is known that prior to the disease’s onset, CLL is preceded by an asymptomatic form, Monoclonal B lymphocytosis (MBL), where small amounts of cells with CLL phenotype are found in peripheral blood of healthy individuals. The MBL is separated into two distinct, low-count (<0,5x109 clonal B cells/L) and high-count groups (≥0,5×109 and <5,0x109 clonal B cells/L), the second group is usually accompanied by lymphocytosis and has been shown to be more likely to progress to CLL. Objectives: To evaluate the MBL in individuals of Japanese origin living in São Paulo. To evaluate the counts of the lymphocyte subpopulations in this population and to relate the presence of MBL with the B lymphocyte subpopulations. Methods: It was studied 268 volunteers without racial miscegenation, with age greater than or equal to 40 years (median 66, ranging from 40 to 96 years), being 42% of the male gender. Peripheral blood samples were used to perform the blood count and immunophenotyping by 8-color flow cytometry. The MBL was classified according to the phenotype: CLL-like MBL (CD19+, CD20low and CD5+), atypical CLL-like (CD19+, CD20high, CD5+ and variable CD23 expression) and non-CLL-like (CD19+CD5-). Purified MBL cells were obtained by sorting for molecular study of IgVH gene mutation and by FISH to study chromosomal abnormalities. The B lymphocyte subpopulations were identified according to the following phenotypes: immature B (CD19+, CD20+, CD38++, CD27-, CD10+, sIgM++, CD45+); Naive (CD19+, CD20+, CD38-/+, CD27-, sIgM+, CD10-, CD45+); B memory (CD19+, CD20+, CD38-/+, CD27+, sIgM-/+, CD10-, CD45+) and plasmocytes (CD19+, CD20-/low, CD38+++, CD27++, CD10-, sIgM-/+, CD45+). Results: The MBL was detected in 10% of cases. All clones had CLL phenotype. The median value of the MBL clone was 0.08% (0.01-19.8%) of B lymphocytes and 116x10³/L (31-19,800x10³/L). The frequency of MBL showed progressive increase with age, varying from 3.8% in individuals aged 40-59 years to 21.4% in those aged over 80 years (p=0.04). In a comparative analysis between individuals with and without MBL, there was no difference in B lymphocyte counts, there were differences only between T lymphocytes (p=0.049) and NK cells (p=0.002), both higher in cases with clone presence. The study of IgVH gene mutation was performed in five cases. All mutated cases were VH3: IgVH3-7.01, IgVH3-48 (2 cases) and IgVH3-21. The only non-mutated case was IgVH1-8. It was possible to perform FISH in seven cases and no chromosome abnormality was found. The total B lymphocyte values showed a reduction with progressive increase of age (p<0.001). The same occurred in relation to the subpopulations B Memory (p=0.001), Naive (p=0.001), immature B (p=0.047) and plasmocytes (p=0.011). In men, there was a decrease as the age increases in leukocyte counts (p=0.049), T lymphocytes (p=0.005), TCD4 (p=0.005), TCD8 (p=0.025) and NK cells (p=0.001), while there was a tendency to a lower value in total lymphocytes (p=0.070). However, in women there was only a decrease in total lymphocyte counts (p=0.020) and a trend towards a lower TCD8 lymphocyte count (p=0.080). Conclusions: The frequency of MBL in the Japanese population was similar to that reported in Western individuals. Most clones had CLL phenotype and all were low counts. Lower B and T lymphocyte counts were found in men and in the older age group.

Introdução: A Leucemia Linfocítica Crônica (LLC) é a mais frequente em ocidentais, com incidência de mais de 3 casos por 100.000 indivíduos por ano. No entanto, é rara em japoneses, com incidência estimada de 0,2 a 0,3 por 100.000 pessoas por ano. Sabe-se que, antes da manifestação da doença, a LLC é precedida por uma forma assintomática, a Linfocitose B Monoclonal (LBM), onde pequenas quantidades de células com fenótipo LLC são encontradas em sangue periférico de indivíduos saudáveis. A LBM é separada em dois grupos distintos, de baixa contagem (<0,5x109 células B clonais/L) e de alta contagem (≥0,5×109 e <5,0x109 células B clonais/L), sendo que o segundo grupo geralmente é acompanhado de linfocitose e tem mostrado maior probabilidade de evoluir para LLC. Objetivos: Avaliar a LBM em indivíduos de origem nipônica residentes em São Paulo. Avaliar as contagens das subpopulações linfocitárias nesta população e relacionar a presença de LBM com as subpopulações linfocitárias B. Casuística e Métodos: Foram estudados 268 voluntários sem miscigenação racial, com idade maior ou igual a 40 anos (mediana 66, variando 40 - 96 anos), sendo 42% do gênero masculino. Amostras de sangue periférico foram utilizadas para realização do hemograma e imunofenotipagem por citometria de fluxo de 8 cores. A LBM foi classificada de acordo com o fenótipo: LBM tipo LLC (CD19+, CD20fraco e CD5+), LBM tipo LLC atípica (CD19+, CD20forte, CD5+ e expressão do CD23 variável) e LBM CD5- (CD19+CD5-). Células LBM purificadas foram obtidas por sorting para estudo molecular da mutação dos genes IgVH e por FISH para estudo das anormalidades cromossômicas. As subpopulações linfocitárias B foram identificadas de acordo com os seguintes fenótipos: B imatura (CD19+, CD20+, CD38++, CD27-, CD10+, sIgM++, CD45+); Naive (CD19+, CD20+, CD38-/+, CD27-, sIgM+, CD10-, CD45+); B memória (CD19+, CD20+, CD38-/+, CD27+, sIgM-/+, CD10-, CD45+) e plasmócitos (CD19+, CD20-/fraco, CD38+++, CD27++, CD10-, sIgM-/+, CD45fraco). Resultados: Foi detectada LBM em 10% dos casos. Todos os clones tinham fenótipo LLC. O valor mediano do clone LBM foi 0,08% (0,01-19,8%) dos linfócitos B e 116x103/L (31-19800x103/L). A frequência da LBM mostrou aumento progressivo com a idade, variando de 3,8% nos indivíduos com idade entre 40-59 anos a 21,4% naqueles com idade acima de 80 anos (p= 0,04). Em análise comparativa entre os indivíduos com e sem LBM, não houve diferença nas contagens de linfócitos B, havendo diferença apenas entre os valores de linfócitos T (p=0,049) e células NK (p=0,002), ambos maiores nos casos com a presença do clone. O estudo da mutação do gene IgVH foi realizado em cinco casos. Todos os casos mutados foram VH3: IgVH3-7.01, IgVH3-48 (2 casos) e IgVH3-21. O único caso não mutado era IgVH1-8. Foi possível realizar FISH em sete casos e nenhuma anormalidade cromossômica foi encontrada. Os valores de linfócitos B totais mostraram uma redução com o aumento progressivo da idade (p<0,001). O mesmo ocorreu em relação às subpopulações B Memória (p=0,001), Naive (p=0,001), B imatura (p=0,047) e plasmócitos (p=0,011). Nos homens, houve diminuição com o aumento da idade nas contagens dos leucócitos (p=0,049), linfócitos T (p=0,005), TCD4 (p=0,005), TCD8 (p=0,025) e células NK (p=0,001), enquanto houve tendência a menor valor nos linfócitos totais (p=0,070). No entanto, nas mulheres houve diminuição apenas nas contagens de linfócitos totais (p=0,020) e tendência a menor valor dos linfócitos TCD8 (p=0,080). Conclusões: A frequência da LBM na população nipônica foi semelhante à relatada em indivíduos ocidentais. A maioria dos clones tinha fenótipo LLC e todos eram de baixa contagem. Foram evidenciadas contagens mais baixas de linfócitos B e T em homens e na faixa etária mais avançada.
Keywords Monoclonal B Lymphocytosis
Chronic Lymphocytic Leukemia
Lymphocytes B
Lymphocyte Subpopulations
Linfocitose B Monoclonal
Leucemia Linfocítica Crônica
Linfócitos B
Subpopulações Linfocitárias
Language Portuguese
Date 2017-10-31
Research area Doenças Linfoproliferativas Crônicas
Knowledge area Onco Hematologia
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 133p.
Origin https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5603354
Access rights Closed access
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50386

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