Estudo da importância dos linfócitos T CD4+ específicos para a trans-sialidase na imunidade contra a infecção experimental pelo Trypanosoma cruzi e isolamento dos genes codificadores de um receptor de célula T CD4+ específico para este antígeno

Estudo da importância dos linfócitos T CD4+ específicos para a trans-sialidase na imunidade contra a infecção experimental pelo Trypanosoma cruzi e isolamento dos genes codificadores de um receptor de célula T CD4+ específico para este antígeno

Título alternativo Establishment of T cell hydridomas specific for trans-sialidase Trypanosoma cruzi-antigen, identification, and cloning of T cell receptor genes
Autor Hiyane, Meire Ioshie Autor UNIFESP Google Scholar
Orientador Rodrigues, Mauricio Martins Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo O objetivo do presente trabalho foi estudar o papel e a especificidade dos linfocitos T CD4+ apos a imunizacao com genes ou proteinas recombinates da trans-sialidase de Trypanosoma cruzi. Observamos que apos a imunizacao experimental com o gene ou proteina recombinante da trans-sialidase, ha a inducao de linfocitos T CD4+ imunes produtores de interferon-γ. Estas celulas participam da imunidade protetora capaz de controlar a parasitemia e mortalidade apos um desafio experimental com T. cruzi. A fim de caracterizar melhor a especificidade e funcao destes linfocitos T CD4+ especificos para a trans-sialidase, geramos hibridomas de linfocitos T que nos permitiriam a posterior c10nagem dos genes que codificam os receptores de linfocitos T. A caracterizacao dos hibridomas de celula T demonstraram que 8 (40 por cento) produziram IFN-γ apos estimulo com o antigeno. Somente um hibridoma (5 por cento) produziu IL-4 e IL-10. As moleculas CD3, CD4 e TCR, mas nao CD8, foram detectadas na superficie desses hibridomas. Um deles foi selecionado para a c10nagem do receptor especifico dos linfocitos T. Com o uso da metodologia de PCR com adaptador nao-palindromico, fomos capazes de rapidamente e eficientemente determinar as regioes variaveis de ambas as cadeias dos receptores de celula T. Os resultados obtidos pelo PCR com adaptador nao-palindromico foi confirmado pelo isolamento e sequenciamento completo dos genes a partir do cDNA e pelo reconhecimento por um anticorpo especifico para a cadeia β variavel do receptor de celula T. A c10nagem destes receptores de linfocitos T devera facilitar a geracao de camundongos transgenicos
Palavra-chave Reação em cadeia da polimerase
Receptores de antígenos de linfócitos T
Trypanosoma cruzi
Idioma Português
Data de publicação 2006
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2006. 191 p.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 191 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Tese de doutorado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/23370

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