Anticorpos monoclonais contra proteina de 75kDa da superficie de Paracoccidioides brasiliensis inibem o crescimento e diminuem a doenca experimental pelo fungo

Abstract

Paracoccidioides brasiliensis e fungo termo-dimorfico responsavel pela paracoccidioidomicose (PCM), micose granulomatosa sistemica prevalente na America Latina. O fungo libera muitos antigenos, os quais podem encontrar-se transitoriamente ligados a superficie celular. Dois anticorpos monoclonais (mAbs) de diferentes isotipos especificos para proteina de 75 kDa foram produzidos e caracterizados. A proteina e secretada pelo P. brasiliensis e foi purificada e caracterizada. Usando os mAbs, a molecula foi purificada e in vitro apresentou atividade de fosfatase. Analises de microscopia confocal e citometria de fluxo demonstraram que ambos mAbs reconhecem a proteina na superficie do fungo, principalmente nas regioes de brotamento. Experimentos in vitro mostraram que o crescimento do P. brasiliensis foi inibido na presenca dos anticorpos. Alem disso, quando as celulas na fase de levedura do fungo foram opsonizadas com os mAbs levaram a aumento da fagocitose por macrofagos peritoneais murinos. Ensaios de imunizacao passiva com camundongos experimentalmente infectados com o P. brasiliensis tambem foram realizados. Os resultados mostraram que os animais tratados com os mAbs tiveram reducao na contagem das CFUs do pulmao, quando comparados aos animais controle, e a histopatologia mostrou diminuicao da inflamacao, ausencia de celulas fungicas e praticamente nao houve formacao de granulomas