Correlação entre mutações pontuais em LTR e níveis de carga proviral em portadores assintomáticos do vírus linfotropico de células T humanas tipo 1 (HTLV-1).

Abstract

Introdução: Estudos in vitro demonstram que delecoes ou mutacoes pontuais inseridas em cada repeticao imperfeita de 21 pb do Elemento Responsivo a Tax (TRE) nos promotores virais do Virus Linfotropico de celulas T humanas Tipo 1 (HTLV-1) selvagens aboliram a inducao de Tax. A partir deste dado, supomos que mutacoes similares poderiam afetar a proliferacao de celulas infectadas por HTLV-1 e alterar a carga proviral (CPv). Para testar esta hipotese, conduzimos uma analise genetica de corte transversal para comparar sequencias nucleotidicas completas de LTR que cobrem a regiao TRE-1 em uma amostragem de portadores assintomaticos de HTLV-1 com diferentes niveis de carga proviral. Metodos: Foi avaliado um total de 94 portadores assintomaticos de HTLV-1 com as sequencias de longa repeticao terminal (LTR) extremidade 5` determinadas e carga proviral de DNA de Tax definida usando-se uma sensivel tecnica de PCR em Tempo Real com SYBR Green. Os 94 individuos foram divididos em tres grupos baseados na medida da carga proviral: 31 com baixa, 29 com intermediaria e 34 com alta CPv. Alem disso, cada grupo foi comparado levando-se em conta sexo, idade e genotipo viral. Em outra analise, foi comparada a mediana da carga proviral entre individuos infectados com o virus mutante e virus o tipo selvagem. Resultados: Usando-se uma analise categorica, a substituicao G232A, localizada no dominio A do motivo TRE-1, foi detectada em 38,7% (12/31), 27.5% (8/29), e 61.8% (21/34) dos individuos com baixa, intermediaria e alta CPv, respectivamente. Uma diferenca significativa na deteccao desta mutacao foi encontrada entre sujeitos com alta e baixa CPv e entre aqueles com alta e intermediaria CPv (ambos p < 0,05), mas nao entre aqueles com baixa e intermediaria CPv (p > 0,05). Estes resultados foram confirmados por uma analise nao-parametrica que mostrou forte evidencia de aumento da CPv dentre individuos HTLV-1 positivos com a mutacao G232A em relacao aqueles sem esta mutacao (p < 0,03). Nenhuma diferenca significante foi observada entre os grupos em relacao a idade, sexo ou subtipo viral (p > 0,05). Conclusao: Os dados descritos aqui mostram que alteracoes no dominio A do motivo TRE-1 do HTLV-1, em especial a mutacao G232A pode aumentar a replicacao do HTLV-1 na maioria dos pacientes infectados