Efeito da suplementação com óleo de peixe no estresse oxidativo e no desempenho em tarefa visuo-espacial no modelo experimental de epilepsia induzida por pilocarpina.

Efeito da suplementação com óleo de peixe no estresse oxidativo e no desempenho em tarefa visuo-espacial no modelo experimental de epilepsia induzida por pilocarpina.

Título alternativo Fish oil supplementation efeects on oxidative stress and on viso-spatial task performance in the animal model of epilepsy induced by pilocarpine
Autor Nejm, Mariana Bocca Autor UNIFESP Google Scholar
Orientador Scorza, Fulvio Alexandre Autor UNIFESP Google Scholar
Instituição Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Pós-graduação Neurologia - Neurociências - EPM
Resumo A epilepsia do lobo temporal (ELT) e a forma mais comum de epilepsia em humanos e altamente refrataria ao tratamento farmacologico. Cada vez mais surgem evidencias que correlacionam as lesoes neuronais observadas na epilepsia com um excesso na producao de radicais livres (estresse oxidativo). Os acidos graxos poliinsaturados (PUFAs) sao importantes para o desenvolvimento e manutencao das funcoes do sistema nervoso central. Dados previos do nosso laboratorio demonstraram que a suplementacao cronica com oleo de peixe em animais com epilepsia pelo modelo da pilocarpina, imediatamente apos o Status epilepticus (SE), apresentaram efeitos neuroprotetores e neuroplasticos. A principal proposta deste trabalho foi avaliar se a suplementacao com oleo de peixe poderia apresentar efeito protetor contra o estresse oxidativo bem como beneficios em aspectos comportamentais. Ratos machos foram submetidos ao modelo experimental de epilepsia por administracao sistemica de pilocarpina (350 mg/kg, ip) e apos 3 horas de SE, foram divididos nos seguintes grupos tratados por 90 dias: animais com epilepsia que receberam solucao veiculo (EV), solucao de 85mg/kg de oleo de peixe (EO85) ou solucao de 510mg/kg de oleo de peixe (EO510); e animais controles que receberam solucao veiculo (CV), solucao de 85mg/kg de oleo de peixe (CO85) ou solucao de 510mg/kg de oleo de peixe (CO510). Com o termino do tratamento foram realizados: analise da expressao genica no hipocampo das subunidades p47PHOX e gp91PHOX da enzima NAD(P)H oxidase e das enzimas antioxidantes superoxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx); analise da expressao proteica no hipocampo de p47PHOX e gp91PHOX, SOD e CAT; avaliacao no hipocampo da producao de anion superoxido; analise da atividade enzimatica no hipocampo e no soro da SOD, catalase, GPx e capacidade antioxidante total (TAS); dosagem no soro de malondialdeido (MDA); e, avaliacao da memoria visuo-espacial (labirinto aquatico de Morris). Em relacao a enzima pro-oxidante NAD(P)H oxidase, os animais com epilepsia apresentaram maior expressao proteica da sub-unidade p47PHOX que foi reduzida pelo tratamento com 510mg/kg de oleo de peixe; a subunidade gp91PHOX revelou efeito da interacao entre os fatores onde o tratamento (ambas as doses) associado a condicao epilepsia, foi eficaz em reduzir sua expressao proteica; e, na analise de sua atividade enzimatica, os animais com epilepsia apresentaram aumento da producao de anion superoxido nas regioes hipocampais CA1 e CA3, sendo que o tratamento (ambas as doses) promoveu diminuicao dessa EROs. Analisando o sistema de defesa antioxidante foi constatado aumento do TAS no hipocampo dos animais com epilepsia sendo que o tratamento com oleo de peixe (ambas as doses) aumentou ainda mais esse indice. A SOD mostrou aumento de mRNA nos animais com epilepsia sendo esse aumento potencializado nos animais tratados com 85mg/kg de oleo de peixe. Os animais com epilepsia ainda mostraram aumento da atividade desta enzima no hipocampo e, no soro, efeito da interacao entre os fatores onde o tratamento (ambas as doses) associado a condicao epilepsia, potencializou a atividade. A CAT revelou aumento de sua atividade enzimatica no hipocampo dos animais com epilepsia e potencializacao deste aumento nos animais tratados com 85mg/kg de oleo de peixe. Para a GPx foi encontrado no soro dos animais com epilepsia efeito da interacao entre os fatores onde o tratamento (ambas as doses) associado a condicao epilepsia, potencializou esta atividade. No teste comportamental a suplementacao com oleo de peixe (ambas as doses) diminuiu a latencia para encontrar a plataforma de chegada no ultimo dia de treino mas essa melhora nao foi sustentada pois nao houve aquisicao (probe teste) nem retencao (probe re-teste) de memoria

Temporal lobe epilepsy (TLE) is the most common form of epilepsy in humans and highly refractory to pharmacological treatment. Evidence has pointed that neuronal lesions seen in epileptic seizures may be correlated with a free radicals overproduction (oxidative stress). Polyunsaturated fatty acids (PUFAs) are important for development, function and maintenance of central nervous system functions. Our laboratory data demonstrated that chronic fish oil supplementation in animals with epilepsy by pilocarpine model, immediately after Status epilepticus (SE) exhibited neuroprotective and neuroplastic effects. The main propose of this study was to evaluate if fish oil can also exhibits a protective effect against oxidative stress as beneficial effects on behavior aspects. Male rats were underwent to the experimental model by pilocarpine systemic administration (350 mg/kg, i.p) and 3 h after SE onset, were divided into the following groups treated for 90 days: animals with epilepsy that received vehicle (EV), 85mg/kg of fish oil (EO85) or 510mg/kg of fish oil (EO510) and control animals that received vehicle (CV), 85mg/kg of fish oil (CO85) or 510mg/kg of fish oil (CO510). After the treatment were analysed: gene expression in hippocampus of p47PHOX and gp91PHOX (subunits of NAD(P)H oxidase enzyme) and the antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx); protein expression in hippocampus of p47PHOX and gp91PHOX, SOD and CAT; assessment in hippocampus of superoxide anion production; enzymatic activity in hippocampus and serum of SOD, CAT, GPx and the total antioxidante system (TAS); measurement in serum of malondialdehyde (MDA); and viso-spatial memory evaluation (Morris water maze). Regarding the prooxidant enzyme NAD(P)H oxidase, epilepsy animals showed higher protein expression of p47PHOX subunit which were reduced by 510mg/kg fish oil treatment; gp91PHOX subunit revealed interaction effect since treatment both doses) associated with epilepsy condition, was effective in reducing its protein expression; and analyzing its enzymatic activity, animals with epilepsy showed increase on superoxide anion production in CA1 and CA3 hippocampal regions that was reduced by treatment (both doses). Antioxidant defense system analysis showed increase in hippocampal TAS of epileptic animals and treatment with fish oil (both doses) increased it. SOD showed mRNA increase in animals with epilepsy and this increase were potentiated in animals treated with 85mg/kg of fish oil. Epileptic animals also showed increase of this enzyme activity in hippocampus and in serum, interaction effect between fish oil treatment (both doses) associated with epilepsy condition revealed increase on its enzymatic activity. CAT showed increase in hippocampal enzymatic activity of epileptic rats and potentiation of this increase in animals treated with 85mg/kg of fish oil. For GPx it was found in serum of rats with epilepsy interaction effect where association between fish oil treatment (both doses) and epileptic condition, potentiated its enzimatic activity. On behavioral test fish oil supplementation (both doses) decreased the latency to find the arrival platform on the last training day, but this improvement was not sustained since there were no memory acquisition (probe test) or retention (probe re-test).
Assunto Animais
Epilepsia
Estresse Oxidativo
Óleos de Peixe
Pilocarpina
Aprendizagem em Labirinto
Ratos Wistar
Animais
Idioma Português
Financiador Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Data 2014
Publicado em NEJM, Mariana Bocca. Efeito da suplementação com óleo de peixe no estresse oxidativo e no desempenho em tarefa visuo-espacial no modelo experimental de epilepsia induzida por pilocarpina. 2014. 166f. Tese (Doutorado em Ciências) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo. São Paulo, 2014.
Editor Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 166 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Tese de doutorado
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/23136

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