Mecanismo regulatório do polimorfismo de inserção/deleção no controle da produção da Enzima Conversora de Angiotensina I

Mecanismo regulatório do polimorfismo de inserção/deleção no controle da produção da Enzima Conversora de Angiotensina I

Título alternativo Regulatory mechanism of Insertion/Deletion polymorphism in the control of production of Angiotensin I-Converting Enzyme
Autor Mafra, Fernando Francisco Pazello Autor UNIFESP Google Scholar
Orientador Araújo, Ronaldo de Carvalho Autor UNIFESP Google Scholar
Instituição Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Pós-graduação Ciências Biológicas (Biologia Molecular) – São Paulo
Resumo A Enzima Conversora de Angiotensina I (ECA) possui um polimorfismo de insercao/delecao de 287 pares de base no intron 16 na qual a presenca de uma sequencia de insercao e capaz de reduzir a quantidade de enzima circulante. Essa insercao de 287 pares de base do polimorfismo da ECA pertence a uma familia de sequencias denominada de elementos Alu, que sao capazes de produzir RNAs nao codificantes. Diversos trabalhos descrevem o polimorfismo de insercao/delecao da ECA associado com diversas doencas, no entanto, o mecanismo pela qual este polimorfismo e capaz de controlar a producao desta enzima ainda nao foi descrito. Para tanto, avaliamos se a expressao da sequencia de insercao, elemento AluYa5, seria capaz de controlar a expressao da ECA. Para validar este fato, foi feito a clonagem do elemento AluYa5, em vetores de expressao pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro e de clonagem pGEM-T Easy e foi feita a transfeccao transiente em celulas AD 293 com o intuito de superexpressar este elemento. A superexpressao do elemento AluYa5 pelo pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro em celulas embrionarios de rim (AD 293) foi capaz de reduzir significativamente a expressao do gene da ECA (p < 0,05), bem como sua atividade enzimatica (p < 0,05). O elemento AluYa5 tambem foi expresso nas celulas transfectadas com o vetor de clonagem pGEM-T Easy e induziu uma reducao significativa da expressao do gene da ECA (p < 0,05), indicando que o mesmo possui uma expressao independente. Nao somente o gene da ECA, mas os genes dos receptores B1 e B2 de cininas e o citocromo B 451 tambem tiveram sua expressao reduzida com a superexpressao do elemento AluYa5 (p < 0,05). Interessantemente, removendo uma sequencia de 11 pares de bases na porcao 3Æ da especifica do AluYa5, mostramos que este elemento nao e capaz de ser expresso e nao foi capaz de alterar a expressao do gene da ECA, nem modular sua atividade enzimatica, mostrando que este fragmento do elemento AluYa5 e importante para sua expressao e acao no controle dos niveis desta enzima. Pela primeira vez, propomos neste trabalho que a sequencia de insercao e capaz de produzir um RNA nao codificante e, desta forma, controlar a expressao do gene da ECA alem de outros genes relacionados, ou nao, ao sistema Renina-Angiotensina (SRA). Isto abre uma prerrogativa para novos estudos que envolvam acao do polimorfismo da ECA no surgimento de doencas que vao alem da via de sinalizacao canonica do SRA.
Palavra-chave Peptidil Dipeptidase A
Sistema Renina-Angiotensina
Polimorfismo Genético
Elementos Alu
Expressão Gênica
Idioma Português
Financiador Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Data de publicação 2013
Publicado em MAFRA, Fernando Francisco Pazello. Mecanismo regulatório do polimorfismo de Inserção/Deleção no controle da produção da Enzima Conversora de Angiotensina I. 2013. 156 f. Dissertação (Mestrado em Ciências) - Escola Paulista de Medicina, Unversidade Federal de São Paulo. São Paulo, 2013.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 133 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Dissertação de mestrado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/23080

Exibir registro completo




Arquivo

Nome: Tese-14274.pdf
Tamanho: 2.995MB
Formato: PDF
Descrição:
Abrir arquivo

Este item está nas seguintes coleções

Buscar


Navegar

Minha conta