Caracterização e regulação da expressão da isoforma c do gene spag11b durante o desenvolvimento do epidídimo do rato.

Caracterização e regulação da expressão da isoforma c do gene spag11b durante o desenvolvimento do epidídimo do rato.

Título alternativo Spatiotemporal expression of SPAG11B/C in the epididymis throughout the life span of the rat
Autor Ribeiro, Camilla Moreira Autor UNIFESP Google Scholar
Orientador Avellar, Maria Christina Werneck de Autor UNIFESP Google Scholar
Instituição Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Pós-graduação Farmacologia – São Paulo
Resumo Nosso grupo de pesquisa tem se dedicado ao estudo da organizacao genomica, expressao e funcao do gene Sperm-Associated Antigen 11B (SPAG11B). Produtos proteicos derivados de mecanismos de splicing alternativo desse gene possuem homologia com proteinas antimicrobianas da familia das β-defensinas. Sao expressos e secretados de forma abundante por celulas epiteliais para a luz do ducto epididimario de diferentes mamiferos, incluindo o homem. Apesar da acao antimicrobiana in vitro ja relatada para algumas isoformas recombinantes, o papel in vivo e a regulacao da expressao de isoformas do gene SPAG11B ainda nao foi esclarecido. Dessa forma, o objetivo do presente projeto foi caracterizar a expressao e regulacao da isoforma C do gene Spag11b durante o desenvolvimento do epididimo do rato. Para tal, foram utilizados os modelos experimentais de desenvolvimento pre- e pos-natal, cultura organotipica do ducto mesonefrico (precursor embrionario do epididimo) e, de castracao cirurgica bilateral. Ensaios moleculares, farmacologicos e de hibridizacao in situ, imuno-histoquimica, imunofluorescencia e analises de bioInformática foram realizados. Os resultados revelaram distribuicao ampla do RNAm Spag11b/c em tecidos genitais e extra-genitais embrionarios, em contraste a sua distribuicao preferencial em tecidos do trato reprodutor de ratos adultos, especialmente no epididimo. Nesse orgao, a expressao espaco-temporal da SPAG11B/C (RNAm e proteina) foi diferencialmente regulada durante o periodo embrionario e pos-natal. No epididimo embrionario, a expressao do RNAm Spag11b/c foi negativamente regulada pelo desenvolvimento, enquanto no periodo pos-natal a sua expressao aumentou com o avanco da idade. Foi observada uma transicao da localizacao celular da SPAG11B/C no epididimo, do compartimento mesenquimal para o epitelial, entre o periodo embrionario e pos-natal. Alem disso, a regulacao da expressao e da imunolocalizacao da SPAG11B/C por androgenios no epididimo de ratos adultos foi dependente do tempo de privacao androgenica, da regiao epididimaria e do tipo celular avaliado. A previsao in silico das sequencias regulatorias no promotor A do gene Spag11b revelou a presenca de elementos cis-regulatorios relacionados com funcoes diversas, entre eles os fatores de transcricao AR (receptor de androgenio) e PEA3 (Polyomavirus Enhancer Activator 3 Homolog). Mecanismos pos-transcricionais tambem podem estar envolvidos nessa regulacao. Em conjunto, os resultados apresentados ampliaram o potencial repertorio funcional da SPAG11B/C, que pode envolver acoes que vao alem da sua atividade antimicrobiana como uma proteina de secrecao epitelial e, tambem contribuiram para o melhor entendimento da participacao de proteinas da familia das β-defensinas no desenvolvimento do epididimo e manutencao da sua funcao.
Palavra-chave Epididimo
Proteínas da Membrana Bacteriana Externa
Androgênios
Regulação da Expressão Gênica no Desenvolvimento
Infertilidade Masculina
Idioma Português
Financiador Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)
Data de publicação 2013
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2013. 115 p.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 115 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Tese de doutorado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/22960

Exibir registro completo




Arquivo

Arquivo Tamanho Formato Visualização

Não existem arquivos associados a este item.

Este item está nas seguintes coleções

Buscar


Navegar

Minha conta