Expressao genica da IL-28b em pacientes com hepatite c cronica no pre-tratamento e na semana quatro

Expressao genica da IL-28b em pacientes com hepatite c cronica no pre-tratamento e na semana quatro

Título alternativo IL28B expression in patients with Chronic Hepatitis C at Baseline and Week 4
Autor Azevedo, Rafael Gonçalves Autor UNIFESP Google Scholar
Orientador Komninakis, Shirley Vasconcelos Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo Introdução: os SNPs rs12979860 e rs8099917 no gene IL-28B estao associados a cura espontanea na infeccao aguda pelo HCV e a resposta virologica sustentada (RVS) ou a falha virologica apos tratamento padrao da hepatite C cronica atraves da administracao de PEG-IFN/RBV. Estes SNPs possuem influencia na expressao da IL-28B. Objetivos: correlacionar a expressao genica da IL-28B com os SNPs rs12979860 e rs8099917, a RVR e as diferentes caracteristicas dos pacientes monoinfectados cronicamente pelo HCV. Metodologia: 30 pacientes foram avaliados antes do inicio da terapia e na quarta semana de tratamento padrao. Todos tinham idade igual ou superior a 18 anos, eram infectados cronicamente pelo virus da hepatite C, nao possuiam infeccao pelos virus da imunodefiCiência humana ou outras hepatites virais e estavam com indicacao para iniciar tratamento. PBMCs foram obtidas e o RNA total foi isolado pelo kit RNeasy Mini (Qiagen, USA). A transcricao reversa do RNA mensageiro foi feita com o kit High Capacity RNA-to-cDNA (Applied Biosystems, USA) e a quantificacao relativa da IL-28B foi realizada utilizando o kit TaqMan Gene Expression Assays (Applied Biosystems, USA). Regioes que compreendem os SNPs rs12979860 e rs8099917 foram amplificadas pela PCR seguindo os protocolos publicados por Grebely et al. em 2010 e Moreira et al. em 2012, respectivamente. A genotipagem foi realizada pelo sequenciamento genetico. As sequencias foram editadas no programa Sequencher 5.0.1 e as analises estatisticas foram realizadas no programa SPSS 21. A quantificacao relativa da IL28B foi avaliada no programa DataAssist 3.01 (Applied Biosystems, USA) utilizando o metodo 2 Delta-Delta Ct (2-ΔΔCt) descrito por Livak et al. em 2001. Todos os pacientes participantes do nosso estudo leram e assinaram o termo de consentimento livre esclarecido, tomando Ciência e autorizando a utilizacao dessas amostras. Alem disso, nosso trabalho tambem foi aprovado pelo Comite de Etica em Pesquisa da Universidade Federal de São Paulo/Hospital São Paulo (CEP numero 1705/10).Resultado: a taxa de RVR foi de 60%. os alelos rs12979860 CT/TT foram associados a presenca de fibrose em grau avancado (p=0,002; Teste Qui-quadrado) alelos rs8099917 TT foram significativamente associados a descendencia caucasiana (p=0,037; Teste Qui-quadrado) e rs12979860 CT;TT/rs8099917 TG;GG foram fortemente associados a presenca de fibrose em grau avancado (p=0,005; Teste Qui-quadrado). Antes do inicio da terapia, os pacientes com os genotipos virais 2 ou 3 tiveram o gene IL-28B 1,18 vezes mais expresso do que aqueles com 1 ou 4 (p=0,011; Teste t pareado; IC, 95%). Na expressao genica, o periodo pretratamento foi 1,84 vezes maior nos individuos com os alelos rs12979860 CC/rs8099917 TT em relacao aqueles com os alelos rs12979860 CT;TT/rs8099917 TG;GG (p=0,015; Teste t; IC, 95%). Na quarta semana de tratamento a diferenca significativamente maior (1,67 vezes) na expressao da IL-28B nos individuos com os alelos rs12979860 CC/rs8099917 TT versus rs12979860 CT;TT/rs8099917 TG;GG (p=0,046; Teste t pareado; IC, 95%).Discussao: o grande diferencial do nosso trabalho foi estudar a relacao entre a expressao do gene Il28B e a quarta semana de tratamento. Nosso estudo mostrou que sua expressao e maior no grupo de pacientes que possuem os alelos rs12979860 CC e rs8099917 TT juntos do que no grupo que possuem os alelos rs12979860 CT/TT e rs8099917 TG/GG, tanto antes do inicio da terapia como na quarta semana de tratamento.Conclusao: verificamos que os melhores preditores de RVR acontecem quando os genotipos rs12979860, rs8099917 e os niveis de expressao do gene IL-28B ocorrem concomitantemente.
Palavra-chave Hepatite C Crônica
Expressão Gênica
Tempo para o Tratamento
Doença Crônica
Manejo de Espécimes
Interleucinas
Inibidores de Proteases
Idioma Português
Data de publicação 2013
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2013. 76 p.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 76 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Tese de doutorado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/22892

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