Mapeamento das catepsinas lisossomais em tecidos oculares humanos e estudo do envolvimento destas enzimas em processos antigênicos

Mapeamento das catepsinas lisossomais em tecidos oculares humanos e estudo do envolvimento destas enzimas em processos antigênicos

Título alternativo Mapping of lysosomal cathepsins in human ocular tissues and study of the involvement of these enzymes in processes antigenic
Autor Coppini, Larissa Pereira Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo O presente trabalho teve como objetivo contribuir para a compreensao do papel das catepsinas da classe das cisteino-peptidases, na modulacao da angiogenese na cornea in vitro e in vivo. Para tanto, foram utilizados 20 olhos humanos, que tiveram suas corneas desprezadas pra transplante. As corneas humanas foram homogenizadas e utilizando o substrato Z-Phe-Arg-MCA (Z = N-benziloxicarbonil; MCA = 7-amino-4-metilcumarina) e inibidor especifico E-64, identificamos a presenca da atividade desta classe de enzimas neste tecido. Alem disso, a analise por PCR em tempo real e western blotting revelou o perfil de expressao das catepsinas B, K, L, S e V. Verificamos ainda que o processamento do plasminogenio (glicoproteina precursora de plasmina e fragmentos angiostaticos) endogeno ocorreu pela acao de cisteino-peptidases presentes na cornea humana. Entretanto, observamos que embora possua elevada expressao genica, a catepsina V nao e a principal responsavel por esta hidrolise, mostrando que outras cisteino-peptidases estao promovendo o processamento da proteina. Por fim, considerando que a manutencao da avascularizacao da cornea e essencial para garantir a transparencia ocular e uma boa visao, realizamos experimentos de inducao de angiogenese na corneas de 20 coelhos, cujo um dos grupos recebeu tratamento com inibidor E-64 in vivo, que comprovou a participacao de cisteino-peptidases na modulacao deste processo. Alem do estudo na cornea, a presente tese apresentou o perfil de distribuicao do plasminogenio, bem como da atividade e expressao genica de cisteino-peptidases nao apenas na cornea, mas tambem na iris, corpo ciliar, retina, coroide, esclera e nervo optico. No entanto, a funcao destas enzimas nestes tecidos oculares humanos, e seu envolvimento na modulacao do plasminogenio e angiogenese, ainda precisam ser elucidados
Palavra-chave Animais
Tecidos
Olho
Córnea
Cisteína Proteases
Peptídeo Hidrolases
Inibidores da Angiogênese
Plasminogênio
Coelhos
Animais
Idioma Português
Data de publicação 2013
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2013. 121 p.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 121 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Tese de doutorado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/22802

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