Caracterização imunológica do padrão Quasi-Homogeneo (QH), observado pela técnica de imunofluorescência indireta em células HEp-2

Caracterização imunológica do padrão Quasi-Homogeneo (QH), observado pela técnica de imunofluorescência indireta em células HEp-2

Título alternativo Immunological characterization of the nuclear pattern designated oQuasi-homogeneous patterno observed by the indirect immunofluorescence technique in HEp-2 cells
Autor França, Natalia Regine de Autor UNIFESP Google Scholar
Orientador Andrade, Luiz Eduardo Coelho Autor UNIFESP Google Scholar
Instituição Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Pós-graduação Ciências da Saúde Aplicadas à Reumatologia – São Paulo
Resumo Varias doencas reumaticas autoimunes apresentam autoanticorpos (AAc) capazes de reconhecer diversos antigenos celulares. Alguns AAc guardam associacao estreita com determinadas doencas, sendo considerados marcadores da doenca e de ocorrencia extremamente improvavel em individuos sadios. Outros AAc aparecem indiscriminadamente em diferentes doencas autoimunes, infecciosas e neoplasicas, embora com titulos e frequencias variadas. Nosso grupo tem tido oportunidade de identificar e descrever diversas associacoes relevantes de padroes de imunofluorescencia indireta (IFI) no teste ANA-HEp-2 (Andrade et al., 1991; Andrade et al., 1996; Dellavance et al., 2005; Dellavance et al., 2009b; Mariz et al., 2011). Recentemente foi observado na rotina laboratorial um novo padrao, que por sua semelhanca com os padroes nuclear homogeneo (Ho) e nuclear pontilhado fino denso (PFd), foi, denominado opadrao nuclear Quasi-homogeneoo (QH). O objetivo do presente trabalho foi caracterizar imunologicamente o padrao QH, detectado pela tecnica de IFI e sua possivel correlacao clinica. Foram aleatoriamente selecionados 60 soros com padrao QH, juntamente com 30 soros com padrao Ho e 30 soros com padrao PFd para pesquisa de diversos autoanticorpos: anti-DNA nativo (dsDNA), anti-histona, antinucleossomo, anticardiolipina, anticorpos contra antigenos nucleares extraiveis (ENA), bem como rastreamento por western blot (WB) contra extrato total de celulas MOLT- 4. Verificamos que o padrao de fluorescencia QH foi reconhecido em mais de um substrato comercial de celulas HEp-2 e em celulas sob diferentes fixacoes, nao se tratando dessa maneira de um artefato raro associado a uma forma peculiar de preparacao das celulas. As amostras com padrao QH apresentaram alguns autoanticorpos especificos em algumas amostras: tres com anticorpos anti-SS-A/Ro (5%), dois com anticardiolipina IgG (3,33%), 22 antinucleossomo (36,6%) e 10 anti-histona (16,67%). Houve comportamento heterogeneo no ensaio de western blot, com reconhecimento de bandas variaveis por varias amostras QH. Nao observamos associacao do padrao QH com manifestacoes clinicas ou alguma doenca em particular. Concluimos que o padrao QH representa um tipo de reatividade ANA-HEp-2 distinta dos padroes Ho e PFd no que tange aos autoanticorpos relacionados e as associacoes clinicas. O padrao QH tem um perfil heterogeneo de imunorreatividade e seu significado clinico e variavel

Several autoimmune rheumatic diseases present autoantibodies (AAb) capable of recognizing various cell antigens. Some AAb keep a very close association with a given disease and are considered markers of this disease, and extremely unlike to occur in healthy individuals. Other AAb appear indiscriminately in different autoimmune, infectious, and neoplasic diseases, although with variable titers and frequencies. There are also AAb that appear with reasonable frequency in healthy individuals. The determination of antinuclear antibodies by indirect immunofluorescence (IIF) in HEp-2 cells (ANA HEp-2) is one of the major methods for autoantibody screening. The fluorescence pattern observed in the ANA HEp-2 test reflects the distribution of the recognized self-antigen, and is therefore relevant to the knowledge of the autoantibody target. Our group has been able to identify and describe several relevant associations of ANA-HEp-2 fluorescence patterns (Andrade et al., 1991; Andrade et al., 1996; Dellavance et al., 2005; Dellavance et al., 2009b; Mariz et al., 2011). Recently a new pattern, which closely resembles both the homogenous (Ho) and the dense fine speckled (DFS) nuclear patterns, has been observed in our routine laboratory. This pattern was designated "Quasi- Homogeneous" (QH) pattern. Due to the frequent presence of the QH pattern in routine AAb screening, this study aimed at its immunological characterization, investigate the target antigen(s) involved and evaluate possible clinical associations. We randomly selected 60 sera with QH, along with 30 sera with Ho and 30 sera with DFS, which underwent investigation for various autoantibodies: anti-native DNA (dsDNA), anti-histone, antinucleosome, anticardiolipin, antibodies against extractable nuclear antigens (ENA), as well as screening by western blot (WB) against total extract of MOLT-4 cells. The fluorescence pattern QH was recognized in more than one commercial substrate for HEp-2 cells and in different fixation protocols, and therefore did not represent a rare artifact associated with a particular form of preparation of cells. QH samples showed low frequency of anti-SS-A/Ro antibodies (5%), IgG anticardiolipin (3.33%); and intermediate frequency of antinucleosome (36.6%) and anti-histone (16.67%) antibodies. There was heterogeneous behavior in western blot test, with recognition of varied bands by different QH samples, although the majority of them showed no reactivity. Association of QH samples with systemic autoimmune rheumatic diseases was intermediate between the high association observed for Ho samples and the irrelevant association observed for DFS samples. We conclude that the QH pattern represents a genuine type of ANA-HEp-2 reactivity that must be differentiated from Ho and DFS patterns with respect to the related autoantibodies and clinical xii associations. The QH pattern has a heterogeneous profile of immunoreactivity and its clinical significance is variable.
Palavra-chave Anticorpos Antinucleares
Autoanticorpos
Doenças Reumáticas
Doenças Autoimunes
Imunofluorescência
Idioma Português
Financiador Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)
Data de publicação 2011
Publicado em FRANÇA, Natalia Regine de. Caracterização imunológica do padrão Quasi-Homogêneo (QH), observado pela técnica de imunofluorescência indireta em células HEp-2. 2011. 111 F. Dissertação (Mestrado em Ciências) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo. São Paulo, 2011.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 111 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Dissertação de mestrado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/22520

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Nome: Tese-13717.pdf
Tamanho: 12.75MB
Formato: PDF
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