Estudo da especificidade de enzimas proteoliticas de animais hematofagos utilizando biblioteca de peptideos em sistema phage display

Estudo da especificidade de enzimas proteoliticas de animais hematofagos utilizando biblioteca de peptideos em sistema phage display

Título alternativo Specificity study of hematophagous insect proteolytic enzymes using a peptide library in Phage Display system
Autor Clara, Renan Orsati Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo Os animais hematofagos, que se alimentam de sangue, desenvolveram durante a sua evolucao a habilidade de manter o sangue em um estado fluido, atraves da producao de substancias que interferem na hemostasia, a fim de facilitar a aquisicao e armazenamento do sangue. O estudo de proteases e inibidores presentes tanto na saliva quanto no intestino desses animais fornecem conhecimento sobre como atuam essas moleculas no hospedeiro e ajudam nos estudos de metodos de controle. Triatoma infestans e Riphicephalus microplus, dois artropodes hematofagos exclusivos, possuem enzimas importantes para a aquisicao e diGestão do sangue, a serinoprotease triapsina e a cisteinoprotease BmCL1, respectivamente. O presente trabalho teve por objetivo estudar a especificidade das duas proteases utilizando a tecnica de Phage Display. Para tal, no presente trabalho obteve-se as enzimas em diferentes sistemas recombinantes assim como na forma nativa. A serinoprotease de barbeiro foi expressa, porem nao se conseguiu utiliza-la devido a impossibilidade de ativacao e purificacao. A BmCL1 foi altamente expressa em Pichia pastoris. As sequencias dos peptideos obtidas no Phage Display para a enzima triapsina mostram a sequencia SVWVRS como preferencial, representando 40 % das sequencias analisadas. As sequencias de peptideos selecionados para rBmCL1 mostram a presenca de residuos de Leu e Arg, sugerindo fortemente que a enzima hidrolise ligacoes peptidicas contendo ambos aminoacidos. A analise dessas sequencias em bancos de dados nao mostraram nenhum possivel substrato nativo para as enzimas estudadas. Em conclusao, os resultados de selecao por Phage Display confirmam as especificidades para triapsina e rBmCL1, no entanto, revelam uma nova especificidade para a cisteinoprotease, o que pode conferir um novo papel para a protease do carrapato
Palavra-chave Triatoma
Rhipicephalus
Enzimas
Idioma Português
Data de publicação 2010
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2010. 101 p.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 101 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Tese de doutorado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/22431

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