Alternative title | Hydrolitic properties of picornavirus 3C peptidase |
Author |
Gouvea, Iuri Estrada
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Advisor |
Juliano, Luiz
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Abstract | Os picomavírus traduzem seu genoma RNA+ em uma única poliproteína que necessita de processamento proteolítico para produzir partículas virais viáveis. A peptidase 3C é a principal responsável por estas clivagens, constituindo alvo promissor ao desenvolvimento de compostos antivirais contra importantes patógenos (poliovírus, vírus da hepatite A (HAV), vírus da febre aftosa (FMDV) e rhinovírus (HRV-14)). A Picornaína-3C é uma cisteíno-peptidase, porém apresenta uma estrutura tridimensional semelhante a quimotripsina. Descrevemos o efeito de sais cosmotrópicos na atividade catalítica da Picornaína-3C de poliovírus (PV-3C) e notamos uma ativação de até 100 vezes na hidrólise de peptídeos com supressão intramolecular de fluorescência na presença de 1 M de citrato de sódio. Esta ativação é anion dependente, segue a série de Hofmeister (citrato3- > S042- > HP04 2- > acetato - > HC03- > CI- > Br > I-) e não parece depender da seqüência do substrato. A ativação resulta do aumento no kcat e não de alterações no Km e o sal alterou o pKal da enzima em 1 unidade. Utilizando a sonda ANS, mostramos uma alteração na exposição de sítios hidrofóbicos da proteína na presença de sal. Esta alteração na conformação da enzima é corroborada pelo estudo termodinâmico, que indica um sítio ativo mais organizado na presença de 1 M de citrato de sódio. Em conjunto, nossos dados indicam que o sal cosmotrópico provoca alteração estrutural e com aumento na eficiência catalítica da PV-3C. |
Keywords |
Peptídeo Hidrolases
Picornaviridae |
Language | Portuguese |
Date | 2005 |
Published in | São Paulo: [s.n.], 2005. 70 p. |
Publisher | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) |
Extent | 70 p. |
Access rights | Closed access |
Type | Dissertation |
URI | http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/20492 |
File | Size | Format | View |
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