Propriedades hidrolíticas da cisteíno peptidase 3C de picornavírus

Propriedades hidrolíticas da cisteíno peptidase 3C de picornavírus

Alternative title Hydrolitic properties of picornavirus 3C peptidase
Author Gouvea, Iuri Estrada Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Juliano, Luiz Autor UNIFESP Google Scholar
Abstract Os picomavírus traduzem seu genoma RNA+ em uma única poliproteína que necessita de processamento proteolítico para produzir partículas virais viáveis. A peptidase 3C é a principal responsável por estas clivagens, constituindo alvo promissor ao desenvolvimento de compostos antivirais contra importantes patógenos (poliovírus, vírus da hepatite A (HAV), vírus da febre aftosa (FMDV) e rhinovírus (HRV-14)). A Picornaína-3C é uma cisteíno-peptidase, porém apresenta uma estrutura tridimensional semelhante a quimotripsina. Descrevemos o efeito de sais cosmotrópicos na atividade catalítica da Picornaína-3C de poliovírus (PV-3C) e notamos uma ativação de até 100 vezes na hidrólise de peptídeos com supressão intramolecular de fluorescência na presença de 1 M de citrato de sódio. Esta ativação é anion dependente, segue a série de Hofmeister (citrato3- > S042- > HP04 2- > acetato - > HC03- > CI- > Br > I-) e não parece depender da seqüência do substrato. A ativação resulta do aumento no kcat e não de alterações no Km e o sal alterou o pKal da enzima em 1 unidade. Utilizando a sonda ANS, mostramos uma alteração na exposição de sítios hidrofóbicos da proteína na presença de sal. Esta alteração na conformação da enzima é corroborada pelo estudo termodinâmico, que indica um sítio ativo mais organizado na presença de 1 M de citrato de sódio. Em conjunto, nossos dados indicam que o sal cosmotrópico provoca alteração estrutural e com aumento na eficiência catalítica da PV-3C.
Keywords Peptídeo Hidrolases
Picornaviridae
Language Portuguese
Date 2005
Published in São Paulo: [s.n.], 2005. 70 p.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 70 p.
Access rights Closed access
Type Dissertation
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/20492

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