Enucleação de células L929

Enucleação de células L929

Título alternativo Enucleation of cells in culture: standardization of the procedure and infection of L929 cytoplasts with Shigella flexneri M90T
Autor Yamamoto, Denise Autor UNIFESP Google Scholar
Orientador Rabinovitch, Michel Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo A infeccao por patogenos intracelulares paradigmaticos e, em muitos casos, induzida e dirigida pela modulacao de cascatas de sinalizacao da celula hospedeira por determinantes de virulencia sequencialmente secretados pelas bacterias. Estudos pelo metodo dos microarrays do perfil de expressao genica de celulas hospedeiras infectadas por diferentes patogenos revelaram a modulacao de numerosos genes no decorrer da infeccao. Muitas das respostas transcricionais identificadas se revelaram protetoras, outras poderiam favorecer a sobrevida intracelular dos patogenos, e outras ainda poderiam ser neutras. A interpretacao destes resultados e dificil porque: nao se conhece a funcao de um grande numero de genes; a modulacao genica de curta duracao poderia nao ser registrada; os perfis de mRNA podem nao refletir a abundancia e a atividade das proteinas; por sua complexidade e conectividade as cascatas de sinalizacao poderiam secundariamente afetar a funcao de genes que podem nao estar relacionados a infeccao intracelular. Com o desenvolvimento de metodos para enucleacao em massa de celulas em monocamadas, estudos pioneiros demonstraram que celulas enucleadas (denominadas citoplastos), podiam ser infectadas com Toxoplasma gondu, Chlamydia psittaci, C. trachomatis, e RAckettsia prowazekii, todos patogenos intracelulares obrigatorios. Alem disso, em experiencias nas quais muito poucos citoplastos foram infectados, nao foi documentada a proliferacao de amastigotas de T. cruzi em celulas enucleadas. Considerando a ampla diversidade dos fenotipos de infeccao induzidos pelos diferentes patogenos, acreditamos que a participacao do nucleo celular para a infeccao ideve ser examinada caso por caso. Esta dissertacao examina a infeccao por Shigella flexneri serotipo 5a de celulas de camundongo L929, aderidas a substratos de vidro e enucleadas por uma modificacao do metodo de Prescott, por centrifugacao na presenca de citocalasina Ba(au)
Palavra-chave Shigella flexneri
Infecção
Shigella flexneri
Infection
Idioma Português
Data de publicação 2003
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2003. 52 p.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 52 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Dissertação de mestrado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/19844

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