Caracterizacao de sistemas de anti-corpos-auto-antigenos associados ao padrao de imunofluorescencia de pontos citoplasmaticos isolados

Caracterizacao de sistemas de anti-corpos-auto-antigenos associados ao padrao de imunofluorescencia de pontos citoplasmaticos isolados

Título alternativo Caracterization of autoantibody-autoantigen systems associated with cytoplasm discrete speckled immunofluorescence pattern
Autor Laurino, Claudia Cilene Fernandes Correia Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo Objetivo - Identificacao e caracterizacao de auto-anticorpos e auto-antigenos associados ao padrao de imunofluorescencia indireta (IFI) de Pontos Citoplasmaticos Isolados (PU). Materiais e metodos - Foram selecionados soros que apresentavam o padrao de PCI a IFI. Esses soros foram analisados por IFI dupla em microscopia confocal, imunomicroscopia eletronica, immunoblotting, imunoprecipitacao de antigenos proteicos sintetizados in vitro, HPTLC de lipideos seguida de imunocoloracao e analise de espectrometria de massas para antigenos lipidicos. Os dados clinicos foram obtidos por revisao de prontuarios e entrevistas com os medicos assistentes. Resultados Dois sistemas de auto-antigeno-auto-anticorpo associados com o padrao de IFI de pontos citoplasmaticos isolados (PCI) foram identificados e denominados de padrao PCI-I e PCI-II. O padrao PCI-I foi caracterizado por 3 a 20 pontos brilhantes bem delimitados e homogeneamente distribuidos pelo citoplasma. O padrao PCI-11 foi caracterizado por apresentar mais de 30 pontos por todo o citoplasma, com predominancia perinuclear, grande heterogeneidade de tamanho e tendencia a aglomeracao. De acordo com esta classificacao foram obtidos 27 soros PCI-I e 6 soros PCI-II. Por IFI dupla em microscopia confocal e imuno-microscopia eletronica os soros PCI-11 mostraram co-localizacao com os anticorpos monoclonais anti-LAMP-2 (proteina-2 associada a membrana do lisossomo) e anti-EEA1 (antigeno-1 do endossomo primario) e com receptor de transferrina, marcadores da via endociticaexocitica. Os dominios citoplasmaticos reconhecidos pelos auto-anticorpos PCI-11 parecem ser delimitados por membrana. Por immunoblotting soros PCI-11 reconheceram uma banda com mobilidade relativa de 180kDa e imunoprecipitaram a proteina EEA1. Em contraste, os anticorpos PCI-I nao apresentaram co-localizacao com anti-EEA1 e anti-LAMP-2, porem apresentaram co-localizacao parcial com o anticorpo monoclonal anti-GW182, que reconhece uma proteina de 182 kDa (GW182), presente em aglomerados citoplasmaticos de mRNA. Os soros PCI-I nao demonstraram qualquer reatividade ao immunoblotting com diversos extratos celulares e nao imunoprecipitaram as proteinas GW182 e EEA1 sintetizadas in vitro. IFI apos extracao lipidica previa do substrato mostrou abolicao drastica do padrao PCI-I mas nao do PCI-II. Por HPTLC/imunocoloracao dos 27 soros PCI-I 24 reagiram com uma banda do extrato lipidico de celulas HEp-2, que foi identificada comoa(au)
Palavra-chave Autoanticorpos
Autoantígenos
Imunofluorescência
Anticorpos Antifosfolipídeos
Idioma Português
Data de publicação 2003
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2003. 138 p.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 138 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Tese de doutorado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/19756

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