Leishmania(L.) amazonensis: análise molecular e imunológica de uma genoteca de cDNA de amastigotas e mapeamento de marcadores genéticos (ESTs) em bandas cromossômicas

Leishmania(L.) amazonensis: análise molecular e imunológica de uma genoteca de cDNA de amastigotas e mapeamento de marcadores genéticos (ESTs) em bandas cromossômicas

Título alternativo Leishmania(L.) amazonensis: molecular and immunological analysis of a cDNA library from amastigotes and mapping of expressed seguence tags (ESTs) in chromossomal bands
Autor Gentil, Luciana Girotto Autor UNIFESP Google Scholar
Orientador Barbiéri, Clara Lúcia Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo O objetivo do presente estudo foi a construcao de uma genoteca de cDNA de amastigotas de Leishmania (L.) amazonensis, sua caracterizacao imunologica e molecular e o mapeamento de sequencias-etiqueta expressa: (ESTs) geradas pelo sequenciamento dos seus clones. A analise imunologica de 322 clones aleatorios revelou que todo; reagiram com soro policlonal ante-amastigotas de L. (L.) amazonensis demonstrando a representatividade da genoteca de cDNA das forma: amastigotas de L. (L.) amazonensis. Entre os clones isolados, 100 foran sequenciados gerando novas ESTs de L. (L.) amazonensis, das quais 53 por cento nao( mostraram alinhamento significativo, enquanto que 47 por cento apresentaram significante identidade com sequencias depositadas no banco de dados: 3,2°r mostraram identidade a genes de L. (L.) amazonenses, 23,4 por cento com sequencia; de cromossomos L. (L.) major e 19 por cento com identidade a genes de outro; tripa nosomatideos. Apos o mapeamento em bandas cromossomicas de L. (L. amazonensis resolvidas por eletroforese de campo pulsado (PFGE), 9 ESTs E 2 genes de cisteina proteinases foram utilizados para estudar o polimorfismo de cromossomos entre as especies L. (L.) amazonenses e L. (L.) major. O resultados indicam um possivel rearranjo no cromossomo 19 de L. (L.) majoi pois os dois clones de L. (L.) amazonensis que apresentaram identidade com 1 cosmidio L4766 mapearam em dois cromossomos diferentes de L. (L. amazonensis, de 1250 kb (LIaAmEST0087) e de 720 kb (gene LIacys1). Pc outro lado, as ESTs que mapearam em uma unica banda sao uteis comi marcadores cromossomo-especifico na determinacao do cariotipo molecular a cepa LEM690 de L. (L.) amazonenses. A caracterizacao de ESTs tem sidi amplamente utilizada, sendo eficiente na descricao de novos genes e n, geracao de marcadores em mapas fisicos. Em continuidade aos estudos desenvolvidos em nosso laboratorio sobra cisteina proteinases de L. (L.) amazonensis como antigenos protetores contra ; infeccao homologa e visando obter copias completas de genes codificadore dessas enzimas, utilizaram-se sondas derivadas dos genes Llacys1 de L. (L. amazonensis, previamente clonado em nosso laboratorio, e Ldccys1 de L. (L. chagasi para a selecao da genoteca de cDNA. Com o gene Llacys1 forama(au)
Palavra-chave Leishmania
Biblioteca gênica
Sequência expressas marcadoras
Cisteína endopeptidases
Idioma Português
Data de publicação 2003
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2003. 111 p.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 111 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Dissertação de mestrado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/19744

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