Análise comparativa da sinalização celular mediada por receptores AT1 da angiotensina II em células ovarianas de hamster chines e em células de músculo liso da aorta de coelho

Análise comparativa da sinalização celular mediada por receptores AT1 da angiotensina II em células ovarianas de hamster chines e em células de músculo liso da aorta de coelho

Título alternativo Comparative analysis of cell signaling mediated by angiotensin II AT1 receptors in chinese hamster ovary cells and aortic smooth muscle cells
Autor Franca, Lucimar Pereira de Autor UNIFESP Google Scholar
Orientador Shimuta, Suma Imura Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo Objetivos: Testou-se a hipotese de que as regioes nao codificadoras do gene do receptor AT, da angiotensina II mediaria a funcao do receptor AT, afetando o mecanismo de taquifilaxia. Investigou-se tambem o efeito da Ali, extracelular e intracelularmente administrada, sobre a redistribuicao dos ions Na+, Ca 2+ e producao de mensageiros secundarios em celulas de musculo liso da aorta de coelho em cultura primaria e transformadas espontaneamente e em celulas de ovario de hamster chines transfectadas com o receptor ATA (CHO-AT,). Metodos: Transfeccao das celulas, inicialmente, com o cDNA contendo somente a regiao codificadora do gene, e posteriormente com diferentes extensoes das regioes 3' e 5' nao codificadoras. Foram utilizadas celulas CHO, que nao contem o receptor AT, em contraste com as celulas do musculo liso que expressam endogenamente . Fez-se tambem, a co-transfeccao do cDNA do trocador Na+/Ca2+ em celulas CHO-ATi, para estudos comparativos com as celulas de musculo liso que o possuem de forma endogena. Enfocou-se tambem, o papel das organelas como o nucleo, a mitocondria e o reticulo endoplasmatico/sarcoplasmatico na sinalizacao de Ca 2+ por acao da Ali. Os estudos foram realizados apoiados nas tecnicas de imunocitoquimica, biologia molecular, dosagens bioquimicas, microfluorimetria, microinjecao, microscopia de fluorescencia confocal e de alta resolucao. Conclusoes: O receptor AT, recombinante, contendo a regiao 3' nao codificadora, preveniu a taquifilaxia para a captacao de Ca 2' em resposta a Lys2All, sugerindo que esta regiao estaria envolvida neste fenomeno. A analise das imagens de fluorescencia obtidas de ions Na+ e Ca2+, mostrou que a presenca do trocador Na+/Ca2+ influiu na distribuicao das concentracoes intracelulares de Na' e Ca 2+nas celulas CHO-ATi. A resposta ao Ca 2' bem como as oscilacoes de Ca 21 induzidas nessas celulas pela acao da Ali mostraram alta dependencia ao Ca 2+ extracelular enquanto nas celulas do musculo liso, somente as oscilacoes de Ca 2+ foram dependentes do Ca 2+ extracelular. A observacao de que a Ali microinjetada no nucleo induziu aumentos na concentracao do Ca 2+ indicou que os receptores para a Ali presentes no nucleo foram ativados e produziram IP3, responsavel pelo aumento no Ca 2+ nuclear. Conclui-se que a Ali extracelular internalizada ou a de origem intracelular pode interagir com o receptor nuclear e sinalizar o seu efeito mitogenico
Palavra-chave Trocador de Sódio e Cálcio
Microscopia Confocal
Idioma Português
Data de publicação 2003
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2003. 176 p.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 176 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Tese de doutorado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/19652

Exibir registro completo




Arquivo

Arquivo Tamanho Formato Visualização

Não existem arquivos associados a este item.

Este item está nas seguintes coleções

Buscar


Navegar

Minha conta