Clonagem e expressao de genes de fosfolipase C(plcB, plcC e plcD) de Mycobacterium tuberculosis em Escherichia coli e Mycobacterium smegmatis

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dc.contributor.author Silva, Ionara de Oliveira Garcia [UNIFESP]
dc.date.accessioned 2015-12-06T23:03:13Z
dc.date.available 2015-12-06T23:03:13Z
dc.date.issued 2004
dc.identifier.citation São Paulo: [s.n.], 2004. 77 p.
dc.identifier.uri http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/18832
dc.description.abstract Objetivo: Clonar tres genes de fosfolipase C de Mycobacterium tuberculosas (plcB, pIcC e picD) e expressar as proteinas recombinantes em E. coli e M. smegmatis. Verificar atividade hemolitica dos recombinantes. Metodo: Os fragmentos correspondentes foram clonados em vetores de expressao de E. coli da serie pET23a-b-c e usados para transformar E. coli BL21(ΔE3). Os mesmo fragmentos foram clonados em vetores da serie pMV261-2-3 e usados para transformar M. smegmatis. A expressao das proteinas recombinantes em E. coli foi analisada em gel de poliacrilamida e por imunoblot. Ensaios de hemolise foram realizados com os recombinantes construidos em BL21 (ΔE3) e M. smegmatis. Resultados: Os tres fragmentos foram clonados e as sequencias foram confirmadas por sequenciamento. As proteinas recombinantes foram visualizadas em gel de poliacrilamida e confirmadas em experimentos de imunoblot com soro anta-PLCA. Nao foi observada hemolise nos ensaios realizados com os recombinantes em BL21(DE3). Foi observada hemolise com os recombinantes construidos em M. smegmatis, incluindo os controles negativos. Conclusoes: Foram obtidos recombinantes expressando as proteinas PLCB, PLCC e PLCD em E. coli e M. smegmatis. Testes de hemolise para verificacao da atividade enzimatica das proteinas recombinantes devera ser padronizado pt
dc.format.extent 77 p.
dc.language.iso por
dc.publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rights Acesso restrito
dc.subject Mycobacterium tuberculosis pt
dc.subject Fosfolipases Tipo C pt
dc.title Clonagem e expressao de genes de fosfolipase C(plcB, plcC e plcD) de Mycobacterium tuberculosis em Escherichia coli e Mycobacterium smegmatis pt
dc.title.alternative Cloning and expression of phospholipase C gene (plcB, plcC and plcD) from Mycobacterium tuberculosis in Escherichia coli and Mycobacterium smegmatis en
dc.type Dissertação de mestrado
dc.identifier.file epm-019626.pdf
dc.description.source BV UNIFESP: Teses e dissertações
unifesp.campus Universidade Federal de São Paulo, Escola Paulista de Medicina pt



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