Identificação e caracterização de genes diferencialmente expressos em hifas de Candida albicans

Identificação e caracterização de genes diferencialmente expressos em hifas de Candida albicans

Alternative title Identification and characterization of genes differentially expressed in hypha of Candida albicans
Author Melo, Analy Salles de Azevedo Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Briones, Marcelo Ribeiro da Silva Autor UNIFESP Google Scholar
Abstract A transicao morfologica de levedura para hifa e essencial para a virulencia de Candida albicans. Esta transicao envolve a expressao de genes hifa-especificos que estao sob o controle de fatores transcricionais. Para descobrir genes hifa-especificos utilizamos um metodo de triagem diferencial, onde clones de biblioteca de DNA genomico foram hibridizados com sondas de cDNA de levedura e hifa. Dois clones com aumento de expressao em hifa foram selecionados. O sequenciamento dos insertos destes clones permitiu a identificacao de dois genes metabolicos importantes: CaHXT7 (high-affinity hexose transporter) e CaYLL34 (da familia AAA ATPase). As regioes codificadoras completas destes genes foram caracterizadas e a analise das proteinas hipoteticas revelou que: (1) CaHxt7p tem um dominio de transportador de hexose e (2) CaYll34p tem dois dominios AAA ATPase, com possivel papel na fusao de membranas e degradacao de proteinas (por exemplo, a valosina humana). Este e o primeiro estudo que demonstra aumento de expressao de genes metabolicos em hifas de C. albicans. CaYLL34 foi inativado por mutagenese insercional, utilizando o cassete HisG-URA3HisG, gerando o mutante M61. Esta linhagem apresentou alteracoes morfologicas acentuadas como aumento de vacuolo, de tamanho celular e diminuicao na taxa de inducao de hifa em todas as condicoes analisadas. Estes resultados mostram que a diminuicao parcial dos niveis de CaYll34p celular e suficiente para afetar a morfologia celular caracteristica, porque somente um alelo foi inativado, enquanto o outro continua funcional. Ainda, a associacao dos produtos de CaHXT7 e CaYLL34 com a formacao de hifas torna estas proteinas potenciais alvos para desenvolvimento de novas drogas antifungicas
Keywords Candida albicans
Testes genéticos
Mutagênese insercional
Adenosina trifosfatases
Language Portuguese
Date 2004
Published in São Paulo: [s.n.], 2004. 173 p.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 173 p.
Access rights Closed access
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/18813

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