Analise quantitativa de circulos excisados pelo rearranjo dos genes do receptor de linfocitos T (TREC) no lupus eritematoso sistemico

Analise quantitativa de circulos excisados pelo rearranjo dos genes do receptor de linfocitos T (TREC) no lupus eritematoso sistemico

Título alternativo Quantitative analysis of T-cell receptor gene excision circles(TREC) in systemic lupus erythematosus
Autor Silva, Cristiane Kayser Veiga da Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo Introdução: O lupus eritematoso sistemico (LES) e uma doenca auto-imune que se caracteriza por uma serie de alteracoes nos linfocitos T. O timo e o principal orgao responsavel pelo desenvolvimento e maturacao das celulas T. Recentemente um novo metodo foi descrito para quantificacao da funcao timica em sangue periferico. Trata-se da amplificacao por PCR do TREC (circulos excisados pelo rearranjo do TCR), um marcador de emigrantes timicos recentes, gerado durante o processo de rearranjo genico dos receptores de celulas T no timo. A analise dos niveis de TREC em linfocitos perifericos podera contribuir para o entendimento do papel do timo e dos linfocitos recem egressos do timo nas alteracoes imunologicas encontradas no LES. Objetivos: Quantificacao dos niveis de TREC em celulas linfomononucleares do sangue periferico de individuos com LES em atividade e comparacao com individuos normais pareados conforme sexo e idade. Materiais e metodos: Foram avaliados 32 pacientes com diagnostico de LES ha menos de 3 anos (criterios do Colegio Americano de Reumatologia-ACR) e 32 individuos sadios pareados para sexo e idade. A media de idade dos pacientes com LES foi de 26,7 anos (18 a 47 anos) e dos controles normais de 27,2 anos (18 a 50 anos). Apos consentimento informado, todos os pacientes foram avaliados segundo um protocolo clinico padrao, compreendendo os dominios do SLEDAI. As dosagens de anticorpos anti-DNA e complemento serico foram feitas por imunofluorescencia indireta em Crithidia luciliae e imunohemolise radial, respectivamente. A quantificacao dos niveis de sjTREC de DNA genomico em celulas linfomononucleares de sangue periferico foi feita pelo metodo de PCR quantitativo em tempo real (Real time PCR). Uma curva padrao foi construida para quantificacao absoluta dos valores do produto amplificado para cada amostra. Para a construcao da curva padrao foi utilizado um fragmento de 376bp da sequencia do sjTREC clonado no plasmideo pCR II-TOPO. A concentracao de TREC foi expressa em numero de copias de TREC por g de DNA. Resultados: A media do SLEDAI nos 32 pacientes avaliados foi de 14,6, variando de 6 a 28. A manifestacao clinica mais frequente foi acometimento renal, encontrada em 23 dos 32 pacientes (71,9 por cento), seguida por lesoes cutaneas, encontradas em 10 (31,3 por cento) pacientes. Os niveis de TREC nos pacientes com LES (4,1 ± 3,9 x 104 TRECs/gg DNA) foram significativamente menores do que nos controles normais (8,9 ± 7,9 x 104 TRECs/gg DNA) (p=0,004). Os niveis de TREC nos controles normais apresentaram uma correlacao inversaa(au)
Palavra-chave Lúpus Eritematoso Sistêmico
Timo
Linfócitos T
Idioma Português
Data de publicação 2004
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2004. 94 p.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 94 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Tese de doutorado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/18757

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