Estudos moleculares de inibidores de serinoproteases das larvas do carrapato Boophilus microplus

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dc.contributor.advisor Tanaka, Aparecida Sadae [UNIFESP]
dc.contributor.author Sasaki, Sergio Daishi [UNIFESP]
dc.date.accessioned 2015-12-06T23:02:18Z
dc.date.available 2015-12-06T23:02:18Z
dc.date.issued 2002
dc.identifier.citation São Paulo: [s.n.], 2002. 125 p. ilustab.
dc.identifier.uri http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/18033
dc.description.abstract A partir de extratos de larvas e ovos do carrapato Boophilus microplus foram purificados inibidores de serinoproteases (BmTIs) utilizando cromatografia de afinidade em tripsina-Sepharose. Os BmTIs apresentaram massas moleculares entre 6,2 kDa e 18,4 kDa e atividade inibitoria sobre tripsina, HuPK (calicreina plasmatica humana) e elastase de neutrofilos. Utilizando cromatografia de troca-ionica coluna Resource Q, os BmTls foram separados nas formas proteicas denominadas BmTI-A, BmTI-B, BmTI-C, BmTI-D, BmTI-E e BmTI-F. O material nao-retido na cromatografia em coluna Resource Q foi separado em coluna Mono S obtendo-se as formas BmTI-1, BmTI-2, BmTI-3, BmTI-4 BmTI-5, BmTI-6 e BmTI-7. Todas as formas de BmTIs apresentaram atividade inibitoria sobre tripsina com constante de dissociacao (Ki) na ordem de nM. As formas BmTI-A, BmTI-D, BmTI-2, BmTI-3 e BmTI-4, inibem elastase de neutrofilos e HuPK com Ki na ordem de nM. O BmTI-D mostrou ser o melhor inibidor de HuPK e o BmTI-4 mais eficiente para elastase de neutrofilos, com constantes de dissociacao (Ki) de 11,6 nM e 0,2 nM, respectivamente. As formas BmTI-A, BmTI-D, BmTI-2, BmTI-3, BmTI-4 e BmTI6 tiveram as porcoes N-terminais determinadas por sequenciamento automatico de aminoacidos, estas sequencias parciais permitiram a classificacao destes BmTIs dentro da familia dos inibidores de serinoproteases tipo Kunitz de tecido animal. Os BmTIs pos tripsina-Sepharose foram utilizados na imunizacao de bovinos, mostrando acao imunogenica (producao de anticorpos anti-BmTIs) e protetora contra a infestacao por esta especie de carrapato. Na tentativa de clonar o gene de um BmTI foram utilizadas duas estrategias de clonagem baseadas na sintese do cDNA a partir do RNA mensageiro de larvas do carrapato 8. microplus. 1) A construcao de uma biblioteca de...(au) pt
dc.format.extent 125 p.
dc.language.iso por
dc.publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rights Acesso restrito
dc.subject Inibidores de serino proteinase pt
dc.subject Carrapatos pt
dc.title Estudos moleculares de inibidores de serinoproteases das larvas do carrapato Boophilus microplus pt
dc.title.alternative Molecular studies of serine protease inhibitors from cattle tick Boophilus microplus(larvae) en
dc.type Dissertação de mestrado
dc.identifier.file epm-017956.pdf
dc.description.source BV UNIFESP: Teses e dissertações
unifesp.campus São Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM) pt



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