Expressão protéica e atividades das isoformas (136, 96 e 69 kDa) da enzima conversora de angiotensina I nos diferentes tecidos de ratos wistar, wistar isogênico e espontaneamente hipertensos

Expressão protéica e atividades das isoformas (136, 96 e 69 kDa) da enzima conversora de angiotensina I nos diferentes tecidos de ratos wistar, wistar isogênico e espontaneamente hipertensos

Título alternativo Protein expreession and activity of angiotensin I converting enzyme isoforms in different tissues of wistar, isogenic wistar and spontaneosly hypertensive rats
Autor Ronchi, Fernanda Aparecida Autor UNIFESP Google Scholar
Orientador Casarini, Dulce Elena Autor UNIFESP Google Scholar
Resumo A Enzima Conversora de Angiotensina (ECA, peptidil dipeptidase A, EC 3.4.15.1), participa da regulacao da pressao sanguinea, inativando um peptideo biologicamente ativo vasodilatador, a Bradicinina, e converte a Angiotensina I (AI) em Angiotensina II (AII), um potente peptideo vasopressor, a qual exerce varias funcoes fisiologicas e patofisiologicas. Em estudos anteriores de nosso laboratorio, foram detectadas em urina de ratos Wistar (W) as isoformas de 190 e 65 kDa, perfil este semelhante ao descrito para os individuos normotensos. Enquanto que na urina de ratos espontaneamente hipertensos (SHR), foram identificadas as isoformas de 80 e 65 kDa, fragmentos N-terminais da ECA, repetindo o perfil encontrado para individuos hipertensos leves. A proposta deste trabalho foi verificar se a expressao das isoformas das ECAs N-dominio de 65 kDa detectadas na urina de ratos Wistar e as isoformas de 65 e 80 KDa encontradas na urina de ratos SHR nao estaria restrita ao rim e poderia estar sendo encontrada nos tecidos: adrenal, aorta, coracao, figado, pulmao, rim e testiculo. Em nossos estudos purificamos e caracterizamos as isoformas da ECA nos diferentes tecidos dos ratos Wistar, Wistar Isogenicos (WI), caracterizado por genes essencialmente identicos (cruzamento entre ratos Wistar irmaos), e SHR. Os tecidos foram homogeneizados em tampao fosfato de sodio 0,1 M, pH 7,2, contendo sucrose 0,34 M, NaCI 0,3 M e inibidores, PMSF 100 mM e pOHMB 0,1 mM (1g de tecido para 10 mL de tampao). Os homogenatos foram submetidos separadamente a uma gel filtracao em coluna AcA-44, equilibrada com tampao Tris-HCI 50 mM, pH 8,0, contendo NaCI 150 mM. Foram coletadas fracoes de 1,0 mL sob fluxo de 20 mL/h. A atividade enzimatica foi determinada utilizando-se o Z-Phe-HL como substrato. Os pesos moleculares foram determinados por eletroforese em gel de poliacrilamida e a expressao proteica verificada por Western Blotting utilizando anticorpo monoclonal contra ECA de rato. A quantificacao de angiotensina II (AII) foi determinada por...(au)
Palavra-chave Peptidil dipeptidase A
Hipertensão
Rim
Idioma Português
Data de publicação 2002
Publicado em São Paulo: [s.n.], 2002. 106 p. ilustab.
Publicador Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extensão 106 p.
Direito de acesso Acesso restrito
Tipo Dissertação de mestrado
Endereço permanente http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/17921

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